5种中草药水提取液对灵芝三萜含量的影响

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1、5种中草药水提取液对灵芝三萜含量的影响余志坚，陈传红，高凌飞，包水明，李荣同【关键词】中草药提取液；,,灵芝；,,三萜　　摘要：目的研究5种中草药水提取液对灵芝液体培养的菌丝体生物量和三萜含量的影响。方法在基本培养基中分别添加了终浓度为5%的中草药水提取液，液体培养4d后，测定各灵芝菌丝的生物量和三萜含量。结果与结论中草药水提取液对菌丝体生物量均有促进作用，其中银杏促进作用最明显，增幅达27.7%，而生地最弱，增幅为4.6%；而生地水提取液对灵芝菌丝体的三萜含量有抑制作用，其余4种有促进作用，其中银杏增幅最高为17.1%

2、。　　关键词：中草药提取液；灵芝；三萜　　InfluenceofedicinesontheContentofTriterpenoidsofGanodermalucidum　　Abstract：ObjectiveToobservetheinfluenceofedicinesonthecontentsofthebiomassandthetriterpenoidsofmyceliumofGanodermalucidumbysubmergedculture.MethodsAdded5%entvariousbiomassandtr

3、iterpenoidsofmyceliumofGanodermaluciduminedaftersubmergedculture4d.ResultsandConclusiongSO42g、KH2PO42g、加H2O至1000ml，用250ml三角瓶装瓶，每瓶装量为75ml，用高压灭菌锅121℃灭菌30min，冷却接种后，置25℃恒温摇床，转速为150r/min条件下培养4d即可。（2）液体发酵基础培养基配方：黄豆12.5g，葡萄糖20g，中草药5g，用水定容至1000ml，pH自然。　　1.1.3中药材金银花（Lonic

4、erajaponicaThunb.），于5~6月采集正在开花的金银花藤蔓，晒干切段；银杏（GinkgobilobaL.），于8月采自东华理工学院银杏林；鱼腥草（HouttuyniacordataThunb.），于5～6月采自抚州市市郊；绞股蓝(GynostemmapentaphyllumThunb.)和生地（RehmanniaglutinosaLibosch）购自抚州市黄庆仁栈药店。　　1.1.4中草药水提液的制备称取中草药取20g，加6倍水浸1h后，用砂锅煎煮15min，过滤，取滤液。再在药渣中补加适量的水，煎煮10m

5、in，过滤，取滤液。合并滤液，定容至1000ml，备用。　　1.1.5菌丝体获得按液体菌种2ml量液体接种后，置25℃恒温摇床，转速为150r/min条件下培养4d，每个样品设2个重复。　　1.1.6菌丝体干重的测定收取的发酵醪液以3500r/min离心收集菌丝球，于60℃烘干至恒重，称重，备用。　　1.2仪器与药品753BI微机紫外可见分光光度计；索氏提取器；香草醛、冰醋酸、高氯酸；DHT电热套；熊果酸购于中国药品生物制品鉴定所。　　2方法与结果　　2.1样品三萜含量的测定　　2.1.1标准品液配制精密称取干燥至恒重的

6、熊果酸对照品10mg，置于100ml容量瓶中，加95%乙醇溶解并定容至刻度，浓度为0.1mg/ml。　　2.1.2显色剂使用条件的选择显色剂使用条件的选择实验方法参考皮文霞等〔7~10〕，实验得出，5%香草醛冰醋酸最佳用量为0.2ml，高氯酸用量为0.8ml时最佳。　　2.1.3标准曲线的绘制精密吸取熊果酸对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2ml，按上述优选条件及步骤在548nm处测定吸收值，以吸收度为纵坐标，熊果酸的微克数做横坐标作标准曲线：y=0.1056x-0.0059(R2=0.9936)。　

7、　2.1.4样品三萜含量的测定精密称取上述收集到的灵芝菌丝体干燥粗粉各10g，用醋酸乙酯在索氏提取器中回流4h，提取液浓缩至干后，置于100ml容量瓶中，加95%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，测定吸收值，按回归方程计算含量。　　2.25种中草药水提液对灵芝生物量和三萜含量的影响见表1。　　表15种中药水提液对灵芝生物量和三萜含量的影响（略）　　3讨论　　三萜类化合物为灵芝主要药用成分之一，国内外已经有很多报道〔10~13〕，但利用中草药水提取液整合灵芝有效成分还未见报道。本文利用在液体发酵基础中添加5种中草药水提取液，研究

8、了上述5种中草药水提取液对灵芝菌丝体生长量和三萜类化合物含量的影响。低浓度的中草药提取液对菌丝体生物量有促进作用，银杏的促进作用最明显，增幅达27.7％，其次依次为绞股蓝、鱼腥草以及金银花，而生地最弱，增幅为4.6％。并且生地水提取液对菌丝体三萜含量有抑制作用，其余4种中草药水提取液均有促进作用，其中银杏水提取液增幅