epo对失血性休克合并内毒素血症兔tnfα、il6、il10、mda影响的研究

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1、EPO对失血性休克合并内毒素血症兔TNFα、IL6、IL10、MDA影响的研究【关键词】内毒素血症;促红细胞生成素;多脏器功能不全;炎症因子　　Abstract：[Objective]Toexploretherabbits’lipidperoxidationandcytokinelevelchangecausedbyendotoxemia，useEPOforintervention.[Method]Bleedrabbitsfemoralforshock，afteringto，makeinjectionofendotoxin，takedysfunctionalmultio

2、rgansmodel;randomlydivide24healthyrabbitsintocontrolgroup(1)，2beatinggroup(2)，EPOgroup(3)，8ineach;takebloodfortestingindexesofTNFα，IL6，IL10andMDA.[Result]Group2uchhigherthanother2groupsonTNFα，IL6andIL10，group3lessthangroup2.[Conclusion]Thecytokinesandlipidperoxidationparticipatinginthecours

3、eofmultiorganinjurycausedbybloodlossshockandendotoxemiacanbereducedbyEPO.　　Keyia;EPO;dysfunctionalmultiorgans;cytokines　　严重的内毒素血症引起休克、DIC，甚至多器官功能衰竭(MODS)。促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)是一种刺激骨髓造血的糖蛋白类激素，主要由肾脏皮质、髓质交界处的肾小管旁细胞分泌，分子量为30.4kd。由于其具有促进造血的作用，在贫血治疗领域得到了广泛应用。鉴于EPO在细胞保护作用研究上的较大进展以及其抗炎作用的发现

4、，本文设计此实验以观察EPO对失血性休克合并内毒素血症所致炎症因子水平及脂质过氧化产物表达的影响。　　1材料与方法　　1.1实验动物新西兰大白兔24只，雌雄不限，每只体重1.9～2.5kg，由浙江省医学科学院动物实验中心提供。24只新西兰大白兔随机分成3组：对照组8只，二次打击组8只，EPO治疗组8只。　　1.2实验试剂重组人促红细胞生成素(rhEPO)(山东科兴生物制品有限公司)。内毒素试剂(LPS，E.coli，O111B4)(美国SIGMA公司)。丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。兔肿瘤坏死因子酶联免疫分析(TNFαELISA)试剂盒(美国USLI

5、FE公司，产品编号：E0133Rb)。兔白细胞介素6酶联免疫分析(IL6ELISA)试剂盒(美国USLIFE公司，产品编号：E0079Rb)。兔白细胞介素10酶联免疫分析(IL10ELISA)试剂盒(美国USLIFE公司，产品编号：E0056Rb)。　　1.3实验仪器Spacelab多功能监护仪(美国Spacelab公司)。Axsym全自动发光免疫分析仪(美国Abbott公司)。BIORAD酶标仪(日本BIORAD公司)。722光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂)。LD42A离心机(北京医用离心机厂)。-70℃超低温冰箱(美国FORMA公司)。HHM1型微量

6、振荡器(江苏康泰医疗器械厂)。XK95B旋涡混合器(江苏康泰医疗器械厂)。　　1.4动物模型制备二次打击(失血性休克合并内毒素血症)兔模型制作：参考卢瑗瑗等[1]的方法：兔耳缘静脉置留置针，氯氨酮(1.5mg/kg)肌注麻醉，麻醉后固定于手术台;(右股动脉区)股动脉置留置针，接换能器，连接监护仪，监测血压;测压正常后通过股动脉留置针连接三通快速抽出血液(肝素化室温无菌保存)，使兔MAP降至40mmHg，维持60min，随后回输全部血液及生理盐水使血压恢复至放血前水平，回输时间>30min;复苏后予腹腔注射100ug/kg剂量LPS(E.ColiO111B4)，20ml0

7、.9%NS稀释;通过股静脉留置针于造模前，二次打击后1h，二次打击后6h，二次打击后24h(处死前)取血标本;实验结束时取兔心肌组织标本，浸泡于10%的中性甲醛液。　　1.4.1对照组分离股动静脉，置管后不予放血，90min后腹腔注射20ml0.9%NS，于置管时及注射NS后1h、6h、24h(处死前)取血标本，离心后取上清，作CKMB，cTnI，MDA，IL6，IL10，TNFα水平检测;处死兔，取出心脏标本作病理检测。　　1.4.2二次打击组按步骤制备二次打击兔模型，于造模前，二次