18例骨髓瘤肾病患者血清免疫固定电泳的检测及临床分析

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1、18例骨髓瘤肾病患者血清免疫固定电泳的检测及临床分析：唐秀英，李云春，史青梅【摘要】目的为探讨免疫固定电泳(IFE)对骨髓瘤性肾脏疾病诊断的价值。方法采用免疫球蛋白(G、A、M)定量测定、血清蛋白电泳、免疫固定电泳，对161例肾内科肾衰和肾病综合症患者进行检测。免疫球蛋白采用免疫散射比浊法测定，血清蛋白电泳采用琼脂糖电泳，免疫固定电泳采用琼脂糖电泳+免疫固定技术。结果161例患者血清经蛋白电泳筛选出11例M蛋白，检出率为6.8%。有18例患者血清经免疫固定均出现M蛋白，检出率为11.1%。18例患者血清经免疫固定电泳均出现致密深染单克隆

2、M蛋白，结合Ig定量检测并依据判断标准确认为MM。结论血清免疫固定电泳(IFE)能明确提示骨髓瘤肾病，适于作为肾脏疾病的常规检查项目，在诊断和鉴别诊断骨髓瘤肾损害中有重要意义。【关键词】免疫固定;电泳;骨髓瘤肾病多发性骨髓瘤(MM)临床常表现为骨质疏松或溶骨病变、贫血、感染、肾功能损害。骨髓瘤肾病是多发性骨髓瘤引起的肾损害，占本病肿瘤发病的1%～2%，占血液系统肿瘤的10%。多发性骨髓瘤肾损害是MM最常见和严重的并发症之一，初诊时50%的患者存在肾功能不全。MM对肾的损害是多因素作用的结果。本文对2006-2008年18例以肾脏疾病首诊

3、的MM患者回顾性分析，以探讨免疫固定电泳(IFE)对骨髓瘤性肾脏疾病诊断的价值，提高肾内科医师对该病的认识，避免误诊和漏诊，提高MM的生存率。　　1材料和方法　　1.1标本选择我院2006-2008年肾内科住院患者161例，原发性肾病综合征患者95例，肾衰患者(CRF)66例。男85例，女76例,年龄36～85岁。其中18例经免疫固定电泳(IFE)均出现致密深染单克隆M蛋白。正常对照组36例经体检证实无肾脏疾病和其他慢性疾病。　　1.2仪器法国SebiaHydrasys全自动电泳分析仪和配套试剂，进行血清蛋白电泳、免疫固定电泳检测。免疫

4、球蛋白检测利用美国BeckmanArray-360特种蛋白分析仪及该公司生产的校准液、质控液及抗体试剂。　　1.3方法抽取晨空腹静脉血，分离血清，避免溶血和脂血。　　1.3.1免疫球蛋白检测为免疫散射比浊法，均严格按试剂盒说明书进行操作。　　1.3.2血清蛋白电泳取10μL血清标本于加样梳在琼脂糖凝胶板上电泳，干燥，染色，脱色，烘干，扫描，报告结果。　　1.3.3免疫固定电泳(1)加样：取按操作规程稀释的患者血清10μL加于加样梳小孔内，用pH8.8琼脂糖(4人份)进行电泳以分离蛋白质。(2)免疫固定加抗血清：电泳后分别加固定液12μL

5、，后再加IgG、IgA、IgM及KAP和LAM抗血清各12μL，25℃孵育5min，再用厚滤纸覆盖与凝胶片上吸去表面的固定液和水分，65℃烘干6min。(3)染色-脱色：将烘干的凝胶片置于染色缸内用结晶紫染色液染色，然后用0.5%柠檬酸脱色液进行脱色以除去剩余染料。(4)观片：烘干胶片，观察结果。　　1.4判断标准MM按文献标准诊断[1]。　　2结果　　2.1161例患者血清经蛋白电泳筛选出11例M蛋白，检出率为6.8%。有18例患者血清经免疫固定均出现M蛋白，检出率为11.1%。18例患者血清经免疫固定电泳均出现致密深染单克隆M蛋白，

6、结合Ig定量检测并依据判断标准确认为MM。　　2.2三种方法对18例MM患者血清单克隆免疫球蛋白的检出率(%)见表1。表1三种方法对血清单克隆免疫球蛋白的检出率　　2.2.1血清蛋白电泳见图1。　　图1血清蛋白电泳2.2.2MM患者IFE分型图谱见图2。　　3讨论　　3.1MM是浆细胞克隆性增生的恶性肿瘤。骨髓瘤肾病是多发性骨髓瘤引起的肾损害。临床表现为肾病综合征、急性肾衰、慢性肾衰、肾小管功能不全。肾外表现有：全身骨痛、感染、贫血及出血倾向、高钙血症等。在骨髓瘤细胞的基础上出现蛋白尿、尿本-周蛋白阳性。由于异常浆细胞恶性增生程度和浸润

7、范围不一，其临床表现复杂多样，易误诊，延误病情。张天弼[2]报道20%的MM患者误诊为肾脏病变。以肾衰为首发症状的MM起病往往比较隐匿，是造成骨髓瘤患者死亡最常见的原因之一。诊断MM时CRF的发生率在20%～50%之间。在诸多因素影响下，MM疾病过程中迟早会出现肾损害。本研究中18例MM患者都以急、慢性肾功能衰竭为主要临床表现首诊，患者最初表现为蛋白尿或肾功能衰竭，而后才表现骨髓累及症状，极易误诊为肾小球肾炎、肾功能衰竭。另外，骨髓瘤患者体内分泌的大量轻链蛋白在肾小管部位的沉积和损伤，从而引起的肾脏病变，它也是造成CRF的主要原因[3-

8、4]。从临床资料分析，除肾脏病变明显外，更主要是临床医师对MM的警觉性不高，对患者复杂多样的病情认识不足，仅仅考虑肾脏一般常见病、多发病的诊断，从而忽略了MM的存在。本研究中，血清蛋白电泳对单克隆免疫球蛋白