银杏叶联合骨髓间充质干细胞降糖疗效观察

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1、银杏叶联合骨髓间充质干细胞降糖疗效观察吉林大学中日联谊医院130033【】目的：银杏叶联合骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemscells,BMSCs)对(I型)糖尿病大鼠模型降糖疗效观察。方法：建立I型糖尿病wistar大鼠模型并随机分为糖尿病(DM)组、银杏叶(GinkgobilobaL.extractEGB)组、EGB+BMSC组、BMSC组，同时设置对照(Contral)组，其中EGB+BMSC组经眼眶静脉输注骨髓间充质干细胞，并给予银杏叶提取物治疗，观察

2、各组大鼠血糖、胰岛素、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白介素6(IL-6)等指标变化。结果:EGB+BMSC组的血糖、IL-6水平显著低于EGB、BMSC组(P<0.05),而胰岛素、SOD及GSH-Px水平较之升高(P<0.05)；结论：EGB联合BMSC治疗可显著降低糖尿病大鼠血糖水平，增加胰岛素分泌，减轻细胞炎症反应，为糖尿病治疗提供新的方法。【关键词】骨髓间充质干细胞；银杏叶提取物；氧化应激【】R551.3【】A【】2096-0867(2015)

3、-09-021-02既往研宄［1］证明，糖尿病患者体内氧化应激水平较高，加重胰岛细胞的损伤；银杏叶提取物含抗氧化成分，可清除自由基，减弱氧化应激水平，减少内皮细胞的凋亡［2］。间充质干细胞是一种幼稚细胞，只有多向分化潜能，相关研宄［3-4］通过其可塑性，将其诱导分化为胰岛细胞来降低血糖。但糖尿病患者机体内高氧化应激状态下的微环境，会加速移植干细胞的死亡［5］,为此，利用银杏叶抗氧化应激作用，联合骨髓间充质干细胞降糖成为一条可能的治疗途径。木实验将对二者联合降糖的疗效与单药治疗进行对比。1.材料和

4、方法1.1材料及方法选取健康的wistar成年雌性大鼠60只，体重200〜246g，购自吉林大学基础医学院动物实验中心。BMSCs取自5天的wistar大鼠乳鼠股骨。STZ购于大连美罗药厂。银杏叶提取物购自台湾济生化学制药厂股份有限公司。大鼠SOD和GSH-Px试剂盒购于南京建成生物公司。分别给予腹腔内注射STZ配置液(STZ粉末溶于枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，配置成O.lmol/L,pH值为4.3),剂量为55mg/kg.d-l,当大鼠尾静脉血糖值连续2次>16.7mmol/L时成功建模I型

5、糖尿病。将其随机分为EGB组、DM组、BMSCs组以及EGB+BMSCs组。另选取10只人鼠只注射等剂量的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液作对照。EGB组每日给予0.8(1111^-1的EGB;EGB+BMSCs组先给予等量的EGB注射7天，7天后从眶下经脉输注110〜6个BMSCs/只；BMSCs组的大Kt则于第7天直接从眶下静脉输注110〜6个BMSC/只；DM组及对照组给予注射0.8mlkg-1/只的生理盐水。1.2标本采集及指标测定：于第20天处死大鼠，并取其静脉血留做标本，采用黄嘌呤氧化酶法测定

6、血清SOD含量，二硫代双硝基苯甲酸直接显色法测定血清GSH-Px含量，EUSA方法测定血清IL-6含量。1.6统计分析：符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示，正态分布且方差齐的资料，采用单因素方差分析，组间比较采用SNK-q检验，当P<0.05为差异有统计学意义。1.结果：2.1各组人鼠检测指标的测定比较EGB+BMSC组的血糖、IL-6水平明显低于DM组、EGB组、BMSC组(P<0.05)；而胰岛素分泌水平、血清SOD、GSH-Px活性明

7、显高于上述各组(P<0.05)；结果表明相比单独移植BMSC,联合EGB可以帮助BMSC减轻移植环境的氧化应激水平及炎症反应程度，进一步降低血糖水平、增加胰岛素分泌水平。见表1.表1.各组大鼠检测指标比较(x±s,n=5)2.讨论：美国内分泌医师协会在2004年曾提出体内的氧化应激［6］是糖尿病及其并发症的共同发病机制。正常机体内存在氧化系统与抗氧化系统的动态平衡,而糖尿病的高血糖状态可通过葡萄糖的自身氧化、线粒体途径等使细胞内产生过多的0、过氧硝基自由基、活性氧簇(ROS)

8、,打破了这种平衡。由于缺乏内源性抗氧化代偿机制，使机体氧化还原稳态失衡。血糖刺激器官产生自由基冇多条途径，包括线粒体氧化磷酸化途径、脂质过氧化物酶、NADPH氧化酶和一氧化氮合酶(NOS)等［7-8］。一方面，过多的自由基导致细胞蛋白质、DNA损伤，使细胞最终死亡［9］;ROS是细胞内一种信号分子，过多的ROS可介导多种信号转导途径、转录因子的激活［10］,并直接氧化DNA、脂质、蛋白质损伤细胞，体内氧化成分如脂质过氧化产物MDA增加，而抗氧化成分降低，如SOD、GSH-Px，降低，加重糖尿病机