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面向21世纪课程教材TextbookSeriesfor21stCentury中兽医学实验指导第二版钟秀会主编动物医学专业用中国农业出版社
1第二版前言本实验指导为“面向21世纪课程教材《中兽医学》”的配套教材。自1987年第•版《中兽医学实验指导》印刷以来,全国各个农业院校多次使用。认为内容丰富完整,系统性强,起到了很好的作用。但是,由于全国各院校在专业课设置方面的调整,以及近年来畜牧业结构的变化,使得原教材实验指导出现了一些不太适应的问题。譬如,很多院校中兽医学课程学时数大大缩减:中兽医服务治疗対象由马牛等大家畜转向鸡猪等中小家畜甚至水产鱼类、蜂类等,因此需要调整部分内容,以适应今后教学需要。沿用《中兽医学实验指导》(第一・版)的体例,本书内容仍分为实验准备、基础理论、辨证论治、中药与方剂、针灸、家畜阉割术和病症防治共7章。所列入的实验项目,包括目的、准备(动物、药物和器材)、方法步骤、观察结果(附图表和数据等)以及分析讨论。按照农业出版社教材出版中心的要求,全书掌握在15万字之内。因此,对于一些目前教学中暂时未能开设的实验,本次修订时作了删改。另外,增加了象鸡病、犬猫病、鱼病等内容。有不妥之处,恳盼同道指教,以便使本书随着时代发展和不断修订,而日臻完善。本书修订过程中得到了原书作者的大力支持和无私帮助。张克家,李呈敏2位教授逐字审定了全部书稿,农业出版社教材出版中心和河北农业大学有关领导十分关注并大力支持作者的工作,史万玉老师给予了大力协助,于此深表谢意。钟秀会2002年12月16日
2主编钟秀会(河北农业大学)编者(按姓氏笔画为序)韦旭斌(中国人民解放军军需大学)许剑琴(中国农业大学)刘汉儒(华南农业大学)刘占民(河北农业大学)刘钟杰(中国农业大学)宋晓平(西北农林科技大学)杨英(内蒙古农业大学)胡元亮(南京农业大学)胡松华(浙江大学)卿柳庭(华中农业大学)曾忠良(西南农业大学)葛铭(东北农业大学)魏彦明(甘肃农业大学)主审于船(中国农业大学)审稿张克家(中国农业大学)李呈敏(河北农业大学)
3第一版前言我国高等农业院校从设立《中兽医学》课程以来,尚未组织过统编实验指导。因此,在1984年5月于安徽合肥举行的《中兽医学》教材修订会议上,代表们一致认为,编写具有一定水平,与《屮兽医学》相配套的《中兽医学实验指导》是当务之急。农牧渔业部教育司批示:‘’可根据本课程大纲和教材的基本要求编写,同时也要积极改革实验内容和方法,以适应教学需要。"我们根据这一精神,由17所高等农业院校的主讲教师参加,査阅了大量文献和资料,按期完成了编写任务。《中兽医学实验指导》系全国高等农业院校首次统编。内容分为实验准备、基础理论、辨证论治、中草药与方剂、针灸、家畜阉割术和病症防治共7章。所列入的实验项目,包括目的、准备(动物、药物和器材)、方法步骤、观察结果(附图表和数据等)以及分析讨论。在编写时,根据教学与形势的需要,既保留了中兽医传统技术的特色,又注意吸收了现代兽医学的先进实验技术,以供有关高等院校兽医专业《中啓医学》教学实验之用,也可供中兽医专业有关课程教学实验时参考。此外,对于其他教学、科研、生产单位的从事中啓医研究工作的人员,也又一定的参考意义。本实验指导的审定会于1985年6月在北京举行,除编写组成员外,还邀请了一部分教学、科研和生产单位的同志参加了部分编写和审定工作。其中有杨宏道、郭云祥、吴培、谢仲权、陆钢、王绍维、陈洪涛、宋金斌、王清兰、赵阳生、牟玉清、刘明科、何静蓉、康懋勤等同志,同时北京中啓药厂给予了大力的支持和帮助,于此表示深切的感谢。由于本实验指导涉及到中啓医学的各个部分,又是初次编写,在内容和方法上可能存在不少缺点和问题。希望各有关院校或读者在使用过程中及时提出意见,以便今后修改和补充。编者1986年6月
4主编编写人北京农业大学于船西北农业大学丁璟昌四川农业大学王天益北京农学院王耕良东北农业大学田宝丰江苏农学院孙宝琏南京农业大学宋大鲁河北农业大学李呈敏华中农业大学严钦典甘肃农业大学杨致礼山西农业大学张永先北京农业大学张克家贵州农学院陈正伦内蒙古农牧学院姜治有吉林农业大学赵海法华南农业大学莫其中国人民解放军兽医大学安徽农学院蔡良清(按姓氏笔画为序)第一章实验准备第二章基础理论ー、脾虚动物模型的制作与观察二、阳虚动物模型的制作与观察三、寒邪、热邪致病的实验观察第三章辨证论治一、牛病的诊法二、马属动物病的诊法三、猪病的诊法四、骆驼病的诊法第四章中药与方剂一、药用植物标本采集及蜡叶标本制作二、原色药用植物标本制作三、常用中药炮制方法四、草乌炮制后的成分变化五、中药十八反的动物实验六、中药十九畏的动物实验七、接骨膏的制备ハ、膜剂、栓剂、颗粒剂与片剂的制作九、中药蜜丸剂的制备十、双黄连注射液的制备十ー、复方当归注射液的制备十二、黃苓甘的提取十三、黄苓昔的分离十四、槐米中芦丁的提取十五、中药粉末的显微鉴别十六、中药化学成分预试十七、中药化学成分的提取、分离与鉴定十八、中药制剂的含量测定十九、荆芥、柴胡的解热作用二十、清热药的体外抗菌实验二H^ー、清热药的体内抗菌实验
5二十二、承气汤系列的攻下作用比较二十三、木槟硝黄散及其拆方对兔离体肠管的作用二十四、马价丸对兔实验性肠套迭的解除作用二十五、川贝母的止咳作用二十六、杏仁与枇杷叶的平喘作用二十七、独活及秦黄的止痛作用二十八、五苓散的利尿作用二十九、理气药对离体肠管的作用
6三十、理气药对在体肠管运动的影响三十ー、健脾理气药对瘤胃内环境的影响三十二、川苜对蛙肠系膜血管的影响三十三、桃红四物汤对离体子宫的影响三十四、延胡索乙素的镇痛作用三十五、赤芍的活血化瘀作用三十六、外用止血药比较三十七、补气方药对脾虚小鼠的作用三十八、参麦注射液对兔急性心肌缺血观察三十九、廿草甜素对破伤风杆菌毒素的中和作用四十、酸枣仁与远志的安神作用四Hー、桃花散对炎性渗出物吸收的影响四十二、大蒜的抑菌作用四十三、洋金花制剂的麻醉效果观察第五章针灸ー、马属动物常用穴位取穴法二、牛常用穴位的取穴法三、猪常用穴位的取穴法四、犬常用穴位的取穴法五、白针疗法六、血针疗法七、火针疗法ハ、巧治法九、电针疗法十、水针疗法十ー、激光针灸疗法十二、针刺麻醉十三、艾灸、温熨疗法[附]特定电磁波谱治疗仪在兽医临床上的应用十四、软烧疗法十五、烧烙疗法十六、穴位埋线、按摩、拔火罐疗法十七、电针对胆管末端括约肌电活动及胆汁分泌的影响十八、电针对牛瘤胃运动的影响十九、电针对山羊体表胃电图的影响二十、电针对山羊胃肠电活动的影响二H一、针刺对机体免疫力的影响二十二、破伤风类毒素穴位注射对机体抗体效价的影响第六章阉割术一、猪的阉割法二、公鸡的阉割法第七章病证防治ー、外感热病诊治二、幼畜腹泻的诊治
7四、五、六、七、ハ、九、十、犬细小病毒病的诊治牛宿草不转的诊治咳嗽的诊治猫绦虫病的诊治疮黄疔毒的诊治禽霍乱的诊治掏结术阴道脱及子宫脱的诊治鱼烂腮病的诊治
