非组培法的玉米遗传转化研究(全国玉米育种会议)

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1、非组培法的玉米遗传转化研究张红梅孙毅南芝润惠国强罗绮山西省农业科学院玉米研究所山西省农业科学院生物技术中心2013.8.25非组培法的玉米遗传转化研究综述材料与方法结果与分析综述遗传转化是植物育种、遗传、生理生化研究的重要工具。目前广泛应用的转基因方法有两种：农杆菌介导法和基因枪法。但是两者都需要组织培养过程，要花费大量的人力、物力、财力；并且受基因型限制。我们一直在探索使用非组织培养的方法进行遗传转化，经过10多年的努力，最终有3种方法获得了成功。超声波辅助花粉介导法（玉米）花粉介导的植物遗传转化花粉是理想的外源DNA载体。外源DNA能随花粉管的生长进入到胚珠中并整合到其

2、基因组中。操作步骤收集花粉放入溶液中↓将外源DNA与花粉混合↓超声波处理↓收集处理后的花粉并授粉↓收获授粉的果穗↓播种并做分子检测和生物学鉴定↓鉴定结果为转化株的植株自交、做进一步的研究Pollengrain超声波仪器超声波处理和超声波处理后花粉管萌发状况a(a)超声波处理玉米花粉的萌发b(b)超声波处理后玉米花粉的萌发玉米花丝超声波辅助花粉介导玉米遗传转化超声波辅助花粉介导玉米遗传转化Maizeseedssetonthetreatedears材料与方法质粒玉米自交系昌7-2P3301ubiAc结果与分析Southernanddotblothybridization33323130292827

3、22524232221201918171615M1413121110987654321THNPPM转基因玉米的PCR检测结果M:Mark2000bpP:质粒阳性对照N：野生型玉米H：H2O空白对照T：TE空白对照1-33：转化的玉米植株PlasmidDNA结果与分析当季获得转基因种子（6个月）转化率20%（T1代中转基因株数/总出苗株数）平均穗结实粒数3粒致谢国家转基因生物新品种培育重大专项（2011ZX08003-001,2011ZX08003-017B)山西省科技攻关项目(20100311002-4)山西省农业科学院博士基金项目(YBSJJ06)山西省农业科学院育种基础研究项

4、目(YYZJC0924)致谢Thanksforyourattention！