敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响

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1、敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响戴斐，田英，沈莉，冯易【摘要】目的研究母鼠器官形成期经口暴露较低浓度的有机磷农药-敌百虫，对母鼠生殖功能、内分泌功能及胚胎发育的影响。方法孕鼠随机分为对照组和3个实验组，在胎儿器官形成期即妊娠第6～15d经口灌胃染毒敌百虫，剂量分别为0，125，25和50mg/kg。在妊娠第17d经眼球取血后处死孕鼠，研究在本实验剂量下，敌百虫对孕鼠生殖功能、内分泌功能以及胚胎发育的影响。结果（1）母鼠器官形成期经口暴露敌百虫，可导致各实验组胎鼠外观畸形发生率显著增高（P001）。（2

2、）各剂量敌百虫暴露对孕鼠的生育力及妊娠结局无明显影响，表现在孕鼠的体重、卵巢脏器系数、胎盘脏器系数、黄体数、着床率、活胎数、死胎数、吸收胎数等与对照组比较差异无统计学意义（P>005）；（3）除50mg/kg剂量敌百虫的暴露可引起母鼠血清雌二醇浓度下降外，其他各剂量组母鼠血清和卵巢的雌二醇浓度均未见明显影响。结论在本实验剂量下，器官形成期雌鼠经口暴露敌百虫对子代胚胎的生长发育有影响，表现为胎鼠的畸形发生率增加，但对母鼠的生殖功能、内分泌功能未见明显影响。【关键词】敌百虫　　敌百虫是我国常用的有机磷农

3、药之一。已有研究表明，在胚胎器官形成期，母鼠敌百虫的暴露可影响母鼠的生殖功能，导致子代生长发育迟缓和畸形的发生〔1,2〕，但上述研究中敌百虫染毒剂量均较大（>200mg/kg）。本研究以目前广泛使用的有机磷农药之一敌百虫为受试物，以母鼠及子代胎鼠为研究对象，进行器官形成期母鼠经口暴露较低剂量的敌百虫对生殖、内分泌功能及胎鼠发育毒性影响的研究，探讨较低剂量有机磷农药暴露下的健康效应。　　1材料与方法　　11实验动物选用昆明种10～14周健康小鼠（中科院上海分院动物研究中心）。室温（23±2）℃，湿度（

4、50±10）%，并保证12h明暗循环的条件下，雌雄分笼饲养1周，然后按雄雌比1∶2比例合笼，次日清晨检查阴栓，并以阴栓阳性当日定为受孕第0d（Dg0）并记录当时体重。　　12分组及染毒将46只孕鼠随机分为4组：分别为空白对照组（12只）、低剂量组（11只）、中剂量组（11只）和高剂量组（12只）。在孕鼠妊娠第6d开始，每日上午10：00点按照01ml/10g，根据体重确定相应给药量，并灌胃给药1次，3个染毒组剂量按低中高组分别为125，25和50mg/kg;每3d称重一次，同时根据体重调整给药量；对照

5、组给予相应量的蒸馏水，连续染毒10d。各组小鼠均为普通饲料自由饮水。　　13观察指标与方法　　131母鼠观察（1）一般急性毒性观察：观察染毒后母鼠活动度、精神状况和饮水、食物消耗量情况。（2）体重及脏器系数：在孕鼠妊娠17d，称重后用颈椎脱臼法处死孕鼠，立即剖腹，分离卵巢、胎盘并称重，计算脏器系数（=脏器重量/体重）。（3）黄体数、着床率：将卵巢置于体视显微镜（NikonC-DSS230）下观察卵巢黄体数，同时从孕鼠子宫逐个取出胎鼠，鉴别活胎、死胎、吸收胎，并计算着床总数（为活胎、死胎、吸收胎的总和）

6、和着床率。（4）血清及卵巢匀浆雌二醇（E2）的测定：孕鼠被处死前，摘眼球取血，离心后取血清于-20℃冰箱保存；将卵巢置于少量生理盐水中-20℃条件下保存，测定时按1∶4的比例加入生理盐水，用1ml玻璃匀浆器制成卵巢组织匀浆。用ELISA（竞争法）测定小鼠血清和卵巢匀浆雌二醇浓度；试剂盒(美国Market公司)，灵敏度5pg/ml。　　132胎鼠观察〔3〕（1）胎鼠平均体重:计算每窝胎鼠的全部活胎的平均体重。（2）外表畸形观察：按常规方法。　　14统计分析应用SPSS115统计软件进行t检验和χ2检验

7、。　　2结果　　21一般情况在实验过程中，未发现小鼠出现有机磷农药急性中毒症状，所有小鼠全部生存至实验结束。从母鼠妊娠第6d开始染毒至妊娠第17d被处死，各实验组母鼠体重的变化与对照组比较，差异无统计学意义（P>005）。　　22经口暴露敌百虫对孕鼠生殖功能方面指标的影响(表1)　　221对孕鼠脏器系数、着床率的影响与对照组比较，各实验组的卵巢脏器系数、胎盘脏器系数、平均黄体数和着床率差异无统计学意义（P>005），各实验组的活胎、死胎和吸收胎的个数与对照组比较差异也无统计学意义（P

8、>005）。　　222对孕鼠血清雌二醇浓度和卵巢雌二醇浓度的影响除50mg/kg剂量组血清雌二醇浓度较对照组明显降低（P005）,其他剂量组与对照组比较则差异无统计学意义（P>005）；各实验组小鼠卵巢雌二醇浓度较对照组差异无统计学意义（P>005）。　　23经口暴露敌百虫对胎鼠生长发育及外观畸形发生的影响(表2)对照外观组畸形发生率为625%，实验组（染毒剂量由低到高）的畸形发