8第一章实验准备中兽医学(TraditionalChineseVeterinaryMedicine)的实验内容包括基础理论、辨证论治、中药方剂、针灸以及病证防治的实际操作技术。实验动物、器材各不相同,在实验前要根据不同的内容和要求,作好充分的准备,这是关系到实验效果好坏的基本条件。实验准备,主要包括实验动物、药物以及器材的准备。ー、实验动物的准备首先,应根据实验的要求对动物(包括家畜)的种属、性别,口齿或年龄、体重、健康状况等作出符合要求的选择。必要时选用无特殊病原动物(SPF),人工制造动物疾病模型(或选用自然病例)进行实验观察。利用自然病例时,应尽量选择有代表性的病畜和病证。其次,实验中,应对动物进行恰当的控制,以保证实验顺利进行。对动物的控制包括接近、捉拿和保定三个步骤。(1)动物的接近:对于生性温顺(如豚鼠、鸡、兔和羊)或不温顺(如大鼠、狗等)的动物一般均应温和接近,切忌惊吓。对于牛、马等家畜也应从侧前方温和接近或抚摸颈胸侧,使其不致产生惊恐或反抗。对于狗一般生人难于接近,需用食物引诱或事先加以训练,尤其作慢性实验时必须进行训练。其它动物如青蛙等直接捕捉即可。(2)动物的捉拿:经过调教的家畜如马、牛等,一般牵其缰绳拉至实验场地即可。但有些动物需要在注意安全的情况下进行捉拿。家兔和豚鼠从铁丝笼中取出时须从后面握其腰部,但慎勿损伤其肾脏。一般情况下猫和家兔可抓后躯和前颈部的皮肤。青蛙、蟾蝦等变温动物一般宜以一手的拇指和食指捏口裂后方两侧(头后部和前颈接合处)。鼠宜用一手捏两耳之间的头颈部皮肤,为防止大鼠咬人,可用一长柄夹代替手指,或用另一手向后牵住其尾,再进行保定或装入特制的鼠筒内保定。接近狗时,应迅速用手抓住两耳,另一大用绳将嘴绑起来,然后装入麻袋或狗笼,再送进实验室保定或麻醉。对于猫也可用此法。(3)动物的保定:中兽医保定家畜有着非常丰富的传统经验,请参照有关专著。第三,动物的麻醉:根据实验要求对动物要进行局部及全身麻醉。一般药物麻醉可参照外科麻醉法进行,至于针刺麻醉可参考本书第五章。二、药物的准备实验用药物包括各种剂型的中药、西药和试剂以及生理溶液,现仅介绍中药及试剂准备时的注意事项。首先,实验所用中药应符合《中华人民共和国兽药典》的规定。应先除去发霉、变质、虫蛀以及含有杂质的非药用部分。即便是地道药材也应注意除去非药用部分。如人参、玄参去芦;柴胡、麻黄去苗;藕节去须根;枇杷叶、骨碎补去毛;白羡藜,苍耳子去刺;肉桂、厚朴去表皮;枳壳去瓢;酸枣仁、苦杏仁去壳;麻黄去根;龟甲、鳖甲去皮肉;巴戟去心等。同时要把符合要求的药物,按照需要制成适当的剂型(如汤剂、冲剂、散剂、注射剂、丸剂、膏剂、丹剂和酒剂等)。按照动物种类和大小的不同,确定剂量和服法。其次,实验中应用的化学试剂,在配制时要称量准确,有特殊需要的要按规定干燥、称重、提纯。一般溶液应用蒸储水或无离子水根据需要量配制,以免配制过多造成浪费或过期失效。试剂按分级要求一经取出,特别是液体不得放回原瓶,以免不洁或污染。配好后的试剂应贴标签,并注明名称、浓度、配制日期以及配制人。易变质和需要特殊保存的试剂,应根据耍求密封(一般把瓶口塞紧后用蜡密封)、避セ;(可置棕色瓶或用黑纸包装)、礎(一般可用石灰、无水氯化钙和硅胶)以及特殊保存。应用时要按照操作规程进行。三、实验器材的准备包括实验仪器、玻璃器皿以及用具等。首先,实验用仪器,事先须根据操作规程进行检查,有故障时及时修理,以保证实验能顺利进行。对于玻璃器皿应洗涤清洁,尤其新购买的器皿表面常附有游离的碱性物质,可先用去污粉洗刷并用水冲净,然后用1%~2%盐酸溶掖浸泡4h以上,再用水冲净,最后用蒸储水冲洗2〜3次,在10〇〜130C烘箱中烤干备用。其次,针灸用具,需先检查有无弯折、生锈、损坏等现象,有不合用者应进行修理或择除。对于生锈的铁质用具或针具可放入用蒸储水等量稀释的氧化锌盐酸饱和溶液中,浸泡12h,
9取出后用温水冲洗,再用干布拭净,一般除锈后应呈美丽的银白色。铜制用具生锈,可用滑石1份、锯末2份、麦熬3份混匀,再用食醋拌成浆液,涂在铜制品的表面,等风干后用布擦干,铜锈就可除去。同时对于实验用其它器材也均应仔细检查,准备就绪,以保证实验的正常进行。此外,对需要作消毒处理的器材和用具还应事先按要求进行必要的消毒。四、实验注意事项1.实验前应预习实验指导,明确实验的目的,方法和步骤,并根据实验要求或在教师指导下,作好实验前的各项准备工作。2.实验应用的重要仪器,如分光光度计,激光针灸仪、多导仪、光谱仪、酸度计,电泳仪、微波针灸仪、电针机等,事先应了解使用方法,并按照操作规程使用,发生故障应立即关闭电源,并告知指导教师,以作妥善处理。3,在实验时要严肃认真,不允许戏弄实验动物或家畜,更不允许利用药物、器材等取闹以及随意品尝药物。4.在实验中一定要注意安全和必要的防护,严防易燃物着火、使用电器触电、被针具刺伤、被刀刃划伤、被动物咬伤或踢伤以及被强酸强碱灼伤等。5.实验按分组同时进行时,各组所应用的器材,动物和药品应分别放置和使用,以防乱抄乱用,影响实验秩序和进程。6.在实验过程中,要按照实验指导的要求或在教师指导下,认真操作,仔细观察,详细记录实验过程中所出现的现象和结果。实验结束,应将观察的结果进行分析、讨论、并写出实验报告。实验报告的内容:主要包括题目、目的、方法、结果、讨论以及结论。7.实验结束后应将仪器,用具和场地整理或清拭干净,并把仪器和用具放归原处。若有损坏应主动登记。第二章基础理论脾虚动物模型的制作和观察(-)目的
10通过实验加深对脾虚证的理解,并在理论上加以深化,进ー步认识脾虚证的本质。(二)准备1.动物选择体重20~30g的健康雄性小鼠4只,随机分为造模组2只和对照组2只。2.药物大黄、芒硝、厚朴、枳实分别研成粗粉,按1:2:1:1的比例配伍,开水冲后,纱布过滤,配成每ml含生药!g的大承气汤水浸液。炭末加适量水,配成每ml含2g炭末的水混悬液。3.器材鼠筒,药物台秤,数字体温计,直径为25cm,高15cm的玻璃缸,温度计。(三)方法和步骤1.造模组2只小鼠每天灌服大承气汤0.6ml,连续5〜7天,每天观察至出现脾虚症状为止。对照鼠在同样饲喂条件下,不作任何处理观察上述项目。2.造模组出现脾虚症状后,取2只做消化道推进实验。分别给造模组和对照组的每只小鼠灌服0.8ml炭末水混悬液,记录小鼠粪便中从投药到出现炭末的时间。3.上述试验后,接着做耐疲劳实验把造模组和对照组小鼠分别进行标记,同时放入水深12cm的玻璃缸内,分别记录小鼠在水中游泳的时间。4.脾虚模型判定标准按食欲减退、泄泻、消瘦、四肢无カ、体温降低、被毛失泽判定。(四)观察结果1.对小鼠的精神、被毛、食欲、行动进行观察,将脾虚造模组与对照组的上述各项进行比较,并记录。2.粪便脾虚造模组对照组123123第1天第2天第3天第4天第5天第6天3.体重脾虚造模组对照组123123
