柱花草花药离体培养研究

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1、2014年4月热带农业科学第34卷第4期Apr.2014CHINESEJOURNALOFTROPICALAGRICULTUREVol.34,No.4柱花草花药离体培养研究①单国燕1,2)②郑金龙1,2)高建明1,2,3)陈河龙1,2,3)张世清1,2,3)易克贤1,2)③(1中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101;2农业部热带作物生物技术重点开放实验室海南海口571101;3中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101)摘要以热研2号柱花草花药为外植体,研究不同植物生长调节剂、培养基以及低温预处理等对柱花草花药培养的影响,以期建立柱花草花药培养体系,获得

2、再生植株,为柱花草倍性、基因组学及分子生物学研究提供材料。结果表明:花药4℃低温预处理24h诱导效果较好;N6培养基对愈伤组织的诱导效果比MS培养基好;最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6+2,4-D0.5mg/L+KT1.0mg/L;分化培养的最佳组合为MS+NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/L。关键词柱花草;花药培养;愈伤组织诱导;不定芽分化分类号S541.04InVitroAntherCultureofStylosanthes1,2)1,2)1,2,3)SHANGuoyanZHENGJinlongGAOJianming1,2,3)1,2,3)1,2)CHENHelongZHA

3、NGShiqingYIKexian(1EnvironmentandPlantProtectionInstitute,CATASs,Haikou,Hainan571101,P.R.China;2MinistryofAgricultureKeyLaboratoryofTropicalCropBiotechnology,Haikou,Hainan571101;3InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,CATAS,Haikou,Hainan571101,P.R.China)AbstractInordertoestablishanefficie

4、ntantherculturesystemofStylosanthes,getregenerateplantletandprovidebasicmaterialsfortheresearchofploidy,genomicsandmolecularbiologyofStylosanthes.ThisexperimenttakingtheantherofStylosanthesguianensiscv,Reyan2asexplantstostudytheeffectofplantgrowthregulator,mediumandlowtemperaturepretreatmentonSt

5、ylosanthesantherculture.Theresultsindicatedthatlowtemperaturepretreatmentfor24hwasbetterthanothertreatments.N6mediumsupplementedwith2,4-D0.5mg/L,KT1.0mg/Lwasthebestforinductionofcullus.MS+NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/Lwasthebestforregenerationculture.KeywordsStylosanthes;antherculture;callusinduction;di

6、visionofadventitiousbud柱花草(Stylosanthesspp.)又名笔花豆,是全球种选育,从体细胞变异或体细胞融合技术中获得抗热带地区栽培面积最大、应用最广泛的优良豆科牧炭疽病植株以及利用遗传工程获得抗病转基因植株草。柱花草原产于南美洲,该属有44个以上的种等方面展开了多项研究[2-6]。国外在20世纪60年或亚种[1]代就开展了柱花草的组织培养研究[7-8]。柱花草炭疽病是威胁其推广种植的主要,但由于所障碍,近年来国内外在柱花草种质资源的收集、引使用的基因型有限,成效不显著。随着遗传工程技①基金项目:国家自然科学基金“柱花草炭疽菌致病相关基因的克隆及功能分析”

7、(No.31072076);公益性行业科研专项“草地病害防治技术研究与示范”(No.201303057);国家科技支撑计划“热带亚热带地区超高产牧草新品种选育及产业化示范”(No.2008BADB3B08);科技部国家科技成果重点推广计划项目“高蛋白热带豆科牧草配套养殖奶牛产业示范”(No.05EFN216900381)。收稿日期:2014-02-26;责任编辑/叶庆亮;编辑部E-mail:rdnk@163.com。②单国燕(1983~),女,

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