王老吉凉茶急性经口毒性和30d经口毒性研究

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1、王老吉凉茶急性经口毒性和30d经口毒性研究谭剑斌杨杏芬黄俊明陈壁锋赵敏张静李欣奎文立王凤岩黄建康广东省疾病预防控制中心目的观察王老吉凉茶的急性经口毒性和30d经口毒性，为评价其食用安全性提供科学依据。方法急性经口毒性试验:选用1822gNIH种小鼠，1次灌胃给予15.0g/(kg-BW)［折算药材剂量99.9g/(kg-BW)］王老吉凉茶浸膏，每日观察小鼠的死亡情况，共观察14d。30d经门毒性试验:雌雄SD大鼠每口灌胃给予1.88、3.75、7.50g/(kg•BW)［相当于药材剂量12.5、25.0、50.0g/(kg-BW)］剂量王老吉凉茶浸靑，对照

2、组灌冑同等容量纯净水，共30d。实验结束时检测常规生化和血常规指标，称量脏器重量，对照组和7.50g/(kg•BW)组进行组织病理学检查。结果急性经UI毒性试验在观察期内动物无不良反应和死亡，雌雄小鼠急性经口毒性LD5()〉15.0g/(kg-BW);30d经门毒性试验屮各剂量组受试物对雌雄SD大鼠的体重、增重、摄食量、食物利用率、血常规、血生化、脏器重和脏体比均无明显影响，病理组织学检查也没有发现与王老吉凉茶浸膏相关的改变。结论王老吉凉荼浸膏属无毒级，在7.50g/(kg•BW)［相当于药材剂量50.0g/(kg-BW)］下未观察到大鼠明显毒性反应。关键

3、词：凉茶;急性毒性试验;食品安全;凉茶源于民间，配方的工艺各冇不同，经过多年的发展，凉茶产业完成了从传统手工生产到现代化生产加工转型升级，并在凉茶文化的推动下，一跃成为与水、碳酸饮料、牛奶、果汁饮料并列的独立饮料品种。随着凉茶销量的快速增加，消费者对其安全性日益关注111，本研宄为了解凉茶的食用安全性，挑选了凉茶的代表品种之一的王老吉凉茶开展急性经U毒性和30d经1_1毒性试验研究，为凉茶安全性评估提供科学数据。1材料和方法1.1受试物王老吉凉茶浸膏由广州王老吉药业股份有限公司提供，王老吉凉茶浸膏的推荐日服量为4.5g，1g浸膏相当于6.66g药材。本研究

4、剂量均以浸膏剂量表示。每日取浸膏以纯浄水稀释至实验浓度。1.2实验动物及环境N1H种小鼠由广东省医学实验动物中心提供，生产许可证号为SCXK（粤）2008—0002。SD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供，生产许可证号为2006—0015。动物实验室为广东省疾病预防控制中心屏障环境动物房，使用许可证号:SYXK（粤）2008—0011,温度201〜261，湿度40%〜70%。1.3主要试剂和仪器谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、胆固醇（CH0L）、甘油三酯（TG

5、）试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司），血球仪试剂（美国雅培），国产分析纯试剂。7600—010全自动生化仪（口本Hitachi）、CD3700全自动血球仪（美国Abbott）,HM360全自动病理制片系统（徳国Microm），TDL-WS-WA离心机（上海安亭）。1.4急性经口毒性试验m10只18〜22gNTH小鼠，雌雄各半，禁食不禁水16h后，以15.0g/（kg•BW）[相当于药材剂量99.9g/（kg-BW）]1次灌胃给予受试物，灌胃量0.02mL/（g-BW）,给样后连续观察14d并记录小鼠行为表现及死亡情况。1.530d喂养试验[3]80只6

6、0〜90gSD大鼠，每组20只，雌雄各半。每日以1.88、3.75、7.50g/（kg•BW）［相当于药材剂量12.5、25.0、50.0g/（kg-BW）］灌胃给予凉茶浸膏，灌胃量为0.01mL/（g-BW）,另设纯浄水对照组，连续30d。实验期间观察大鼠一般生理体征，每周称1次体重和2次摄食量，计算食物利用率。实验结束时动物禁食16h，分别采集抗凝（EDTA-W2K抗凝）和非抗凝血样。测定抗凝全血的血红蛋白（Hb）、红细胞数（RBC）、白细胞数（WBC）、血小板（PLT）计数及淋巴细胞数（LYN）、中性粒细胞数（NEU）、单核细胞数（MONO）、嗜酸性

7、粒细胞数（EOS）、嗜碱性粒细胞数（BASO）比例。非抗凝血样以2500r/min离心10min分离血清，检测血清屮ALT、AST、TP、ALB、GLU、BUN、CREA、CHOL、TG含量，并计算白球比值（A/G）。动物采血后进行大体解剖，称量心、肝、肾、脾、睾丸重量，计算脏体比，取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸、卵巢作组织病理学检查。1.6统计分析方法以SPSS软件包进行统计学处理。定量资料采用方差分析，若方差不齐改用秩和检验进行分析。定性资料的比较采用卡方检验，a=0.05。2结果2.1急性毒性试验结果观察期内15.0g/（kg-BW）组动物均未见明显异常

8、，亦无死亡，得雌雄小鼠急性经口毒性LD5（）〉15.0g/（kg-