11第1天第3天第5天第7天4.体温天数脾虚造模组对照组123123第1天第3天第5天第7天5.耐疲劳试验應E虚造模纟a对照组123123游泳至死亡时间(min)水温:℃室温:℃湿度:%6.消化道推进试验脾虚造模组对照组123123最早出现炭末时间(min)(五)分析讨论1.脾虚证的主要表现有哪些?2.小鼠灌服大承气汤所致泄泻能否判定为脾虚?二、阳虚动物模型的制作和观察(一)目的阳虚是由于机体阴阳平衡失调所出现的阳气不足或机能衰退的表现,本实验试用药物制作模型并进行治疗观察。(-)准备1.动物健康小鼠6只。2.药物考的松(或氢化考的松),附子煎剂(1:1)、冰、食盐、碘酊和酒精。
121.器材1ml注射器,ST-1型数字体温计,鼠筒,10cm深的玻璃缸,冰盐水装置。(三)方法和步骤1.观察小鼠精神、活动、被毛、弓背情况、眼睛状况并测体温。2.取4只小鼠给其中2只每日分别腹腔注射考的松0.5ml、连续注射6天,观察小鼠有否出现阳虚症状,并与2只未注射药的对照鼠作比较,观察有何不同。3.造模小鼠和对照小鼠各取2只分别作耐疲劳(在水中游泳,观察游泳时间)和耐寒冷试验。记录在水中游泳时间和在冰盐水(食盐与冰块按1:2重量比混匀放入500ml烧杯内)中存活时间。4.将剩余阳虚症状的小鼠分成2组,1组作对照不治疗,!组经ロ灌服助阳药附子煎剂,每FI1次,每次0.4ml,连服3天,进行观察,并作耐疲劳和耐寒冷试验。5.阳虚模型判定标准按精神不振、活动迟缓、被毛粗乱、弓背、体温降低判定。(四)观察结果自行设计表格,详细记录。(五)分析讨论根据实验动物的主要表现,分析讨论阳虚证的实质,并评价助阳药附子的作用。三、寒邪、热邪致病的实验观察(-)目的通过观察寒邪、热邪致病后实验动物出现的症状表现,加深理解寒邪热邪的致病特点。(二)准备1.动物小鼠(雄性)4只。2.药物食盐,冰块,酒精。3.器材鼠笼,鼠筒,台秤,广ロ瓶(带有两孔的胶塞),500ml烧杯,乳钵,温度计(-20~100℃),酒精灯,三角支架,石棉网,火柴,体温计,镶子,白瓷板。(三)方法和步骤1.热邪致病①称取体重相近的雄性小鼠2只,测试体温后分别放入两个广口瓶内,ー广口瓶内小鼠为实验用,另一广口瓶内小鼠为对照观察。②将存有500m!常水的大烧杯置于三角支架上。③把实验用的广口瓶置于上述杯内,然后用酒精灯慢火加温,控制火焰,使瓶内温度保持在35〜40℃之间,随着温度逐渐升髙,观察小鼠有何异常表现,待小鼠出现热汗、四肢无カ、惊厥等症状时,从广口瓶中取出,再测体温,观察精神、黏膜色彩、被毛、汗液、四肢等,并与对照鼠进行比较。2.寒邪致病①同热邪致病的第•步。②将食盐与冰块按1:2重量比混匀放入500ml烧杯内。
13③将实验用的广口瓶置于上述500ml烧杯内,随着环境温度逐渐降低,观察小鼠有何异常表现,待小鼠表现出末梢皮肤黏膜变得苍白、皮紧毛乍、肢体僵硬时,从广口瓶中取出,再测体温,放于白瓷板上观察行走步态等,并与对照鼠进行比较。(四)观察结果热邪和寒邪致病出现的症状表现分别参考下表记录。组另リ精神黏膜色彩被毛汗液四肢体重实脸鼠实验前实验后对照鼠实验前实验后(五)分析讨论1.热邪致病有哪些症状,本实验能看到哪些?为什么会出现这些症状?2.本实验寒邪致病动物表现哪些症状?是属于外寒还是内寒,为什么?第三章辨证论治ー、牛病的诊法(-)目的与要求通过本实习,了解中啓医临床诊察牛病的基本过程及步骤,掌握牛病一般望、闻、问、切法的操作技术,并了解其注意事项及应用范围。(-)实习准备1、动物:牛(奶牛、黄牛、水牛均可)2头。2、药物:5%碘酊、70%酒精棉球。3、器材:牛鼻钳、听诊器、体温计、病历夹、病历表、保定绳。(三)方法和步骤1、望诊望诊的内容很多,大体可分为望全身、望局部和察口色三个方面。实习时教师先示范操作,学生认真观察。(1)望全身①精神:精神的好坏在全身很多方面均有所表现,其中突出地反应在眼睛、耳朵、面部表情和对外界事物的反应能力匕故望精神应重点集屮在这儿个方面。
14②形体:外形、体质的肥瘦强弱,其与五脏相应,一般说来,五脏强壮的,形体也强健;五脏虚弱的,外形也衰弱。其中形体变化与脾胃功能更为密切。③被毛:被毛的变化可反映机体抗御外邪的能力及家畜气血的盛衰和营养状况,同时也体现着肺气的强弱和有无机械性损伤。④动态:健康牛卧多立少,站立时常低头,休息时常半侧卧,两耳前后扇动或用舌舔鼻或被毛,人ー接近即行起立,起立时前肢跪地,后肢先起,前肢再起,动作缓慢,卧地或站立时,常间歇性倒嚼。(2)望局部①眼:眼为肝之外窍,但五脏六腑之精气皆上注于目,这说明望眼除了在望神中有重要意义外,还可测知五脏的变化。具体内容有望眼神、望目形、察眼色等,察眼色时只要两手握住牛角,将牛头扭向ー侧,巩膜、瞬膜即可外露,欲检查结膜时,可用两手大拇指将上下眼睑拨开观察。②耳:耳的动态与牛的精神好坏、肾及其他脏腑的某些病证有关。健康牛两耳灵活,听觉正常。两耳下垂、歪斜、竖立、唤之无反应均预示图3--1牛巩膜检査法相应疾病的发生。③鼻:应注意观察鼻孔的开张,鼻涕的有无及性质,特别是鼻镜的检查对疾病的诊断具有十分重要的意义。正常情况下,鼻镜湿润,且有少许水珠存在,触之有凉感。患病后鼻镜部即发生不同变化。为了更好地观察鼻汗分泌的情况,也可左手牵住鼻孔,右手擦去鼻汗,稍待即可看见鼻汗分泌情况,可从分泌快慢,汗珠大小,分布情况等判定寒热、虚实。④口唇:望口唇,不仅要从外部观察口唇的形态及运动,还要打开口腔观察内部的情况和变化,口唇变化不仅反应脾气的盛衰,而且可以反映出全身功能状态。观察时注意口唇有无歪斜,牙关是否紧闭,唇、舌、齿龈、颊部等处有无疮肿、水泡、溃烂、破伤等。以及口津多少,流涎程度及性质等。⑤呼吸:呼吸异常往往与肺有关,其他脏腑功能失调也可影响气机,而造成呼吸功能的变化。在疾病过程中,呼吸的次数及状态常发生变化,主要有快、慢、盛、微、紧缓不齐、姿势异常等。⑥饮食:望饮食包括观察饮食欲、饮食量、采食动作和咀嚼吞咽情况等,特别是反刍情况更应注意,正常情况下,反刍的次数、时间均有一定的规律,多为食后30〜60min即开始反刍,每次反刍持续时间在20min至lh不等,每昼夜反刍约4〜8次,每次返回口腔的食团约再咀嚼40〜60次,高产乳牛的反刍次数较多且每次的持续时间长。在多种疾病过程中均可出现反刍障碍,表现为反刍开始出现的时间晚,每次反刍的持续时间短,昼夜间反刍的次数少以及每个食团的再咀嚼次数减少;严重时甚至反刍完全停止。⑦躯干:观察胸背、腰、肚族等部位的变化,注意被毛及上述部位有无胀、缩、拱、陷等外形异常。⑧四肢:观察四肢站立和走动时的姿势和步态,以及四肢各部分的形状变化。⑨二阴:指前阴和后阴。前阴指外生殖器,注意观察阴茎的功能、形态:阴门的形态、
