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《流式细胞术进行油菜倍性分析的探究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、基金项目:国家863项目“强优势油菜杂交种的创制与应用”(2011AA10A104),四川省“十二五”科技攻关“突破性油料新品种选育”(2011YZGG005),四川油菜创新团队建设,成都市重大科技项目,作者简介:王振宇(1988-),男,汉族,四川绵阳人,在读硕士研究生,主要从事油菜分子遗传与遗传育种研究。*,为通讯作者,张汝全(1954-),男,汉族,四川大邑人,研究员,主要从事油菜遗传育种及油菜杂种优势利用研究,Email::ruquanzhang@163.com流式细胞技术鉴定油菜倍性的研究王振宇1,2付绍红1许明超1,2牛应泽2李云1,杨进1王继胜1陈晓华1,邹琼1陶兰蓉1康泽
2、民1唐蓉1张汝全1,*,(1.成都市农林科学院,国家油菜改良中心成都分中心,成都温江,611130)(2.四川农业大学农学院,油菜研究中心,成都温江,611130)摘要:本研究利用流式细胞术(FlowCytometry,FCM)鉴定经秋水仙碱作加倍处理油菜的倍性水平,并用传统细胞压片观察计数染色体方法对其结果进行了验证;结果表明,三倍体植株G1期峰值为360000道,四倍体植株G1期峰值为480000道,加倍后六倍体植株G1峰值为720000道,八倍体G1期峰值为960000道,并对不同倍性植株根尖进行染色体压片鉴定,其结果与流式细胞检测法结果一致,且染色体倍性水平与核DNA含量成正相关
3、关系,说明流式细胞术的高效准确,且检测过程简单快捷,对于大量鉴定具有明显优势。关键词:油菜;流式细胞术;倍性鉴定;染色体加倍TheStudyonPloidyAnalysisofrapeseedChromosomebyFlowCytometryWANGZheng-yu,FUShao-hong,XUMing-chao,NIUYing-ze,LIYu,YANGJing,WANGJi-sheng,CHENXiao-hua,ZOUQiong,TAOLan-rong,KANGZe-ming,TANGRong,ZHANGRu-quan.Abstract:Inthisstudy,flowcytometr
4、y(FlowCytometry,FCM)identifiedbycolchicinetreatmentfordoublingploidyrapeseedandobservedbyconventionaltablettingcellchromosomecountingmethodtoverifytheirresults.TheresultsshowedthatthetriploidplantsG1phasepeakof360,000,tetraploidG1phasepeakof480,000,doublinghexaploidplantsG1peakof720,000,octoploid
5、sG1phasepeakat960,000,andthedifferentroottipofchromosomeploidytabletidentification,andtheresultswereconsistentwiththeflowcytometryassayandchromosomeploidylevelandnuclearDNAcontentwerepositivelycorrelated,indicatingthattheefficientandaccurateflowcytometry,andthedetectionprocessissimpleandfast,fora
6、largenumberidentificationhasobviousadvantages.Keywords:rapeseed;FlowCytometry;PloidyDetermination,Chromosomedoubling油菜是世界四大主要油料作物之一,属于十字花科(Cruciferae)芸薹属(Brassica),包括甘蓝型油菜(Brassicanapus)、白菜型油菜(Brassicacampestris)、芥菜型油菜(Brassicajuncea)3个栽培种[1]。利用种间杂交培育或拓宽油菜遗传资源是油菜新品种选育的主要手段之一,种间杂交F1不易得到自交后代,通过染色体加
7、倍可以得到F1的自交后代[2-4]。同时,使用和培育多倍体油菜使它们产生满足人类需求的各类新的性状,也已成为育种家们追求的目标6[5]。倍性鉴定对植物的遗传育种有非常重要的辅助作用,而倍性鉴定的方法有多种。可以通过细胞学或形态学进行鉴定,多以准确性最高的细胞压片观察计数染色体方法确定植物倍性水平为主[6]。今年来随着现代科学技术的发展,基于激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术为主的流式细胞技术得到了飞