香榧体细胞胚发生、发育的形态与细胞学观察

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1、园艺学报，2015，42(8)：1477–1486.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0039；http：//www.ahs.ac.cn1477香榧体细胞胚发生、发育的形态与细胞学观察1222232,*项伟波，赵金凯，吴家胜，黄坚钦，喻卫武，吴连海，张启香12（浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地，浙江临安311300；浙江农林大学林业与生物技术学院，3浙江临安311300；浙江省丽水市林业科学研究院，浙江丽水323000）-1-1摘要：将香榧（Torreyagrandis‘Merr

2、illii’）的未成熟合子胚置于SH+0.1mg·LNAA+500mg·L-1AC+3%蔗糖+0.5g·LGln培养基上暗培养45d，诱导产生半透明颗粒状胚性愈伤组织；将胚性愈伤-1-1组织转入SH+20g·LPEG+10mg·LABA培养基中暗培养3个月诱导体细胞胚。采用碘—碘化钾染色和石蜡切片技术对体胚起源、形态发育与细胞组织学进行了观察。结果表明：胚性愈伤组织起源于合子胚胚轴表皮或皮层细胞的对称分裂。胚性愈伤组织含有两类细胞，一种是细胞质浓厚、细胞核大、体积小的圆形胚性细胞，另一种是高度液泡化拉长的细胞。胚性愈伤组织包含由这两种细胞构成的原胚团Ⅰ、原胚团Ⅱ和原胚团Ⅲ，以

3、及一些游离细胞。原胚团Ⅲ在无植物生长调节剂的SH基本培养基上形成原胚，原胚接入成熟培养基，历经球形、棒状、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。将子叶胚转入萌发培养基后胚根伸长，胚芽发育长出针叶，形成完整的再生植株。同时在离体培养中合子胚胚柄处退化的裂生多胚也能重新发育形成胚体。在初生体胚发育过程中表面常伴有次生体细胞胚的形成。关键词：香榧；体细胞胚；起源；发育；形态学；细胞学中图分类号：S664.5文献标志码：A文章编号：0513-353X（2015）08-1477-10MorphologicalandCytologicalObservationofSomaticEmbryogen

4、esisandDevelopmentinTorreyagrandis‘Merrillii’122223XIANGWei-bo，ZHAOJin-kai，WUJia-sheng，HUANGJian-qin，YUWei-wu，WULian-hai，2,*andZHANGQi-xiang1（TheNurturingStationfortheStateKeyLaboratoryofSubtropicalSilviculture，ZhejiangA&FUniversity，Lin’an，2Zhejiang311300，China；SchoolofForestryandBiotechnol

5、ogy，ZhejiangA&FUniversity，Lin’an，Zhejiang311300，3China；LishuiForestryScienceResearchInstitute，Lishui，Zhejiang323000，China）Abstract：AnimmaturezygoticembryoofTorreyagrandis‘Merrillii’wasdarkculturedfor45days-1-1-1onanSHmediumsupplementedwith0.1mg·LNAA，500mg·LAC，3%sucroseand0.5g·LGlntoinduceem

6、bryoniccallus，whichwaswatery，semi-transparentandslimy.Thenthecalluswastransferred-1-1toSHmediasupplementedwith20g·LPEGand10mg·LABAanddarkculturedforthreemonthsforsomaticembryogenesis.Themorphologicalandcytohistologicalobservationofsomaticembryogenesiswasperformedbyiodine-potassiumiodidestai

7、ningandParaffintechnology.Resultsshowedthattheembryoniccallusoriginatedfromthesymmetricaldivisionofepidermalorcorticalcellsofhypocotyl.The收稿日期：2015–03–17；修回日期：2015–06–11基金项目：国家星火计划重大项目（2012GA700001）；浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目（2012C12002）；浙江省农业新品种选育重大科技专项（2012C12