15色泽及分泌物的情况。后阴指肛门,观察时注意其松紧、伸缩及周围的情况等。⑩粪尿:注意观察粪尿的数量、颜色、气味、形态等。⑪乳房:在奶牛检查时尤为重要,注意其对称情况、大小、形状、外伤、皮肤颜色、疹疮及挤乳时患牛的表现,乳汁的颜色、粘稠度、有否絮状物及混杂物。此时最好结合触诊(温度、质地、结节)进行。(3)察口色①方法:检查者站于患牛头部的左侧方,先用手轻轻拍打牛的眼睛,在其闭眼的瞬间,以一手的拇指和食指从两侧鼻孔同时伸入,并捏住鼻中隔(或握住鼻环)向上提举,另一手从口角伸入口腔,拨开嘴唇、推动舌体,此时即可进行观察。②部位:牛的口色由于受色素沉着的影响,故观察部位以颊部、舌底及卧蚕和仰池为主。③表现:正常口色呈淡红色。病理口色有白、赤、青、黄、黑等五色的变化。正常舌苔薄白。病理舌苔为白、黄、灰黑三种表现。正常舌筋(舌下静脉)不粗不细不分枝,形如棉线。病理舌筋有的粗大,分枝明显,呈乌红色,形如麻线:有的细小,不明显,不分枝,呈苍白色,形如细丝线。将舌体等分三段,舌尖舌筋变化与上焦病证有关,舌中部舌筋变化与中焦病证有关,舌根舌筋变化与下焦病证有关。看口津,主要是分辨口津的多少和性质,是量少而粘稠,还是量多而清稀。看舌形,主要是看舌体形状大小及手感有力无カ,如舌体是肥瘦适中,还是舌肿满口,板硬不灵,或是舌软如绵,伸缩无カ。2、闻诊是通过听觉和嗅觉了解病情的ー种诊断方法。包括耳闻声音和鼻嗅气味两个方面。(1)闻声音包括叫声、呼吸音、咳嗽声、叫嚼及胃肠音,同时结合听诊心、肺等音响。①叫声:健康牛在求偶、呼群、唤子等情况下,往往发出宏亮而有节奏的叫声,疾病过程中,叫声的宏微高低常有变化,甚至出现低微的呻吟声。②呼吸音:•般不易听到,剧烈运动和劳役时,呼吸音变粗大,疾病过程中呼吸气息常有变化,严重者出现气息急促而喘。③咳嗽:健康牛一般不咳嗽,咳嗽是肺经病的一个重要症候。由于疾病性质和病程不同,咳嗽的声音、时间及伴随的症状也不相同,有实咳、虚咳,有干咳、湿咳,有白天咳嗽、夜晚咳嗽的不同。④咀嚼:健康牛在采食、反刍时,可听到清脆而有节奏的咀嚼声,疾病过程中可见到咀嚼缓慢小心、声音低微,或口内并无食物而牙齿咬磨作响等异常表现。⑤瘤胃、瓣胃、真胃音:多以听诊器进行间接听诊。正常时,瘤胃随每次蠕动而出现逐渐增强而又逐渐减弱的沙沙声,似吹风样或远雷声,健康牛每2min为2〜3次,以判定瘤胃蠕动音的次数、强度、性质及持续时间。瓣胃呈断续性细小的捻发音,于采食后较为明显,主要判定蠕动音是否减弱或消失。真胃音呈流水声或含漱音,主要判定其强弱和有无蠕动音的变化。⑥肠音:健康牛在整个わ腹侧,均可听到短而稀少的肠蠕动音,呈流水音或含漱音。(2)嗅气味包括ロ气、鼻气、粪、尿、乳汁等的气味
16①ロ气:健康牛口内带有草料气味,无异臭,若出现异常气味,多为口腔及前胃疾病。②鼻气:健康牛鼻无特殊气味,若出现异常气味,多是肺经有病,在牛患醋酮血病时,鼻气中出现烂苹果气味。③粪:正常时有一定的臭味,在某些胃肠疾病过程中,臭味不显,多为虚寒证;臭味浓重,多为湿热症。④尿:正常时气味较小,在疾病过程中,气味熏臭,多为实热;无异常臭味,多属虚寒。⑤乳汁:正常时有一定的乳香味,在患病时出现异常气味,如在患醋酮血病时出现特异的烂苹果的丙酮气味。在某些中毒性疾病过程中也可出现相应的中毒物的气味。3、问诊就是通过与畜主及有关人员有目的地交谈,对病畜进行调查了解的一种方法。问诊的内容主要有下列几项(1)发病及诊疗经过:包括发病的时间、地点、起病时的主要症状,疾病发展的快慢。是否进行过治疗,如何治疗的,疗效如何。(2)饲养管理及使役情况:包括饲料种类、来源、品质、调制及饲喂方法,圈舍有无,条件如何,使役量,使役方法,鞍挽具等。(3)病畜来源及疫病情况:包括病畜是自繁自养的,还是外地引进,是个体发病还是群体发病,是否进行过防疫工作。(4)既往病史及生殖情况:包括患畜过去得过什么病,与这次发病的关系,包括生产性能,如泌乳量等,以及配种、妊娠,产仔的情况等。总之,问诊要灵活,切不可千篇一律,在内容上既要全面搜集情况,又要有重点深入,问清与辨表里、寒热、虚实有关的细节。此外,问诊时语言要通俗,态度要和蔼,以启发的方式进行询问,而取得畜主的很好配合。4、切诊就是依靠手指的感觉,进行切、按、触、叩,从而获得辨证资料的ー种诊察方法。包括切脉和触诊两部分。(1)切脉:①方法及部位:诊者站在患牛正后方,左手将尾略向上举,右手食指、中指、无名指布按于尾根腹面,用不同的指力推压和寻找即得,拇指可置于尾根背面帮助固定。因牛切的是尾中动脉,所以具体部位一般是以肛门中心相对应的尾根定关部(即中指定关部),其上ー指为寸部,其下一指为尺部,也可在牛尾椎骨第三节处定关部,据此确定寸、关、尺三部,分应上、中、下三焦病变。②表现:正常脉象是不浮不沉,不快不慢,至数一定,节律均匀,中和有力,连绵不断,一息四至。正常脉象随机体内外因素的变化而有相应的生理性变化,如季节、性别、年龄、体格等。病理脉象:由于病症多样,故脉象的变化也就相应复杂,重点掌握八大脉象,浮、沉、迟、数、虚、实、滑、涩。③注意事项:切脉成败的关键在于保持病畜及周围环境的安静,使患牛安静的常用方法是:公牛宜抚摸睾丸或搔痒后海穴,母牛宜扣耳角根,犊牛宜母牛在身旁。切脉应首先学会定位,其次摸到脉搏,最后平心静气地去感觉。
17(2)触诊①凉热:用手触摸患牛有关部位温度的高低,以判断寒热虚实,现多结合体温计测定直肠温度。具体内容包括ロ温、鼻温、耳温、角温、体表、四肢等部位。触摸角温时,四指并拢,虎口向角尖,小指触角基部有毛与无毛交界处,握住牛角,若小指与无名指感热,体温一般正常,若中指也感热,则体温偏髙;若食指也感热,则属发热无疑。若全身热盛而角温冷者,多属危症。②肿胀:触摸时要察明其性质、形状、大小及敏感度等方面的情况。③咽喉及槽口:主要应注意有无温热、疼痛及肿胀等异常变化,如牛的放线菌病即有该处变化。④胸腹:用手按压或叩打两侧胸壁时,观察其躲闪反应。顶压剑状软骨突起部看其疼痛反应。触诊瘤胃是腹部重要的检查内容,检查者位于牛的左腹侧,左手放于中背部,右手可握拳、屈曲手指或以手掌放手月欠部,先用力反复触压瘤胃,以感知内容物性状,正常时,似面团样硬度,轻压后可留压痕,随胃壁缩动可将检手抬起,以感知其蠕动力量,并可计算次数,正常时每2min为2〜3次。⑤谷道入手:主要用于子宫、卵巢、肾、膀胱等脏器疾病的检查和妊娠诊断以及骨盆、腰椎有无骨折、包块等。(四)观察结果将四诊结果进行综合整理,最终确定其临床诊断意义。(五)分析讨论四诊各有什么诊断意义?四诊合参在临证上的重要性?二、马属动物病的诊法(-)目的与要求通过本实习,了解马属动物病诊察的一般程序,重点掌握马属动物四诊所特有的操作技术,注意与牛病诊法的联系和比较。(-)实习准备1、动物:马、骡、驴各1匹(头)。2、药物:5%碘酊、70%酒精棉球。3、器材:耳夹子、听诊器、体温计、病历夹、病历表、保定绳。(三)方法和步骤1、望诊:望诊的方法、步骤、内容及注意事项与牛的相图3-2马眼部检査法近。(1)望全身:内容包括精神、形体、被毛及动态。特殊之处是健康马属动物喜长时间站立,昂头不动,轮歇后蹄,形态自然。有时卧地,人ー接近即行站立,一旦患病则可表现出各种不同的姿势,或运步变形,或起卧打滚,或卧地不起。(2)望局部:内容包括观察眼、耳、鼻、口唇、呼吸、
