不同剂量bfgf和硫糖铝联合局部应用对兔背任意皮

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1、不同剂量bFGF和硫糖铝联合局部应用对兔背任意皮【关键词】碱性成纤维细胞生长因子　　关键词:碱性成纤维细胞生长因子;硫糖铝;皮瓣;成活率　　摘要:目的观察不同剂量碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和硫糖铝联合局部应用对兔背部任意皮瓣断蒂后成活率的影响，以判断bFGF和硫糖铝最佳有效使用剂量.方法以大体观察、计算机图像分析、荧光素钠试验、99Tcm放射核素测定、组织学和免疫组化等技术，测定断蒂后皮瓣的成活率，观察皮瓣血流灌注和血管新生情况.结果bFGF和硫糖铝联合局部应用可提高皮瓣成活率，皮瓣成活率与bFGF和硫糖铝

2、的剂量明显相关:皮瓣成活率:A组对照组（24.2±8.2）%;B组bFGF125AU组（37.5±7.0）%;C组bFGF250AU组（65.5±7.1）%;D组bFGF500AU组（72.3±5.6）%;C组与D组间无显著差异（P>0.05），其他各组间均有显著差异（P<0.05）.说明bFGF达到125AU即有明显疗效，250AU效果最佳，超过一定剂量bFGF的作用就不再增加.结论皮瓣成活率与bFGF和硫糖铝的剂量明显相关.　　Keyskinflapsurvivalratesandjudgethep

3、arativelyeffectivedosageofbFGF-ageanalysisofputer，fluoresceintrail，assayof99Tcm，histologyobservationandimmunohistochemistrytechnique　inatetheeffectsofdifferentdosagesofbFGFationintheskinflaps.RESULTSTheflapsurvivalratecanberisedbymeansoflocalapplicationofbFGFo

4、龄家兔（雌雄不限）12只，体质量2.5～3kg，由本校实验动物中心提供.bFGF由珠海东大制药有限公司提供（2.5×106AU・L-1）;硫糖铝由东北制药厂提供（100mg・L-1）;100g・L-1荧光素钠由本校西京医院药厂提供;免疫组化试剂:CD34mAb及S-P试剂盒购自福州迈新免疫组化试剂公司;羊抗鼠二抗（DakoEnvision试剂盒）购自Dako基因公司;PYP:上海红旗制药厂制造;99TcmO4-由钼锝发生器淋洗获得，由中国核动力研究院西南反应堆提供;γ照相机

5、:SPECT:Starcam3000型，由美国GE公司制造.　　1.2方法脊柱两侧设计蒂在髂嵴连线上的任意皮瓣各1块，面积3cm×6cm，皮瓣间隔4cm，按用药剂量不同分为3个实验组和1个对照组:A组为生理盐水1mL;B组为bFGF125AU（0.05mL）+硫糖铝1mL;C组为bFGF250AU（0.1mL）+硫糖铝1mL;D组为bFGF500AU（0.2mL）+硫糖铝1mL，各组皮瓣均为6块.术前3d兔背部以100g・L-1硫化钠脱毛，用30g・L-1戊巴比妥钠以33mgӥ

6、9;kg-1，ip，麻醉，动物取俯卧位，碘酒乙醇消毒，铺无菌巾，按设计线切开皮肤、皮下组织、肉膜，在肌膜浅面剥离，掀起皮瓣，受床放置1条直径1mm的硬膜外麻醉导管（带侧孔），固定导管，皮瓣原位缝合.从导管注射药物，每次注射时间5min（3滴・min-1），2次・d-1，用药3d.术后4d各组动物行皮瓣断蒂术，断蒂后7d测量皮瓣成活面积，计算成活率.以成活面积/皮瓣总面积×100%为成活率.　　1.2.1荧光素钠试验断蒂后15min100g・L-1荧光素钠15mgӥ

7、9;kg-1，iv，15min后进行荧光摄影.　　1.2.2放射核素试验断蒂后7d各组家兔用PYP1/10支，iv，30min后99Tcm55.5MBq标记红细胞，iv，1h后处死动物，按设计面积及厚度切下双侧皮瓣，立即在γ照相机下测定γ计数并行ECT照相.　　1.2.3组织学检查术后2，3和4d各组皮瓣取活检0.5cm×0.2cm，40g・L-1甲醛固定，进行HE和CD34免疫组化染色，光镜下观察皮瓣毛细血管生长情况并计数.血管计数方法:所有血管均计数在内，每组6张切片，每张切片在中央区及周边区随机

8、选取5个高倍视野，血管计数后求其平均数.在免疫组化染色片中，凡与周围结缔组织成分分离的染成棕色的单个内皮细胞或内皮细胞簇被认为是一个微血管.统计学处理:数据用本校卫生统计学教研室的SPLM3.0软件进行分析处理，组间差异检验用单因素方差分析及其两两比较，数据用x±s表示.当P<0.05时认为有统计学的显著性差异.　　2结果　　2.1皮瓣的成活率D组（7