cmet和cox2在肝细胞癌中表达的意义及其

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1、cMET和COX2在肝细胞癌中表达的意义及其【摘要】目的探讨cMET和COX2在肝细胞癌组织中表达的意义及其相关性。方法将2006年1月至2006年12月手术后经病理证实为肝细胞癌患者28例分为肝硬化组和非肝硬化组，再根据癌肿的大小分为大于5cm组和小于5cm组。采用免疫组织化学法对28例肝细胞癌患者肝组织进行染色，利用美国SimplePCI6专业图像分析系统截取显微镜下的10～15个视野，测算cMET和COX2的平均光密度值。结果肝硬化组的cMET和COX2平均光密度值均比非肝硬化组高；大于5cm组的cMET和COX2平均光密度值均比小于5cm组高；cMET和COX2呈正相关。结论HGFc

2、METCOX2VEGF通路可能是促进肝细胞癌血管生成的一个潜在通路，为肝细胞癌抗血管生成治疗策略提供新的靶点。【关键词】环氧水合酶类cMET肝肿瘤RelationshipbetaanditssignificanceAbstract:ObjectiveTostudytherelationshipbetaasaJanuarytoDecemberin2006,Meanopticaldensityofhepatocelluarcarcinomatissueslidesstainedbyimmunohistochmemicalmethod(namedSimplePCI6,madeinUSA).Resu

3、ltsMeanopticaldensityofcMETandCOX2inhepatocellularcarcinaomaamorethan5cmhigherthantheonesoflessthan5cm.;cMETandCOX2ayhighlycorrelatedinhepatocellularcarcinoma,especiallyinangiogenesisofhepatocellularcarcinoma.ItisconcludedthatCOX2maybedofactorofcMET.HGFcMETCOX2VEGFmaybeapotentialpatha.KeyacMET是由原癌基

4、因cMET编码的一个蛋白，是肝细胞生长因子唯一受体蛋白。环氧合酶－2（cyclooxygenase2，COX2）是前列腺素合成限速酶，是炎症过程中的一个重要的诱导酶，已经有许多研究表明，COX2在肿瘤的血管生成中起重要作用，与肿瘤的复发和转移有关，在正常的肝组织中不表达COX2。研究表明，cMET和COX2分别与VEGF有密切关系［12］，cMET和COX2可能通过促进肿瘤的血管生成，影响肿瘤的复发和转移。近年来，以抑制肿瘤血管生成的策略来治疗肿瘤的研究成为一个崭新的热点，但是目前国内外文献均无肝细胞癌中cMET和COX2相互作用关系的研究，因此本研究拟探讨肝细胞癌中cMET和COX2表达的

5、意义及其相关性。1材料与方法1.1材料2006年1月至2006年12月经肝胆外科研究所手术切除病理证实为肝细胞癌患者的肿瘤组织标本28例，所选取的标本均为乙肝病毒携带、肿瘤大于2cm且无肝外转移者，年龄28～75岁，平均47.8岁，男性26例，女性2例。其中肝硬化13例，无肝硬化15例。肿瘤大于5cm11例，小于5cm17例。所用COX2和cMET兔抗人多克隆抗体，PV9000二步法免疫组化检测试剂和浓缩型DAB试剂盒均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品。SimplePCI6专业图像分析系统来自Cimpix公司。1.2方法1.2.1取材手术切除肝细胞癌病灶，于切除的肿瘤组织内取标本一小块，经

6、40g/L的多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm厚度连续切片，分别做常规HE染色和免疫组化染色。1.2.2CMET和COX2检测采用PV9000二步法免疫组化检测系统进行检测。简述如下：脱蜡、水化组织切片，3％H2O2去离子水孵育10min，以阻断内源性过氧化酶，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，滴加一抗，4℃过夜后PBS冲洗，滴加试剂1（Plymerhelper）37℃孵育20min，PBS冲洗后滴加试剂2（Polyperoxidaseantimouse/rabbitIgG），以DAB溶液显色，自来水冲洗、复染、脱水、透明、密封。用PBS代替一抗作为染色的阴性对照，用已知的COX2和CMET染色阳

7、性的乳腺癌组织切片标本作为二者的阳性对照。1.2.3结果判断于400倍显微镜下全面观察每张切片，染色阳性细胞为单纯细胞浆着色而核无着色，胞浆内有棕黄色至深棕黄色(或棕红色)颗粒者。每张切片采集10～15个视野（即10～15张测试图像），用SimplePCI6专业图像分析系统（CimpixINC.USA）测算其平均光密度值。1.2.4统计学处理应用SPSS11.5软件进行t检验和线性回归分析对所得结果进行分析，