18饮食、躯干、四肢、二阴、粪尿等。特别之处是察眼色的方图3-3检査马ロ色方法法。检查时,术者左手握住笼头,右手食指掀起上眼睑,拇指拨开下眼睑,眼结膜和瞬膜即可露出。(3)察口色:①方法:检查者站于患畜头部的左侧方,右手抓住笼头,左手食指和中指拨开上下嘴角,即可看到唇、口角、排齿的颜色,然后将这两指从口角伸入口腔感觉其干湿温凉,再将二指上下ー撑,ロ即行张开,便可看到舌色、舌苔、舌形及卧蚕,最后再将舌拉出口外,仔细观察舌苔、舌体、舌面及卧蚕等部图コ”,舌体分应脏腑图位的细微变化。②部位:主要看唇、舌、卧蚕和排齿,而以舌为主。按《元亨疗马集•脉色论》记载,不同部位应不同脏腑,即“舌色应心,唇色应脾,金关应肝,玉户应肺,排齿应肾,口角应于三焦”。在察舌时,又有舌尖应心与小肠,舌中应脾胃,舌根应肾与膀胱,舌左侧应肝胆,舌右侧应肺与大肠的方法。③表现:正常口色、有病U色(颜色、舌苔、口津、舌形)所阐示的内容、意义同牛。2、闻诊:同样包括闻声音和嗅气味两个方面。(1)闻声音:包括叫声、呼吸音、咳嗽声、咀嚼及肠音等。特殊之处是马属动物肠音听诊在诊断意义上较牛为重要。听诊时主要判定其频率、性质、强度和持续时间,正常小肠音如流水声或含漱音,每分钟8〜12次,大肠音尤如雷鸣或远炮声,每分钟4〜6次。(2)嗅气味:包括ロ气、鼻气、粪、尿等。马属动物的尿液有一定的刺鼻臭味,比牛尿气味浓烈。3、问诊问诊的内容及方式与牛问诊相同。主要是采取有目的地诱导性方法进行,避免直接地、生硬地、单纯性地询问,应根据具体情况灵活掌握,有目的、有重点地问,如结合农业季节询问病畜的使役情况,饲喂草料的种类及质、量,公畜询问配种是否过度,母畜问胎产等情况。4、切诊:同样包括切脉和触诊两部分(1)切脉:①部位及方法:冋れ注”エバ、人图3-5马颌外动脉诊法诊脉的部位中兽医对马的诊脉部位,传统上主要是双凫脉(颈础部的颈总动脉)。双凫脉左分三部,右列三关,分应脏腑。在左侧胸颈交界处上方一、二指处按上无名指为下部、再距一指按上中指为中部,再隔一指按上食指为上部,这是左侧三部。右侧三关,为风关、气关、命关,与左侧三部,上部、中部、下部的部位是相对称的(其左上部应心和小肠,左中部应肝和胆,左下部应肾和膀胱;右风关应肺和大肠,右气关应脾和胃,右命关应命门和三焦)。但在临床实践中常因双凫脉位置较深,脉管滑动,特别是较肥壮的马,按脉常较困难。目前大多数人主张,诊脉以选择浅表动脉为宜,马诊颌外动脉,其部位在左右下颌支后下缘血管切迹处。诊脉的方法诊脉时须待病畜站立宁静,呼吸平顺及周围环境清静时进行。诊双凫脉时,
19诊者站在病畜侧方,一手扶住髻甲部,另一手食指、中指、无名指,应根据家畜体格大小,放置于三部或三关的适当位置上,然后采取不同的指カ体察相应脏腑脉象的区别。诊完ー侧,再诊另ー侧。诊颌外动脉时,医者站在马头ー侧,一手握住笼头,另一手拇指置于下颌骨外侧,用食指、中指、无名指三指伸入下颌支内侧按诊颌外动脉,但不要太紧,三指宜稍疏散,先下中指感到脉管跳动再下食指、无名指,用程度不同的指力探脉。诊脉时常用三种指力,即浮取、中取、沉取。轻用カ,按在皮肤,名浮取(举);不轻不重中等度用カ,按于肌肉,名中取(寻);重用カ按于筋骨,名沉取(按)。浮、中、沉三种指力的取法,称为“三部九候”。另外,手指还要加以不同的指カ前后推寻,以感觉脉搏幅度的大小、流利的程度,并以自己的呼吸数来衡量脉搏的快慢程度等,对脉象得出・个完整的概念。前人把诊脉的指法综合归纳为定息、浮、中、沉取及举、按、寻。定息以诊迟、数,举按以诊浮、沉,推寻以诊洪、微、细、大,持久以诊滑、涩、紧、弦。②表现:同牛。(2)触诊:除牛角温、痛胃触诊马属动物不具备之外,其它内容同牛基本相似,特别之处是马属动物的宜肠按压破结。(四)观察结果将“四诊”所得资料,按辨证要求记录于病历表内。(五)分析讨论1、中兽医的诊断特点是什么?2、分析诊察资料与疾病的关系?三、猪病的诊法(-)目的与要求通过本实习掌握猪病诊断的一般程序,学会和掌握对猪病的具体诊法。(-)实习准备1、动物:猪2头。2、药物:5%碘的、70%酒精棉球。3、器材:猪保定台、保定绳、体温计、开口器、阴道开腌器、听诊器、病历夹、病历表。(=)方法和步骤:1、望诊:望诊的内容、步骤与牛相近。(1)望全身:猪在正常情况下,性情活泼,不时拱地,被毛光润,鼻盘湿润,目光明亮有神,行走时尾巴卷曲并不时摆动,贪食,食后多睡卧,一旦患病,多表现精神不振,呆立一隅,或伏卧不起,行走时无精打采。(2)望局部:包括眼、耳、鼻、口唇、呼吸、饮食、躯干、四肢、二阴、粪尿等。望局部的总原则是先易后难。重点看其眼睛有否眼屎,用右手打开上下眼睑,观察结膜色泽变
20化,注意鼻盘的活动和湿润、干燥情况,这在猪病诊断上意义重大。用开腔器打开阴道,看其分泌物和色泽变化,用手将肛门轻轻打开,看其直肠粘膜色泽变化。最后由畜主挟持猪背双手持其两前肢,医者用开口器打开口腔看其色泽、舌苔、口津、舌形的变化,正常口色为桃红色,病色、病苔表现与牛、马相同。由于猪是杂食兽,舌苔易被食物污染而产生“染苔”,临证时注意鉴别,防止误诊。2、闻诊:听诊主要是听其叫声、咳喘声、空嚼声、心音、肺部呼吸音、胃肠音等;嗅诊主要是嗅其ロ气、鼻气、粪尿气味等。正常猪呼吸平和,无咳喘声,拱地时有一定的吭吭声,采食时口中发出洪亮的拔打声和咀嚼声,心音均匀有力,口鼻无异味。3、问诊:内容、方式、原则同牛问诊相近,总得说来,要有的放矢,灵活掌握,一般主要问明饮食欲情况,饲养管理(包括饲料种类、来源、品质、调制及饲喂方法等),发病经过,治疗经过,特别应注意问清周围猪群的发病情况,有无和病猪接触过,有无进行过疫苗接种,结合检查再询问咳嗽、粪尿、配种、胎衣,以及有无接触过有毒物质等。4、切诊:包括切脉和触诊(1)切脉:猪一般以切股内动脉为主,配合听诊心音节律,相互合参,作为猪的脉诊依据,切脉时,先应通过搔痒等方法使患猪安静下来,然后诊者蹲于患猪側,在膝关节上部沿腹壁伸向股内侧正中部,用食指、中指、无名指三指触之并轻轻移动,触到脉象为度,进ー步诊察体会脉搏的性状。(2)触诊:主要包括触摸凉热、肿胀及腹诊等内容。①凉热:主要摸皮温、耳温、鼻温、四肢温度,以感知患猪体温的高低,在实际诊断过程中,常常配合体温计测定直肠温度,作为参考依据。如耳根发热,耳尖发凉,常为发热较重,全耳较热为热证,全耳较凉为寒证,耳部时热时凉为半表半里证。全耳冰冷常为危症。四肢发热为热证,四肢较冷常为寒证,四肢冰冷常为危症。皮温较高常为热证,皮温较凉常为寒证,皮温不均常为半表半里证。②肿胀:触摸体表有无肿块,及病灶的性质、性状,大小及敏感度等,从中判定疾病的寒热虚实。③腹诊:主要是感知腹部皮肤的紧张度、敏感性及腹腔内部的状态,如按压或叩打时患猪躲避或拒按,则多为腹壁炎症;如肚腹硬如鼓,常为气胀或食肿,如腹内有硬块,常为便秘;压腹还可感知胎儿情况。(四)观察结果将四诊所得资料,ーー记录,并进行分析综合。(五)分析讨论中兽医对猪病的诊断方法和特点。
