不同培养条件对马铃薯试管薯形成的影响

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1、万方数据中国马铃薯，第20卷，第4期，2006中图分类号：$532文献标识码：A文章编号：1672—3635(2006)04—0228—03不同培养条件对马铃薯试管薯形成的影响吴秋云，汤浩，蔡南通，邱永祥，李光星，罗文彬(福建省农业科学院作物研究所，福建福州350013)摘要：对影响马铃薯试管薯形成的培养基类型、培养容器及外植体接种密度进行了研究，结果表明：液体培养基比固体培养基更有利于试管薯的诱导产生，产生的试管薯各项指标均优于固体培养基；250mL广口瓶培养产生的试管薯鲜薯重与100mL和150mL三角瓶培养容器之间的差异均达到了极显著水平；

2、每瓶接种10～15个外植体既能获得数量较多的试管薯，且试管薯的质量也较高。关键词：马铃薯；试管薯；培养基；接种密度马铃薯试管薯是利用组织培养的方法，将脱毒试管苗置于容器中通过一定的培养方式形成直径2～10mm的小薯。试管薯具有种性高、繁殖快、体积小、便于贮藏和运输以及可以周年生产等优点。试管薯与试管苗一样是马铃薯脱毒原原种薯生产的基础㈣】。试管薯是在一定的培养条件下形成的，不同的培养条件对试管薯的形成影响很大，不少学者对影响试管薯形成的诸多方面做过研究报道，但从影响试管薯形成的培养基类型、培养容器种类、外植体接种密度等方面的研究却未曾见报道，笔者

3、试图从以上几方面着手，对影响马铃薯试管薯的形成基本条件进行研究，以便为下一步的研究提供合理依据。l材料与方法1．1试验材料本单位保存的“大西洋”马铃薯脱毒试管苗。1．2试验方法1．2．1培养方法将生长健壮的大西洋马铃薯脱毒试管苗剪成带一叶的单茎切段，分别接种到150mL盛有液体培养基和固体培养基的三角瓶中，每瓶接种10个切收稿日期：2005—09—12基金项目：福建省自然科学基金(Z0516054)和福建省科技攻关项目(2005N024)资助。作者简介：吴秋云(1964一)，女，硕士，助理研究员，主要从事薯类作物育种及生物技术研究。段，每处理接种

4、30瓶。(1)液体培养体系：将带一叶单茎的试管苗置于光周期16h·d一、光强2000Ix、温度(24±1)℃的液体MS培养基中浅层静置培养21d之后，加入MS+5mg·L-1BA+500mg-L。1CCC+8％蔗糖+0．1％活性碳的液体诱导结薯培养基，于温度为(20±1)℃的全黑暗条件下诱导结薯。(2)固体培养体系：将带一叶单茎的试管苗接种于MS+5mg·L。1BA+500mg·L。1CCC+8％蔗糖+0．8％琼脂+0．1％活性炭的固体培养基中，于光强2000lx、温度(24±1)℃条件下培养48h之后，置于温度为(20±1)℃的全黑暗条件下诱导

5、结薯。1．2．2培养容器试验设100mL三角瓶、150mL三角瓶、250mL广口瓶3种培养容器。试验操作与1．2．1中(1)的步骤相同。1．2．3外植体接种密度将带一叶单茎的切段按每瓶5，10，15，20个分别接种在250mL的广口瓶中，试验操作与1．2．1中(1)的步骤相同。1．2．4培养时间与统计分析根据外植体在培养基中的生长情况，液体培养基中培养60d后外植体基本枯萎，固体培养基中培养35d后外植体基本枯萎，因而作者把液体培养体系中试管薯培养定为60d，固体培养体系中试管薯培养定为35d。统计试管薯单瓶结薯个万方数据不同培养条件对马铃薯试管

6、薯形成的影响——吴秋云，汤浩，蔡南通，等·229·数(薯块直径大于2mm确认为结薯【3】)、单瓶鲜重、大薯个数(直径大于5nlnl)，计算大薯率(大薯占结薯总数百分数)和成薯指数(每茎切段结薯数量)。2结果与分析2．1不同培养体系对试管薯形成的影响从表1结果看，在试管薯诱导所需的时间上，固体培养不需经过光照培养繁苗阶段而直接诱导结薯，所需时间只要35d，而液体培养需要经过繁苗和诱导结薯两个阶段共81d，固体培养诱导结薯比液体培养诱导结薯时间大大缩短。但是液体培养在结薯个数、鲜薯重、成薯指数方面都明显高于固体培养，液体培养诱导的试管薯平均直径达到6

7、．2mm，超过了大薯(5mm)的标准，同时液体培养诱导的试管薯大薯个数为平均每瓶9．3个，远高于固体培养的每瓶5．1个。从几组数据均可看出，液体培养诱导产生的试管薯总体质量明显优于固体培养诱导产生的试管薯，这可能是液体培养基比固体培养基更有利于营养物质的扩散，便于试管薯生长时对营养物质的吸收，最终使得液体培养产生的试管薯质量较好。表1不同培养体系诱导产生试管薯的差异2．2不同培养容器对试管薯形成的影响随着培养容器体积的增大，试管薯结薯个数、鲜薯重、平均直径以及大薯率等方面都有相应增加的趋势(表2)。在结薯个数及鲜薯重方面，250mL广口瓶的与10

8、0mL三角瓶之间的差异都达到了极限著，并且在鲜薯重上250mL广口瓶的与150mL三角瓶之间的差异也达到了极限著，这说明在外植体接种数量