人类性激素结合球蛋白的单克隆抗体

人类性激素结合球蛋白的单克隆抗体

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1、Page1第1页Monoclonalantibodiestohumansexhormone-bindingglobulin人类性激素结合球蛋白的单克隆抗体(SHBG):Characterizationanduseinasimpleenzyme-linked(SHBG):表征在一个简单的酶联immunosorbentassay(ELISA)ofSHBGinplasma性激素结合球蛋白(ELISA)检测血浆中的免疫吸附试验JohnG.Lewis,NicholasJ.Longley,PeterA.Elder约翰G·刘易斯,尼古拉斯J.朗利,彼得A.爱尔德Steroid&Immunob

2、iochemistryLaboratory,ClinicalBiochemistryUnit,CanterburyHealthLaboratories,Christchurch,NewZealand类固醇及免疫学生物化学实验室,临床生化组,坎特伯雷卫生实验室,新西兰基督城Received22May1998;accepted23November19981998年5月22日,1998年11月23日Abstract摘要Fourmonoclonalantibodiestohumansexhormone-bindingglobulinwereraisedandcharacterized.

3、提出了四个人类性激素结合球蛋白的单克隆抗体和特点。四分之三Threeofthefourantibodies四分之三个抗体recogniseddifferentantigenicdeterminantsonSHBG.公认的SHBG不同的抗原决定簇。TwoofthedistinctantibodieswereusefulforWesternblottingandrecognizeda两个不同的抗体用于免疫印迹,并确认major48kDabandinhumanplasmaaswellasa46kDaminorcomponent.人体血浆中46kDa的次要组成部分以及主要48kDa区。

4、Carbohydrateresiduesdonotformpartoftheantigenic碳水化合物的残留物不会形成抗原的一部分determinantsofthesetwoantibodies,althoughoneoftheseshowedincreasedsignalfollowingremovalofN-linkedoligosaccharides.这两种抗体的决定因素,尽管这些发现增加的信号,去除N-连接低聚糖。Some在同一天有些oftheantibodieswereselectedtoformabasisofasame-day,non-competitive,e

5、nzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)forSHBG被选中的抗体在HSBG的基础上在血浆中,进行非竞争,酶联免疫吸附试验(ELISA)inplasma.。TheassayemploysapurifiedIgG2aSHBGmonoclonalantibodyadsorbedtothewellsofamicrotitreplate.该试剂盒采用纯化IgG2a性激素结合球蛋白单克隆抗体吸附到一个微孔板井。Afterblockingany在阻止任何物质furtheradsorptiontotheplate,standardsordilutedpati

6、entsampleswereaddedfora5-hincubationatroomtemperature,afterwhichthe进一步吸附到板上,在室温下分别加入标准或稀释患者样本经过5h的潜伏期后platewaswashedandantibody-boundSHBGwasdetectedwithananti-SHBGIgG1monoclonalantibodyfollowedbyperoxidase-labeled板被冲走,反SHBG过氧化物酶标记的IgG1单克隆抗体检测抗体绑定SHBGantimouse-IgG1ando-phenylenediaminesubstra

7、te.antimouseIgG1和邻苯二胺底物。Theassaycorrelatedwellwithanexisting2-dayELISAforSHBGinplasmausing与现有的2天ELISA检测相关血浆SHBG使用polyclonalantibodiesandalsocorrelatedwithadihydrosterone(DHT)ligand-bindingassay.多克隆抗体,并与dihydrosterone(DHT)的配体结合法相关。Themonoclonalantib

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