21四、骆驼病的诊法(-)目的与要求通过本实习,掌握骆驼病的诊察方法,了解骆驼病的症状特点及其与疾病的关系。(-)实习准备1、动物:骆驼2峰2、药物:70%酒精棉球、来苏儿3、器材:保定绳、面盆、毛巾、听诊器、体温计、病历夹、病历表。(三)方法和步骤1、望诊:望诊的方法、步骤、内容及注意事项与牛相近。(1)望全身:内容包括精神、形体、被毛及动态。应着重对驼病诊断有特殊意义的精神、驼峰和被毛的检査。健康驼体幅宽大壮实,骨骼粗大而结实匀称,肌肉发达,皮肤较厚,被毛长密,油润光泽,头部大而鼻梁隆起,颈项弯曲,粗而长,背腰短而宽,胸宽而深,四肢粗壮有力,蹄大而圆、耳灵眼活,感觉敏锐,尾巴运动轻快,行动坐卧平稳自然,驼峰宜立,姿势优美,威武雄壮。若骆驼精神萎靡不振,或躁动不安,摇头晃脑,不停呻吟,驼峰倒垂者均为病象。如病驼双峰倒垂,精神萎靡、毛焦多汗、卧多立少,多为劳役之症。若夏季见皮肤溃烂、瘙痒、变粗糙或结痂多为被婢蜻咬叮所致。(2)望局部:包括眼、鼻、耳、口唇、呼吸、饮食、反刍、躯干、四肢、二阴等。应着重对眼睛、饮食、反刍、尿粪检査。驼的眼睛检查同马,驼的呼吸5~15次/分,牧放群驼,一般白天采食,食欲旺盛,十分贪食,夜间反刍(主要集中在夜间12点以后坐卧进行),反刍声音轻脆有力,节律整齐,持续ー个小时左右,每块食团返回口中咀嚼40〜60次。如反刍迟缓,或次数减少,多为脾胃不和、宿草不转、百叶干等症;反刍停止,常为病重的表现,反刍逐渐恢复,咀嚼由少到多,均为病情缓解之征象,预后良好。骆驼尿液多为清亮透明,或呈淡黄色,气味不太显著,但受饲养、饲料的影响,如饮碱性水后,则尿多变混浊,采食灯束草、茨蓬草时则尿呈靛蓝色,牧民称之为“尿靛”。驼粪呈鸽蛋大小,外表光亮,黑油油的,比较干硬,落地也不破碎。若病驼身瘦毛焦、反刍减少、粪便干燥者、多为百叶干。(3)察口色:察口色时,先将骆驼跪卧,然后由助手牵定鼻棍,固定头部,检査者在驼左侧用左手食、中指由口角犬齿后边伸入口腔,首先应感觉口内温度和湿度,再用两指上下ー撑,将口张开,以观察口腔、颊、顎、舌的形态,粘膜颜色、光泽、润滑度等,最后可将舌体拉出口外(较为困难,因舌系带较短)仔细检查舌体、舌苔及卧蚕、仰池的情况,检查舌苔时除注意色泽外,尚应注意舌苔的厚腻、有无裂纹等。2、闻诊包括听声音和嗅气味两个方面(1)听声音:主要内容为听叫声、呼吸声、咳嗽、咀嚼和磨牙声、呻吟声、暧气、肠音和瘤胃蠕动音。重点在咀嚼、磨牙、呻吟、瘤胃蠕动及喷鼻等特有声音的鉴别上。(2)嗅气味:主要内容为ロ气、鼻气、脓味、帯下臭、粪便、尿液等内容。3、问诊:问诊的内容与方法和其他家畜相同,不再赘述,总之问诊一般无固定的形式,
22但必须遵循有的放矢的原则,抓住繭点和关键问题深入了解,而措词则应根据具体病情有目的地灵活运用,同时谈话态度要和蔼,语言要通俗易懂,注意启发诱导,要有责任感和同情心以取得畜主的积极配合,这样有助于疾病的诊断和治疗。4、切诊:包括切脉与触诊两个方面。(1)切脉:驼的切脉部位在第五尾椎腹面的尾动脉上,切脉时应先令骆驼卧于地面,然后用左手将尾根握住,轻轻提起,右手食、中、无名指三指仔细按压。正常时驼一息四至。(2)触诊:通过触、摸、按来探察骆驼有关部位的冷热温凉,以及有无肿胀及肿胀部的软硬、大小、形状、温度和敏感度等。为疾病诊断提供有关资料和依据。具体检查方法与牛、马相同。(四)观察结果将四诊所收集到的资料,逐项填写在病历表内,并进行分析、综合。(五)分析讨论讨论骆驼病的诊察特点,并分析观察结果与疾病的关系。第四章中药与方剂ー、药用植物标本采集及蜡叶标本制作(-)目的了解如何根据各种植物的特性采集较理想的标本,掌握蜡叶标本的制作方法。(二)准备1.药物氯化汞,95%乙醇,胶水。2.器材掘铲,丁字镐,枝剪,高枝剪,采集筒,塑料袋,种子袋,标本夹,线带或帆布袋,记录纸,小号牌,工作日记,铅笔,标本签,草纸,标本台纸(42X29cm)。(三)方法和步骤1.采集(1)采集具有代表性的完整的标本根、茎、叶、花、果等力求齐全,并突出药用部分;生长发育正常、无病虫害或损伤的植株,其大小以不超过ー张台纸的长度为宜:大的植株可适当修剪。切勿任意以手折断,必要时可酌情将茎弯折:小的草本植物一般采全株。过小者,可用纸包好,连纸包ー起压制。对于过大植株,为了说明全株特征,可酌情按根、茎、叶、花、果等分别采集;有些水生植物,全株浮生水面,根生水中,应设法一并采集;寄生植物应同时采集寄主;雌、雄异株植物,应注意将两株采齐。有变异的植株,也要注意多采几株;还要根据花果期在不同时期进行采集。每采集一种植物,应尽快地放入采集箱或塑料袋内,以免叶、花萎缩卷曲,影响标本质量。每ー种标本通常采3〜5份,以供鉴定、交换、保存等用。(2)做好标本编号和采集记录每采一件标本,应用ー小硬纸牌,以铅笔写上编号和
23采集日期,系在标本上。同一植株的若干部分,只能编同一号码。采集记录的内容包括植物名称、植物地方名、采集地点、生态环境、性状、花果及用途等,以助了解药物情况。1.压制(1)初步整理压制前可适当整形,修去多余的枝叶、花果,洗去根部的泥土。某些肉质植物如肉质茎、块根、块茎等不易压干,可先放入开水中温烫30s后再压制,或切成两半后再压。(2)压制过程将标本夹放平,上置3〜4层或7〜8层草纸,草纸层的多少,视标本含水量的多寡及吸水纸的质量而定。然后将标本平整地摊放在草纸上,切不可互相重叠覆盖,勿让叶子卷曲;正、反面的叶子各压ー些,花、果按其野生状态展放。体积小的标本,不应折叠;较大的超过草纸面积的可适当折叠成“V”或"N”形。将标本放在干燥草纸上,再盖上一层干草纸。以后每隔ー层草纸放ー份标本,这样边整理、边压制,当标本压到ー定高度后,再盖上另ー块标本夹。用绳带捆扎,松紧适宜。ー一般新鲜植物,由于含水量较大,易致发霉变质,因此,必须每日更换草纸1〜2次,以后视标本的干燥情况,每1〜2天换一次,待标本的水分慢慢吸干后,可将标本逐步捆紧ー些,并可置于阳光下照晒,加快水分蒸发,一般经7〜10天后就不需要再换纸。如果是水生的或肉质多浆的植物,应勤换干草纸,压制时间也要更长一些。每次换下的草纸,必须及时晒干或烘干,以备再用。在换纸过程中,若有叶、花、果脱落时,应随时将脱落部分装入纸袋内,并记上采集号,附于该份标本,切勿丢弃。2.标本消毒为防止标本发霉、虫蛀而变质,上台纸前,应进行消毒。(1)消毒液配制取1g氯化汞,置于95%工业酒精1,000ml内,使其成0.1%溶液,摇动使其溶解均匀。(2)消毒法将标本在氯化汞乙醇液浸湿,取出,待乙瀨挥发后,即可上台纸。3.上台纸(1)确定位置标本平放于台纸中央,较大或较长的标本可以倾斜放置,并注意右下角和左上角留出适当空间,以便粘贴标签。(2)粘贴标本在标本反面用毛笔涂上一层胶水,将它粘贴ア台纸的适当位置上。(3)加固整理贴好的标本夹在旧报纸中,并用重物压平。待胶水干后,再用细棉线将标本的根、枝、果等处钉牢。标本掉落果实种子等部分,放入种子袋,钉在台纸上。(4)贴标签台纸的左上角贴上采集记录纸,右下角贴上鉴定植物的标签。4.鉴定标本上好台纸后,即可鉴定。一般可根据全国和地方植物志,鉴定植物的学名。鉴定学名后,将该药用植物的中文名称、常见别名、药材名、药用部分、功能、主治、采集地点、日期、采集者、鉴定人等内容填写于标签上。5.保存已制成的蜡叶标本,应保存在干燥密闭的标本橱内,同时必须放入杀虫剂如樟脑之类,以便长期保存,供学习研究用。(四)观察结果将自己制作的标本检识一遍,并与他人互相核对。(五)分析讨论采集具有代表性的完整的标本,应有哪些要求,并分析其原理所在。
