DB15∕T 2540—2022 羊肚菌菌种制作技术规程(内蒙古自治区)

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1、ICS65.020.01CCSB05□B15内蒙古自治区地方标准DB15/T2540—2022羊肚菌菌种制作技术规程RegulationofstrainmanufactureformorehellaesculentaDB15/T2540—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、赤峰市克什克腾旗农牧局、内蒙古瑞福杨种植专业合作社。本文件主要起草

2、人：于传宗、孙国琴、王海燕、庞杰、李亚娇、慕宗杰、于凤玲、刘瑞、田永雷、韩凤英、云伏雨、田文龙。IDB15/T2540—2022羊肚菌菌种制作技术规程1范围本文件规定了羊肚菌菌种生产技术要求。本文件适用于羊肚菌母种、原种和栽培种菌种生产技术。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4806.7食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品NY/T528食用菌菌种生

3、产技术规程NY/T1731食用菌菌种良好作业规范3术语和定义3.13.23.33.4DB15/T2540—2022由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以菌种瓶（玻璃菌种瓶或塑料菌种瓶）或（12～17）cm×（22～28）cm×（0.04～0.05）mm聚丙烯塑料袋为容器。也称为二级种。3.5栽培种spawn由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以菌种瓶（玻璃瓶或塑料瓶）或（15～17）cm×（33～35）cm×（0.04～0.05）mm聚丙烯塑料袋为容器。栽培种只能用于扩大到栽培出菇袋或直接出菇，不可以再

4、次扩大繁殖菌种。也称为三级种。4菌种生产要求4.1人员生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应专业技术人员。4.2场地、厂房要求菌种生产应选择地势高，通风良好，空气清新，水源近，排水通畅，交通便利的场所。菌种生产厂房要求有各自隔离的摊晒场、原材料库、配料分装库。配套有配料室、搅拌室、装袋（瓶）室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室（通风好，有纱窗）、菌种检测室及菌种冷藏库等各环节的设施。冷却室、接种室，培养室都要有离子净化设施。4.35.15.25.3DB15/T2540—202

5、2降温至（65±5）℃时取出试管，在空气清洁的室内摆斜面，要求斜面长度不超过试管长度的2/3，自然降温凝固后成斜面。从摆好的试管中抽取3%～5%的试管，在28℃下培养48h，无微生物长出为灭菌合格。5.3.2平板培养基分装和灭菌培养基装入300ml～500ml三角瓶至刻度的2/3处，用带滤膜的封口膜封口后放入灭菌锅；玻璃培养皿用报纸包好，放入灭菌锅。在温度升至102℃～105℃排净冷空气后升压，升至121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）恒温灭菌25min。降温至（65±5）℃时，在超净工作台内将三角瓶中的

6、培养基分装至无菌培养皿中，培养基占培养皿高度的1/3～1/2。5.4接种在超净工作台或接种箱内接种，接种前用紫外灭菌灯照射30min，之后用75%酒精进行表面消毒。接菌过程严格执行无菌操作，接种后及时贴好标签并做好记录。接种的菌块3mm～5mm，接种在培养皿或试管的中部。培养皿需用石腊封口膜密封。菌丝长满试管斜面或培养皿表面即可使用。5.5培养温度控制在18℃～26℃，空气湿度在75%以下，通风避光培养。接种后第3d、第5d和长满培养基后分别进行检验，挑出未活、污染和生长不良的不合格培养器皿。检查方式符合NY/T173

7、1规定。6.16.26.3DB15/T2540—20226.4灭菌可采用高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌：组合培养料在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）下灭菌2h；粮食培养基在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）下灭菌2.5h。常压灭菌：在3h之内使温度升至100℃，恒温保持10h～12h。6.5接种高压灭菌：组合培养料在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）下灭菌2h；粮食培养基在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）下灭菌2.5h。常压灭菌：在3h之内使温度

8、升至100℃，恒温保持10h～12h。6.6培养通风避光、21℃～26℃下培养。6.7贮存原种和栽培种在0℃～4℃下贮存，贮存期不超过50d。7检验母种感官要求见表1。DB15/T2540—20227.2原种感官要求见表2。表2羊肚菌原种感官要求项目要求容器完整、无破损、洁净棉塞或无棉盖体干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和滤菌要求