T∕SHZSAQS 0162-2022 牛羊布鲁氏菌病快速诊断技术规范

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ICS65.020.30CCSB40团体标准T/SHZSAQS00162—2022牛羊布鲁氏菌病快速诊断技术规范2022-11-09发布2022-11-09实施石河子市质量标准化协会发布

1T/SHZSAQS00162—2022目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14原理..............................................................................15材料设备..........................................................................15.1检测卡............................................................................15.2其他..............................................................................26实验流程..........................................................................26.1血清检测样本的制备................................................................26.2胶体金试纸条快速检测..............................................................27结果判定..........................................................................28废弃物处理........................................................................29人员防护..........................................................................310注意事项...........................................................................3I

2T/SHZSAQS00162—2022前言本文件参照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。本文件起草单位：石河子大学动物科技学院。本文件主要起草人：张辉、邓兴梅、王震、郭嘉、王勇、孙志华、吴洁、周霞、刘良波、张豫、何开兵、赵天艺、刘航、张静、何白雪、陈杨。II

3T/SHZSAQS00162—2022牛羊布鲁氏菌病快速诊断技术规范1范围本文件规定了牛羊布鲁氏菌病快速诊断的术语与定义及原理、材料设备、实验流程、结果判定、废弃物处理、人员防护、注意事项等，适用于牛羊布鲁氏菌病的快速诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术NY/T541动物疫病实验室检验采样方法3术语和定义GB19489、GB/T18646、NY/T541中界定的术语与定义适用于本文件。4原理本文件采用胶体金免疫分析技术，将氯金酸还原法制定一定直径的金颗粒，标记布鲁氏菌蛋白。以硝酸纤维素膜为载体，膜上含有被事先固定于膜上的检测带（T）的布鲁氏菌蛋白和质控带（C）的二抗。检测时，将血清加到试纸条的加样孔中，血清在层析作用下向试纸条的另一端移动，此过程中布鲁氏菌抗体与胶体金形成复合物，再与固定在膜上的抗体特异性结合，并被其截获而显现红色。5材料设备5.1检测卡布鲁氏菌抗体检测试纸条装在塑料卡中制成检测卡，铝箔密封，内装干燥剂，室温或冷藏保存。测试卡结构及测试部位如下图所示。1

4T/SHZSAQS00162—2022样品孔检测区STC检测线质控线图1检测卡组成示意图5.2其他毛细滴管、离心机。6实验流程6.1血清检测样本的制备将收集的待测牛羊血液样品置于采集管中37℃温箱1小时,再置4℃冰箱内3～4小时.待血液凝固血块收缩后,用毛细滴管吸取血清，于2000rpm离心15分钟,取上清待检。6.2胶体金试纸条快速检测取适量的检测样品（80L～120μL，滴管3滴～4滴），缓慢滴加到样品孔中，当看到红色液体在试纸条上移动时，放慢加样速度。整个加样过程控制在1min内完成。加样完成后将试纸条平放在桌面上，5min～30min内观察结果。7结果判定阳性结果：在试纸条上出现两条红色的条带。阴性结果：在试纸条上仅在质控线处出现一条红色的条带。无效结果：在质控线未出现红色的条带。8废弃物处理检测过程中的废弃物，应收集后高压灭菌处理。高压灭菌后，交由指定的医疗垃圾处理站销毁。2

5T/SHZSAQS00162—20229人员防护实验室工作人员在上班前应进行个人卫生处置，对全身进行喷雾消毒；进入实验室后必须穿工作衣、戴工作帽、手套、胶套、医用防护口罩、防护眼镜或面罩，穿隔离衣；实验室工作人员在每次接触标本后立即进行清洗和消毒，手消毒可用75%乙醇或用0.3%～0.5%碘伏，严格按照洗手法搓揉1～2分钟，洗手应采用非接触式的洗手装置。10注意事项若质控线不出现时，检测结果无效，必须重新检测；检测过程中的废弃物，应收集后高压灭菌处理。高压灭菌后送到指定的医疗垃圾处理站销毁。-------------------------------------------------3