24二、原色药用植物标本制作(-)目的了解原色药用植物标本的制作原理,并掌握其制作方法。(-)准备1.药物硫酸铜,醋酸铜,亚硫酸,氯化铜,甘油,冰醋酸,福尔马林,硼酸等。2.器材标本缸,陶瓷盆,塑料桶(盆),量杯或量筒(500ml或1000ml)等。(三)方法和步骤1.颜色固定(1)绿色的固定方法较多,常用下列3法。①5%硫酸铜溶液浸渍将新鲜标本放在5%硫酸铜溶液中浸渍1〜2周,待标本变为深绿色或褐色时,取出用水漂洗,然后放在2〜3%亚硫酸溶液中进行漂白净化,如果标本在硫酸铜浸渍过久,颜色变褐时,可在亚硫酸液中加少量1〜2%硫酸或盐酸,待标本返绿后取出用水洗净。②温热醋酸铜处理(快速着绿法)标本质地较硬或表面蜡质多或绒毛多者,常用此法。处理液:先将醋酸铜18g,冰醋酸50ml,加水50ml搅拌成饱和溶液,再将此饱和液加水3〜4倍稀释即成处理液。处理法:将处理液加热至85℃时,放入标本,液温控制在82〜83℃,lOmin左右,待标本变黄褐色再转绿时取出用清水漂洗。标本加热时间不宜过长,以防破烂;处理过程中应经常翻动标本,以利均匀着绿。在处理过程中应避免与铁器接触,否则影响标本的色彩。③氯化铜固定液处理淡绿色嫩薄的中药标本,适用此法。固定液:氯化铜10g,冰醋酸2.5ml,甘油2.5ml,福尔马林5ml,5%乙醇90ml。处理:将标本加入氯化铜固定液中浸渍3〜7天,取出用水漂洗。如浸渍过的标本过于透明,可能是酒精用量较多所致,应适当减少酒精用量。(2)红色的固定①福尔马林•硼酸固定红色果实标本如枸杞子、颠茄等常用此法。固定液:福尔马林10ml、硼酸0.8g,加水1000ml。处理:将标本置于固定液内浸渍1〜3天,一般皮厚标本浸渍时间长些,皮薄的则短些。果实由红变褐色时,取出洗净,再用2〜3%亚硫酸漂白净化,清水洗净。15%硫酸铜固定绿色标本带有红色果实或花的植株,常用此法。固定液:硫酸铜50g,加水1000ml。处理:将标本放入固定液内浸渍1〜2周,待果实由红变淡褐色时取出洗净,用3%亚硫酸漂白净化,清水洗净。(3)黄色的固定黄绿色或黄色的桔类果实和黄色的根茎,常用此法。固定液:5%硫酸铜溶液。处理:将标本放入固定液内浸渍1〜5天,取出洗净,再用3%亚硫酸液漂白净化,清水洗净。(4)紫色的固定紫色素活动性强,不易固定,可试用下列固定液。
25固定液:1〜3%甲醛溶液,加3%食盐溶液(或2%硼酸溶液)。处理:将标本放入固定液,浸渍2〜3周后取出清水洗净。1.标本上台纸保存将经颜色固定的标本,取出洗净后置于标本夹内,进行压制。压制后,消毒、上台纸、鉴定等与蜡叶标本的制作程序和方法相同。2.标本浸渍保存①淀粉、糖含量较高的标本,在固定后放入亚硫酸保存液前,可先用清水浸泡1〜3天,每天换水1〜2次,可洗去部分淀粉、糖分,有利于保存,并节约药液。②经颜色固定的标本,取出后洗净,视体积大小,分别放入不同规格的标本瓶或标本缸中,加入保存液。③标本应完全浸没在保存液中,露出液面部分容易发霉变质。标本不宜放得过多,以免受损。④为便于观看,可将标本用白色尼龙线缚在玻片或棒上。⑤及时更换保存液。标本色彩固定后,颜色较深,最初保存时有一个退色复原返绿的过程,待标本原色复原后,及时更换浓度较低的亚硫酸保存液。长期保存时,宜用低浓度的保存液,因低浓度保存液对标本组织和色素的影响较小。但容易发霉,可加0.1〜0.2%山梨醇或苯甲酸钠,以作防腐剂。@标本在保存过程中色素、淀粉、糖等内含物会逐渐渗出,使保存液浑浊发黄,对色泽有不良影响,应及时更换保存液。⑦标本保存一段时间后,亚硫酸将会挥发,使其浓度降低,影响保存效果,故密封前最好更换一次保存液。⑧浸渍标本,应密封置于阴凉处保存,避免阳光照肘,以防颜色消退。(3)封口取聚乙烯醇缩丁醛1份,加95%酒精10份,隔水加温至75ヒ搅拌成液体,装瓶密封备用。用干抹布擦干标本缸及其盖边的水分,用毛笔蘸聚乙烯醇缩丁醛粘合剂涂在瓶盖边,连涂2次,速将盖子盖上,再在瓶口与盖之间涂上一层粘合剂即可。(四)观察结果1.观察颜色固定的效果,比较各种固定法的优缺点。2.观察台纸保存和浸渍保存的效果,比较其优缺点。(五)分析讨论原色植物标本是指制成的标本,保持植物原有的色彩。植物的叶、花、果的色彩主要是由其细胞液中的花色素貳和内含物所决定的。叶的绿色是由于叶绿素分子中央有镁原子占据,镁原子活泼,容易被分离出来,成为植物黑素,使绿色变为褐色。假如将另一种金属原子如铜原子引入植物黑色核心,使其恢复有机金属化合状态,则可获得与叶绿素一样的绿色物质,这种物质不易分解破坏,难溶于水。经过70%酒精及福尔马林溶液处理的植物标本,可长久保持绿色。根据以上原理,分析讨论各固定液和保存液的道理所在,并研究设计・个固定液处方。三、常用中药炮制方法(-)目的1.了解炮制的意义。
261.掌握炒、炙、煨、燉、制霜和水飞等常用炮制方法。(二)准备1.药物决明子、慧啓仁、王不留行、山楂、干姜、白术、地榆、鸡内金、大黄、威灵仙、延胡索、磁石、牡蛎、甘草、生姜、泽泻、食盐、诃子、续随子、甘遂、滑石、棕梱、蜂蜜、黄酒、面粉、醋等。2.器材铁锅,铲,铁丝筛,炉,燃料,笼屉,乳钵等。(三)方法与步骤1.炒分清炒和辅料炒两类。(1)清炒依炒的程度分①炒黄炒决明子:取决明子,用文火炒至微有爆裂声并有香气时,取出放凉:炒慧苗:仁:取净慈葭仁,用文火炒至微黄色、微有香气时取出放凉;炒王不留行:取王不留行,文火炒至爆花。②炒焦焦山楂:取净山楂,用强火炒至外表焦褐色,内部焦黄色,取出放凉:焦大黄:取大黄片入锅炒,初冒黄烟,后冒绿烟,最后见冒灰蓝烟时急取放凉。③炒炭炮姜:取干姜片或丁块,置锅内,炒至发泡,外表焦黑色取出放凉;地榆炭:取地榆片入锅,炒成焦黑为止。(2)辅料炒①款炒称取白术500g,数皮50g,先将锅烧热,撒入麦款,待冒烟时投入白术片,不断翻动,炒至白术呈黄褐色取出,筛去麦数。②沙炒取筛去粗粒和细粉的中粗河沙,用清水洗净泥土,干燥置锅内加热,加入适量的植物油(约为砂量的1〜2%),然后炒取下列两药。炮内金:取洁净干燥的鸡内金,分散投入炒至滑利容易翻动的沙中,不断翻动,至发泡卷曲,取出筛去沙放凉。2.炙与炒相似,但常加药物炮炙。(1)酒炙称取大黄片500g,以黄酒50ml喷淋拌匀,稍闷,用文火微炒,至色泽变深时,取出放凉。(2)醋炙取净延胡索500g,加醋150nli和适量水,以平药面为宜,用文火共煮至透心、水干时取出,切片晒干,或晒干粉碎。(3)盐炙取泽泻片500g,食盐25g化成盐水,喷洒拌匀,闷润,待盐水被吸尽后,用文火炒至微黄色,取出放凉。(4)姜炙称取竹茹250g,生姜50g,加水捣成汁,拌匀喷洒在竹茹上,用文火微炒至黄色,取出阴干。(5)蜜炙首先炼蜜,将蜂蜜置锅内,加热徐徐沸腾后,改用文火,保持微沸,并除去泡沫及上浮蜡质。然后用罗筛或纱布滤去死蜂和杂质,再倾入锅内,炼至沸腾,起鱼眼泡。用手捻之较生蜜粘性略强,即迅速出锅。然后蜜炙甘草。取甘草片500g,炼蜜150g,加少许开水稀释,拌匀,稍闷,用文火烧炒至老黄色,不粘手时,取出放凉,及时收贮。3.煨常用面裏煨和湿纸裹煨。(1)面裹煨取净诃子,用湿面逐个包裹,晒至半干,投入锅内已炒热的细沙中。不
