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《黄芪甲苷对高胰岛素环境下肾小球系膜细胞的保护作用及其机制.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、中国http://www.paper.edu.cn科技论文在线黄芪甲苷对高胰岛素环境下肾小球系膜细#胞的保护作用及其机制11,211**段文婷，李卫平，徐源，黄存东5（1.安徽医科大学药理学教研室，合肥230031；2.安庆医药高等专科学校，安庆246052）摘要：目的探究黄芪甲苷（As-IV）对人肾小球系膜细胞（HMC）在高胰岛素环境下PI3K/AKT/GSK-3β的调控及保护作用。方法将HMC作为操作对象，设立如下分组：(1)正常组（NG）、高胰岛素组（HINS,包括2，4，8，16，32，64，128n
2、mol/L）；(2)正常10组（NG）、高胰岛素组（HINS，128nmol/L）、AS-IV（25,50,100μmol/L）、Tempol组（100μmol/L）、LY294002（10μmol/L）组。干预12h后，用MTT法检测HMC细胞状态与细胞数量的受影响情况；DCFH-DA法检测每一组中ROS表达量；Westernblot法检测每一组HMC细胞akt、p-akt、gsk-3β、p-gsk-3β、TRPC6蛋白表达差异；Flu-3/AM荧光探针检测细胞内游离钙离子浓度。结果不同时间和剂量下，胰岛素
3、对细胞的增殖具有浓度依15赖性的促增殖作用；在实验剂量下，As-IV对高胰岛素环境下HMC细胞的增值具有随剂量递增的抑制作用。与高胰岛素组相比，AS-IV可在一定程度上减少HMC细胞内ROS含量；显著提高TRPC6蛋白表达程度，下调HMC细胞内p-Akt、p-gsk-3β蛋白表达程度。上升细胞内游离的钙离子浓度。结论AS-IV对在高胰岛素环境下HMC的生长具有保护作用，其原理可能与AS-IV提高HMC抗氧化能力、降低p-Akt、p-gsk-3β蛋白含量、提高20TRPC6表达水平和细胞内游离钙离子浓度有关。关
4、键词：糖尿病；人肾小球系膜细胞；黄芪甲苷；钙离子；TRPC6中图分类号：R587.24ProtectiveeffectsofAs-IVonhighinsulininducedhuman25mesangialcellsinjuryanditsmechanisms11,211DuanWenting,LiWeiping,XuYuan,HuangCundong(1.DepartofpharmacologyAnhuiMedicalUniversity,Hefei230031;2.AnqingMedicalCollege
5、,Anqing246052)Abstract:ObjectiveToresearchtheprotectiveeffectsofAstragalosidesIV(AS-IV)onhighinsulin30inducedhumanmesangialcells(HMCs)injuryinvitroanditspotentialmechanisdisms.MethodsHMCswastakenastargetcells.TreatedHMCswithdifferentconcentrationsandtimeofi
6、nsulin,analyzedtheproliferationandviabilitybyMTTassaytoselectthedose-andtime-dependentmannersofinsulin.TheHMCswasdividedandtreatedasfollows:(1)normalgroup(NG),insulin(INS,respectivelytreatedwith2,4,8,16,32,64,128nmol/Linsulin)group;(2)normalgroup(NG),highin
7、sulingroup35(HINS,128nmol/L),As-IV(25,50,100μmol/L)andTempol(100μmol/L),LY294002(10μmol/L).Aftertreatingfor12hours,theproliferationandviabilitywasanalyzedbyMTTassay.Thereactiveoxygenspecies(ROS)productedinHMCwasmeasuredbyDCFH-DA.Westernblotwasusedtotestthee
8、xpressionofp-Akt、p-gsk-3andTRPC6protein.Flu-3/AMasafluorescentprobefordetectingintracellularcalciumionconcentrationineachgroup.ResultsTheproliferationofMHCswasenhanced40inadose-andtime-dependentmanners
