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时间:2018-04-15
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1、黄引贤教授:动物医学教学与研究资料选编第六篇微生态制剂及消毒剂*新型微生态制剂——宫康素试验总结报告主持人黄引贤摘要宫康素是根据微生态学的基本理论,利用微生态工程的方法,以健康、高产母畜生殖道中有益无害的菌株研制出的一种新型微生态制剂。目前国内、外尚未见同类产品面市。历经6年时间的试验,已试制60批次,总量在150万毫升以上,经室内60次的安全试验,注射小白鼠600多只,以及现场10多万头次母猪、300多头奶牛的实际应用,结果均未出现不良反应;同时对预防母畜产后感染和治疗母畜生殖道炎症、流产、不孕症、产死胎、木乃尹胎、弱
2、仔等,都收到了明显的效果。因此,宫康素对预防、治疗母畜繁殖障碍疾病,提高生产性能,促进养殖业的持续发展,都起了良好作用。此外,还对宫康素的安全性能、作用机理、防治效果以及与其它抗菌药物和性腺激药物比较等问题进行了讨论。1前言母畜由于生殖道受到感染而引起的繁殖障碍疾病,重点包括子宫炎、阴道炎、不发情、不受孕、流产、死胎、木乃伊胎、产仔特少以及产下弱仔等等,这类疾病无论在国内还是国外都普遍存在,而其发生原因又极为复杂,因此造成的经济损失十分严重。过去,对生殖道感染的防治方法主要依靠抗菌药物,采用全身疗法,或感染部位冲洗后再输
3、入药物;这种传统疗法,虽然在历史上起到过良好作用,但是由于用药不规范,甚至滥用、乱用以及长期使用药物,除了直接引起严重的不良反应外,还会造成耐药菌株的产生。其次,近来来,亦有应用性激素来防治“不洁猪”、子宫炎和乳房炎等等,亦有一定效果,但激素类药物如果使用不合理,有可能会干扰机体正常的内分泌功能,而且其抑菌作用也不大。据此,我们根据微生态学的基本理论,利用微生态工程的方法,努力去探讨一种微生态制剂,并定名为“宫康素”,用来防治母畜的生殖道感染,提高其生产性能,以促进养殖业的健康持续发展。回顾宫康素的研究过程,在历次的全国
4、动物微生态学分会学术研讨会上,都得到了专家、教授们的热情鼓励和帮助,从而使得这一繁杂的试验工作,终于获得了初步的结果,现特提出总结报告,请予鉴定。2试验经过与结果2.1菌种来源及其特性研究2.1.1菌种分离与鉴定1995-1998年间,作者先后从广州、深圳两地区种猪场约30多头健康、高产母猪的子宫阴道分泌物及少数子宫粘膜处,分离获得了一大批正常而无毒力的各种类菌群,经初步鉴定和精心筛选,最后选定2株,即1号和4号,并已经中国科学院微生物研究所鉴定。2.1.2菌种的毒力测定将上述2株菌种,通过皮下、肌肉、腹腔、静脉和子宫内
5、等方法途径,接种于猪、兔及各种年龄的小白鼠(包括2天龄乳鼠和怀孕母鼠),结果所有试验动物均未见不良反应,孕鼠未发现流产,注射部位不产生炎症变化,将子宫粘膜经组织切片镜检亦未见异常,更没有引起动物死亡的情况,甚至在小白鼠体内连续传代6次,亦未发现任何毒性。其次,将这些菌种与猪或牛的精子混合,结果试验组精子比对照组精子的活力明显增强,寿命也延长。2.1.3菌种的抑菌试验为了测定这2株菌种对猪、牛生殖道有致病作用的常见菌株有否拮抗(抑制)作用,设计了体外抑*本试验成果宫康素于2001年5月经过中国畜牧兽医学会动物微生态学分会正
6、副理事长及3位常务理事等5位教授鉴定,一致认为该成果为国内首创,达国际先进水平。203黄引贤教授:动物医学教学与研究资料选编菌试验(主要为液体培养法)。具体方法是:将这2株菌种与等量各株致病菌,包括埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、沙门氏杆菌、克雷伯氏菌、嗜水气单胞菌、变形杆菌及绿脓杆菌等同时混合培养,或加大致病菌用量后混合培养,或将菌种先培养一定时间(24、48和72小时)后,再将两者等量同时培养,无论哪种方式,所有致病菌均在24小时后被完全抑制,而2株菌种依然生长得很好,这项试验均重复2-4次,结果一致。
7、2.1.4菌种的稳定性首先将菌种接种于半固体琼脂,4℃冰箱保存,1号菌经过788天、865天,4号菌经过418天和470天后,2株菌种仍然存活;而1号菌株则在普通肉汤中于4℃冰箱条件下,经过947天,甚至1023天,仍然生长很好,看来还能继续存活下去。其次,又将1号菌种初代次与连续传代的高代次(最低也在100代以上),进行比较,无论在菌体形态、培养特性、生化反应、PH变化以及抑菌作用等方面都未发现明显差异。此外,还将1号和4号两株菌种混合培养后,连续传代100代以上,结果仍然与原来的2株出发菌株的特性基本一致。2.2宫康
8、素的制造2.2.1培养基的配制我们将鲜牛肉汤、牛肉、旦白胨、各种糖类、酶制剂……等多种主要成份,配成不同的培养基,以比较其生长速度、菌数浓度等,结果,从中找到了一种细菌生长快、菌数多的培养基配方(G1号配方),该配方原料来源广,非常适合于大量生产用途。2.2.2菌种复壮将保存的菌种至少复壮1代以上,待纯菌检查合格后,
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