三聚氰胺对孕鼠胎盘和仔鼠毒性作用的探讨

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1、山西医科大学硕士学位论文三聚氰胺对孕鼠胎盘和仔鼠毒性作用的探讨姓名：刘萍申请学位级别：硕士专业：妇产医学指导教师：成要平20100315州医科入学硕十学位论文三聚氰胺对孕鼠胎盘和仔鼠毒性作用的探讨摘要目的：三聚氰胺被认为是一种低毒的化工原料，动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。以往的研究主要集中在三聚氰胺对动物泌尿系统的损害方面，对生殖毒性研究方面目前国内外尚无系统报道。本实验通过建立孕鼠持续暴露于不同剂量的三聚氰胺染毒模型，研究：1．三聚氰胺暴露对孕鼠胎盘组织结构及仔鼠的影响。2．三聚氰胺暴露对孕鼠胎盘细胞凋亡调控基因

2、BaX、Bcl．2蛋白表达的影响。初步探讨三聚氰胺暴露对孕鼠及仔鼠的毒性作用及其发生机制。方法：3月龄雌性Wistar大鼠48只，经适应性饲养并受孕后随机分为4组，每组12只。从妊娠第6天起每日上午8．9时灌胃染毒，按体重给药低、中、高剂量组分别为400m∥(b·d)、800m∥(蚝·d)、1200m∥(kg·d)，灌胃容量为1mL／0．3kg体重，连续染毒14天。正常对照组给予不含三聚氰胺的植物油。在妊娠第O、6、1l、16、20天称体重，并按体重调整给药量。妊娠第20天戊巴比妥钠麻醉后剖腹取胎。1．取出子宫称取窝重，切开子宫检查有无吸收胎、死胎并计数着床数、活胎数、

3、吸收胎数及死胎数。取出胎鼠，称取活胎重及胎盘重，量取活胎鼠身长、尾长。2．每只孕鼠随机选取2只胎鼠，取出完整胎肾置于10％甲醛中充分固定，石蜡包埋，光镜观察胎鼠肾脏组织结构的改变。3．剥离孕鼠胎盘，经甲醛固定、石蜡包埋切片，一部分经HE染色，观察其组织形念变化；其余切片采用免疫组织化学染色法检查胎盘组织细胞凋亡调控基因Ba)【、Bcl．2的蛋白表达情况。4．全部资料均采用SPSSl3．0统计软件进行分析。组间比较采用多组单因素方差分析，实验数据以x±s表示。各种率的统计应用卡方检验。结果：1．对照组、低剂量组和中剂量组三组间仔鼠体重、身长及尾长比较，差异无统计学意义；高

4、剂量组仔鼠体重、身长及尾长明显低于其他三组，与其他三组比较差异有统计学意义(P

5、明羊膜覆盖，表面光滑；低剂量组和中剂量组胎盘无明显改变；高剂量组的胎盘外观呈紫红色、无光泽，山两医科人学硕}：学位论文部分胎盘肿胀淤血，胎儿面羊膜混浊，光泽暗淡。5．2光镜观察结果：对照组基带、海绵带、迷路带结构清晰，滋养层细胞无明显增生，绒毛无肿胀；低剂量组胎盘结构未见明显改变；中剂量组海绵带滋养层细胞呈轻微退行性变，空泡化细胞增多，绒毛周围纤维蛋白沉淀不明显；高剂量组基带肿胀增厚，部分胎盘基带见灶状坏死以及少许淋巴细胞、单核细胞浸润，海绵带滋养层巨细胞增大，数目增多，空泡化细胞岛增多，迷路带血窦扩张淤血严重，海绵带及迷路带部分滋养层细胞呈退行性改变，绒毛肿胀增粗，绒

6、毛间隙变窄，绒毛周围纤维蛋白沉积增多。6．胎盘组织Ba)(和Bcl．2的表达情况6．1Bax基因和Bcl．2基因均主要表达于胎盘合体滋养层细胞，Bax在绒毛间质细胞及血管内皮细胞等处也可见表达，但Bcl一2在绒毛间质细胞及血管内皮细胞表达很少。BaX主要定位于胞浆和胞膜；Bcl．2主要定位子胞浆中，少数胞核也呈阳性。6．2胎盘组织中BaX的蛋白表达量四组间比较差异有统计学意义(F=17．42，P<0．01)，染毒组胎盘组织中BaX的蛋白表达量比正常对照组明显增多，并且随着染毒剂量的增加BaX的表达量逐渐增多；胎盘组织中Bcl．2的蛋白表达量四组间比较差异有统计学意义(F

7、=23．62，P