长沙环境保护职业技术学院课时授课计划

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1、长沙环境保护职业技术学院课时授课计划授课章节目录：项目七水中的细菌学测定Ⅰ细菌总数的测定授课时数：2目的要求：1.掌握水中细菌总数的测定方法。2.掌握细菌总数的报告方法。3.了解细菌总数测定的意义。教材分析（难点、重点）：本节重点：细菌总数的测定方法。本节难点：细菌总数的报告方法。教学方法：图解法、启发式、问答式教学手段：板书教具、挂图与参考书：布置作业：1.何谓细菌总数？2.绘制细菌总数测定操作示意图。课后记要：项目七水中的细菌学测定水的细菌学测定适用于饮用水、水源水、地表水和各种工矿企业废水、生活污水中的细菌检验。是常规监测

2、项目，特别是细菌总数的测定、总大肠菌群和粪大肠菌的测定，是必测项目，要求要上报的。一、水样的采集1.采水容器①采样瓶：具磨口玻塞的500mL广口瓶②采样瓶的洗涤③采样瓶的灭菌:160～170℃干热灭菌2h，或用高压蒸汽灭菌器，121℃灭菌15min2.采样步骤及注意事项(1)去氯和高浓度重金属：灭菌前按500mL采样瓶加入0.3mL10%Na2S2O3溶液；(2)采样方法①采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带塞采样瓶插入水中，约距水面10～15cm处采集；②采集一定深度的水样时，可使用单层采水器（图4-

3、1）或深层采水器（图4-2）；③从自来水龙头采集样品时，采水前可先将水龙头打开至最大，放水3～5min，用酒精灯火焰灼烧约3min灭菌，或用70%的酒精溶液消毒水龙头及采样瓶口：再打开龙头，开足，放水1min，以充分除去水管中的滞留杂质；④在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品；（3）采样完毕，做好记录二、样品保存采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。Ⅰ

4、细菌总数的测定细菌总数：指lmL水样在营养琼脂培养基中，于37℃培养24h后，所生长细菌菌落的总数。我国生活饮用水卫生标准规定，生活饮用水的细菌总数lmL不得超过100个。【补充】（1）室内空气质量标准<2500caf/m3采用撞击法：即用撞击式空气无所谓采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生告诉气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到培养基上，经37℃，48h培养后，计算m3出每空气中所含的细菌总数。（2）地下水标准Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类≤100个/mL；Ⅳ≤1000个/mL；Ⅴ>1000个/mL一、细菌总数测定的意义细菌

5、总数可以反映水体有机污染的程度。P68表4－1二、培养基的制作三、测定方法及步骤(一)水样的稀释(二)操作方法水样225mL无菌水25mL1mL1mLckck10-110-110-210-210-310-31mL1mL1mL1mL1mL1mL接种后倒培养基（冷至45℃左右），于37℃下倒置培养24h。四、菌落计数计数各稀释度的平均菌落数五、计算和报告计数结果（先举例，在总结）长沙环境保护职业技术学院课时授课计划授课章节目录：项目七水中的细菌学测定Ⅱ总大肠菌群的测定授课时数：3目的要求：1.掌握利用发酵法测定总大肠菌群的方法。2.

6、掌握总大肠菌群的特征。3.了解总大肠菌群测定的意义。教材分析（难点、重点）：本节重点：发酵法。本节难点：试验结果的判断。教学方法：图解法、启发式、问答式教学手段：板书教具、挂图与参考书：布置作业：1.何谓总大肠菌群？总大肠菌群具有哪些特征？2.如果把水样稀释到10000倍，绘制多管发酵法测定总大肠菌群的操作示意图。课后记要：Ⅱ水中总大肠菌群的测定总大肠菌群:指那些能在37℃48h之内发酵乳糖产酸产气的、需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。主要包括有埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等菌属的细菌。【补充环境标准】

7、（1）饮用水卫生标准：我国生活饮用水卫生标准规定，生活饮用水的总大肠菌群数每升不得超过3个。作为生活饮用水水源的水质，应符合下列要求:若只经过加氯消毒即供作生活饮用水的水源水，总大肠菌群平均每升不超过1000个；经过净化处理及加氯消毒后工作生活饮用的水源水，总大肠菌群平均每升不得超过10000个。（2）地下水质量标准：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类≤3个/L；Ⅳ≤100个/L；Ⅴ>100个/L一、测定意义作为水体受粪便污染的指标。二、总大肠菌群的特征1．在37℃下可使乳糖发酵2．在37℃下、48h之内可产酸产气1．是革兰氏阴性无芽孢杆菌2．在特殊

8、培养基上能够长出具有典型特征的菌落三、多管发酵法【本部分内容采用图解法来讲解，以增加直观性】(1)生活饮用水①初发酵试验：将水样接种在10只装有5mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液中，每支接种10mL、另取2份100mL水样分别接种在两个装有50mL三倍浓缩乳糖蛋白胨