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1、不同剂量铬对围产前期奶牛抗氧化功能的作用 奶牛在围产期可能经历氧化应激,引起围产期奶牛机能紊乱,导致相关的疾病发生,如乳房炎、子宫内膜炎、胎衣不下、真胃移位及酮病等。如何提高围产期的抗氧化能力和缓解奶牛围产期的免疫抑制是奶牛生产上亟待解决的问题,也是当前研究的热点和难点。 铬作为动物必需微量元素之一,其生物学作用也日益受到重视。研究表明,铬能够降低畜禽应激反应。但由于对铬的研究起步较晚,相对于其他元素,人们对铬的了解还很少,在动物饲粮配制时,基本上未对铬的含量予以考虑,而且各国对铬的需要量还未有统一标准。
2、研究结果也并非一致。 对奶牛围产期前后,奶牛需要铬的量多少及酵母铬作为营养添加剂的研究少有报道。尤其是地域差异、牧草差异和不同奶牛场的饲养管理方法不同。 为此,本试验以酵母铬为原料,系统研究不同剂量铬对围产前期奶牛抗氧化功能的影响,旨在为奶牛业科学应用铬制剂提供参考。 1材料与方法 1.1实验动物 选取20头处于干奶期(产前4周),体况评分相近(3.25~3.75),胎次相近(3~4胎),预产期相近的中国荷斯坦奶牛。 1.2试验设计 试验采用完全随机区组设计,随机分为4组,每组5头奶牛。对照(铬
3、含量1.70g/kg干物质(DM))组:饲喂基础日粮;2.4g/d组(铬含量1.90mg/kgDM):饲喂基础日粮+酵母铬2.4g/d;4.8g/d组(铬含量2.10mg/kgDM):饲喂基础日粮+酵母硒4.8g/d;7.2g/d组(铬含量2.50mg/kgDM):饲喂基础日粮+酵母铬7.2g/d,所用的酵母铬(商品名:博善酵母培养物有机铬,英文名称: HCR1000)铬≥1000ppm(由广州市博善生物饲料有限公司提供)。实验牛集中饲养于同一栋棚舍式拴系牛舍中,试验期为3周,预饲期1周,从预产前4周
4、(产前28d)开始,持续到分娩当天。 1.3饲养管理 实验牛按牛场常规饲养管理程序进行。试验组和对照组饲喂配制相同的全混合日粮(TMR),奶牛每天采食12.3kg(干物质重),日粮组成及营养水平见表1,牛只全天自由采食。试验各组根据施加的处理不同,饲喂不同水平的酵母铬。 每日酵母铬平均分3份,分3次饲喂,每天分早(6:00)、中(13:00)、晚(20:00)3次给料。酵母铬与适量TMR日粮混合进行饲喂,以保证准确采食。 1.4样品的收集与处理 分别在产前14、7d和分娩当天,尾静脉采集血液10mL
5、,3000r/min离心15min,分离制得血清,-20℃冷冻保存。测定血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力和丙二醛(MDA)的含量和激素皮质醇和胰岛素的含量。 1.5检测指标及方法 饲料中DM、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、钙(Ca)、磷(P)的含量,采用实验室常规方法测定,具体操作方法见《饲料分析与质量检测技术》。 检测GSH-Px活力采用比色法;SOD活力采用羟胺法;T-AOC采用比色法;MDA含量采
6、用TBA法(详细测定方法参见南京建成生物工程研究所试剂盒说明书)。 皮质醇和胰岛素的含量,采用电化学发光法测定(送检大庆油田总医院),并通过血糖浓度计算胰岛素活性(胰岛素活性=血糖浓度/胰岛素浓度)。 1.6数据处理 试验数据采用SAS9.0统计软件中的ANOVA程序进行方差分析,采用Duncan氏方法对各组间平均数进行多重比较,数据以x-±s的形式表示。【表1】 2结果 2.1奶牛血清抗氧化酶活力和丙二醛含量的变化 酵母铬对奶牛血清抗氧化能力和丙二醛含量的影响见表2。日粮中添加
7、酵母铬提高了牛SOD、T-AOC和GSH-Px活力;降低了过氧化产物MDA的含量。 在不同的时间点,添加酵母铬使牛血清中SOD活力有不同程度增强,随着酵母铬添加量的提高,SOD表现先升高后降低的趋势。产前14d时,各组间差异不显着(P>0.05);产前7d时,各组血清中SOD活力升高,且随着添加量增加表现为先升高后降低,试验2组与对照组比较差异显着(P<0.05);分娩当天,各组血清中SOD活力继续升高,试验2组与对照组比较差异显着(P<0.05)。 随着分娩的临近,各组T-AOC活力不
8、断提高,产前14、7d各添加组随着添加剂量的增加而增加,分娩当天,T-AOC活力随着添加量的增加先升高后降低;产前14d时,试验3组与对照组比较差异显着(P<0.05);产前7d时,试验3组与对照组比较差异显着(P<0.05);分娩当天,各组T-AOC继续提高,试验2组与对照组比较差异极显着(P<0.01)。 添加酵母铬在不同的时间点GSH-Px活力变化各异,7d和分娩当天随着酵
