花生中两个硬脂酰_acp去饱和酶基因的克隆与序列分析

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1、花生学报２０１３，４２（３）：１～７ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｅａｎｕｔＳｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．４２，Ｎｏ．３，２０１３文章编号：１００２－４０９３（２０１３）０３－０００１－０７花生中两个硬脂酰－ＡＣＰ去饱和酶基因的克隆与序列分析焦坤，迟晓元，潘丽娟，陈娜，陈明娜，王通，王冕，杨珍，和亚男，禹山林＊（山东省花生研究所，山东青岛２６６１００）摘要：脂肪酸去饱和酶是不饱和脂肪酸合成途径的关键酶，催化脂肪酸链特定位置上脱氢形成双键。本研究通过构建花生种子全长ｃＤＮＡ文库，结合大规模ＥＳＴ测序和ＲＡＣＥ克隆等方法，从花生中克隆得到了两个ＦＡＢ２基因，分别命名为ＡｈＦＡＢ２

2、－２和ＡｈＦＡＢ２－３。其中ＡｈＦＡＢ２－２全长为１３８７ｂｐ，ＯＲＦ为１１５８ｂｐ，理论分子量为４３．７ｋＤ，理论等电点为５．６９；ＡｈＦＡＢ２－３全长为１４５２ｂｐ，ＯＲＦ为１１８８ｂｐ，理论分子量为４４．９ｋＤ，理论等电点为６．３７。它们推导的氨基酸序列与拟南芥的相似性依次为６０．８％和５７．２％；与大豆的相似性分别是６２．３％和５９．３％。这两个基因在ＧｅｎＢａｎｋ上的登录号分别为ＫＦ３５８４５９和ＫＦ３５８４６０。关键词：硬脂酰－ＡＣＰ去饱和酶基因；花生；基因克隆；序列分析中图分类号：Ｓ５６５．２Ｑ７８５文献标识码：ＡＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＳｅｑｕｅｎ

3、ｃｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＧｌｙｃｅｒｏｌ－３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅＡｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＧｅｎｅｓｉｎＰｅａｎｕｔＪＩＡＯＫｕｎ，ＣＨＩＸｉａｏ－ｙｕａｎ，ＰＡＮＬｉ－ｊｕａｎ，ＣＨＥＮＮａ，ＣＨＥＮＭｉｎｇ－ｎａ，ＷＡＮＧＴｏｎｇ，＊ＷＡＮＧＭｉａｎ，ＹＡＮＧＺｈｅｎ，ＨＥＹａ－ｎａｎ，ＹＵＳｈａｎ－ｌｉｎ（ＳｈａｎｄｏｎｇＰｅａｎｕｔＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６１００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｓａｔｕｒａｓｅｓａｒｅｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒｔｈｅｉｎｓｅｒｔｉｏｎｏｆｄｏｕｂｌｅｂｏｎｄｓｉ

4、ｎｔｏｐｒｅ－ｆｏｒｍｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｃｈａｉｎｓｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｓｔｈａｔｒｅｑｕｉｒｅｏｘｙｇｅｎａｎｄｒｅｄｕｃｉｎｇｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｓ．Ｔｈｒｏｕｇｈｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆａｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙｏｆｐｅａｎｕｔ（Ａｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａ）ｓｅｅｄ，ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｔａｇｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａｎｄｒａｐｉｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡｅｎｄｓ，ｔｗｏｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｓａｔｕｒａｓｅｇｅｎｅｓ，ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄＡｈＦＡＢ２－２ａｎｄＡｈ－ＦＡＢ２－３ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔ

5、ｅｄｆｒｏｍｐｅａｎｕｔ．ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆＡｈＦＡＢ２－２ａｎｄＡｈＦＡＢ２－３ｃＤＮＡｗｅｒｅ１３８７ｂｐａｎｄ１４５２ｂｐ，ａｎｄＯＲＦｗｅｒｅ１１５８ｂｐａｎｄ１１８８ｂｐ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆＡｈＦＡＢ２－２ａｎｄＡｈＦＡＢ２－３ｗｅｒｅｐｒｅｄｉｃｔｅｄｔｏｂｅ４３．７ｋＤａｎｄ４４．９ｋＤ，ａｎｄｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃｐｏｉｎｔｓ５．６９ａｎｄ６．３７，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｄｅｄｕｃｅｄａｍｉｎｏａｃｉｄｈａｄａｈｉｇｈｉｄｅｎｔｉｔｙｗｉｔｈｔｈｅＦＡＢ２ｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｐｏ

6、ｒｔｅｄｆｒｏｍｏｔｈｅｒｓｐｅｃｉｅｓ．ＡｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓｏｆＡｈＦＡＢ２－２ａｎｄＡｈＦＡＢ２－３ｂｅｔｗｅｅｎｐｅａｎｕｔａｎｄＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ收稿日期：２０１３－０７－０７基金项目：国家产业体系（ＣＡＲＳ－１４）；山东省自然基金（ＺＲ２０１１ＣＱ０３６；ＺＲ２０１２ＣＱ０３１）；国家自然基金（３１０００７２８；３１１００２０５；３１２００２１１）；山东省优秀中青年科学家科研奖励基金（ＢＳ２０１０ＮＹ０２３）；青岛市科技计划（１１－２－４－９－（３）－ｊｃｈ；１１－２－３－２６－ｎｓｈ；１２－１－４－１１－（２）－ｊｃｈ）。

7、作者简介：焦坤（１９７８－），男，山东齐河人，山东省花生研究所助理研究员，硕士，主要从事花生遗传育种研究。＊通讯作者：禹山林（１９５６－），男，研究员，主要从事花生遗传育种研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｓｈａｎｌｉｎ１９５６＠１６３．ｃｏｍ２花生学报４２卷ｔｈａｌｉａｎａｗｅｒｅ６０．８％ａｎｄ５７．２％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｎｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓｏｆＡｈＦＡＢ２－２ａｎｄＡｈ－ＦＡＢ２－３ｐｒｏｔｅｉｎｂｅｔｗｅｅｎｐｅａｎｕｔａｎｄＧｌｙｃｉｎｅｍａｘｗｅｒｅ６２．３％ａｎｄ５９．３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓｅ－ｑｕｅｎ

8、ｃｅｓｏｆｔｈｅｔｗｏｇｅｎｅｓｗｅｒ