27断翻动,至面皮焦黑为度,取出。筛去沙子,剥去面皮,轧裂去核。(2)湿纸裹煨在煤炉上置ー铁丝网,在网上放稻壳,点燃,待无烟、无火焰后,将湿纸包裹的甘遂块,埋于稻壳火灰中,煨至纸呈黑色,药材微黄色为度,取出去纸,放凉。1.燉常用明熾和扣锅燉(1)明煨取净牡蛎,置炉火上,煨至红透,冷后呈灰白色,碾碎或碾粉。(2)扣锅煨取净棕樋,置锅内。其上扣ー较小的锅,两锅结合处垫数层纸,并用黄泥封固,锅上压以重物。用武火加热煨透,冷后取出,即为棕櫚炭。2.燉淬取净自然铜,置耐火容器内,于炉中用武火煨至红透,立即倒入醋内,淬酥,反复熾淬至酥脆为度。3.制霜取净续随子,搓去种皮,碾为泥状,用布包严,置笼屉内蒸热,压榨去油,如此反复操作,至药物不再粘结成饼为度,再碾成粉末即得。少量者,将药碾碎,用粗纸包裹,反复压榨去油。4.水飞取整滑石,洗净,浸泡后,置乳钵内,加适量清水研磨成糊状,然后加多量清水搅拌,倾出混悬液。下沉的粗粉继续研磨。如此反复多次,直至手捻细腻为止。弃去杂质,将前后倾出的混悬液静置后,倾去上清液,干燥,再研细即得。四、草乌炮制后的成分变化(-)目的通过草乌炮制前后生物碱的薄层分析,了解乌头碱含量变化,说明炮制的作用。(-)准备1.药物生草乌、制草乌、乙酸、氨试液、无水乙醇、碱性氧化铝。2.器材天平,铁研船,分样筛,干燥器,卧式层析缸,具塞三角烧瓶,玻璃蒸发皿,磁珀烟,酒精灯,微量吸管,量筒,玻璃棒,胶布,药匙。(三)方法和步骤1.草乌粗粉的制备生草乌和制草乌分别粉碎,过20目筛,即为草乌粗粉。2.供试液的制备称取生草乌和制草乌粗粉各20g,分别置于250ml具三角烧瓶中,加乙醛100ml振摇lOmin,再加氨试液10ml,振摇30min,放置1〜2h,分取乙醛层于玻璃蒸发皿中蒸干,点样前加无水乙醇2nd,使之溶解,即得供试液。3.碱性氧化铝软板的制作见本章实验十七。4.点样用两支微量吸管分别吸取生草乌及制草乌供试液,在距离薄层下端2.5cm的一条横线上的两点(两点间的距离为2cm)轻轻接触吸附剂,每次加样品供试液后,原点扩散直径不超过2〜3mll1,如果一次加样,样品量不够,可在溶剂挥发以后重复滴加(每点供试液约20u1)。5.展开将点加样品液挥干溶剂后的软板,放入有乙醛展开剂的卧式层析缸中,采用倾斜上行层离法展开,使玻璃板点有样品的一端浸入展开剂0.5cm处(切勿使样点浸入展开剂中),加盖密闭展开。当展开至3/4高度后,取出玻璃板置于空气中自然干燥。
281.显色在磁组期中加适量碘片,于酒精灯上加热,当出现较多碘蒸气时,迅即将用期放入干燥器中。将展开后的挥干软板,平放入有碘蒸气的干燥器中熏蒸显色。(四)观察结果将实验结果代入下公式中,求出Rf值:Rf=展开后斑点中心与起始线的距离/展开剂前沿与起始线的距离根据文献记载,氧化铝软板以乙醛为展开剂,乌头碱的Rf值为0.59;苯甲酰乌头碱的Rf值为0.25;乌头原碱的Rf值为0.02。(五)分析讨论比较软板上色点Rf值的不同,说明草乌炮制后的变化。五、中药十八反的动物实验(-)目的通过本实验观察反药对动物的影响。(二)准备1.动物健康家兔24只,或山羊12只。2.药物大戟、芫花、甘遂、海藻、甘草、白芷、滑石、牵牛、大黄、续随子、官桂等。上述药物剂量如下;兔口服剂量每味药用6g,山羊用15g。3.器材铝锅,纱布,量筒,开口器,胶管,金属注射器,电炉,体温表,听诊器,粪、尿、血常规检查的试剂和器材等。(三)方法和步骤1.实验动物分组:猪膏散加味组、双甘散组、俱战草方组和对照组。每组用兔6只,或山羊3只。2.试前检查称体重,测体温、吸吸、脉搏(心率),观察精神、食欲、二便、山羊反刍情况,听诊瘤胃蠕动波长持续时间和蠕动次数,结合试前试后比较山羊口色、脉象的变化。3.分组分别给动物投服中药煎剂。24h后观察试验结果。4.试验后观察3~?天,将动物处死,作病理解剖,观察心、肝、肾、膀胱等的病理变化,以及山羊瓣胃内容物的变化。(四)观察结果每组将观察记录表格汇总,各组之间的结果,统ー供全班使用。教师指定必耍的参考文献,指导同学写出试验报告。注1.猪膏散(《元亨疗马集》)加味方滑石、牵牛子、甘草、大黄、官桂、甘遂、大戟、续随子、芫花、白芷、海藻(包括俱战草方和双甘散两个方).
291.俱战草方(兽医方)大戟、芫花、甘遂、海藻、甘草。2.双甘散(人医方)甘遂、甘草。中药十八反实验临床观察(一)组别畜别性别时间体温呼吸脉搏精神食欲二便猪膏散加味兔投药!iij投药后1天投药后7天山羊投药前投药后1天投药后7天双甘散兔投药前投药后1天投药后7天羊投药前投药后1天投药后7天俱战草方兔投药前投药后1天投药后7天羊投药前投药后1天投药后7天对照兔投药前投药后1天投药后7天羊投药前投药后1天投药后7天中药十八反实验临床观察(二)组畜时投药投药方ロ脉瘤胃蠕动(次蠕动波嚼叫(次/病理别别间量法色象/2min)(s)ロ)解剖
30猪膏散加味兔试前试后1天试后7天羊试前试后1天试后7天双甘散兔试前试后1天试后7天羊试前试后1天试后7天m酸草.〃兔试前试后1天试后7天羊试前试后1天试后7天対昭兔一I1IJX天117—后后试试试羊前天天后后试试试中药十八反实验临床检验结果组别畜别时I'"]粪隐血尿蛋白血红蛋白血沉红细胞压积备注猪膏散加昧兔试前试后1天试后7天羊试前试后1天试后7天双甘散兔1H天天17i后后试试试羊ユリーエ弋ュ冃ヲラ17后后试试试俱战草方兔前天天117—后后试试试羊前天天17后后试试试对昭ハ、、兔试前试后1天试后7天试前试后1天试后7天
31(五)分析讨论根据实验结果,参考有关文献,作出恰当的结论。六、中药十九畏的动物实验(一)目的通过本实验观察相畏药物的不同配伍对家兔的毒副作用。(二)准备1.动物健康兔18只。2.药物硫黄、朴硝、牙硝、三棱、巴豆、牵牛子、丁香、郁金、人参(或党参代替)、五灵脂、官桂、赤石脂。上述药物实验用量如下:牵牛、丁香、郁金、三棱、人参(党参剂量加倍)、五灵脂、官桂、赤石脂等8味药ロ服10g。其它4味药,朴硝、芒硝用20g,巴豆、硫黄为5g。3.器材体温表,听诊器,粪、尿、血常规检查的有关试剂和器材,压积管,电泳仪,分光光度计等。(三)方法和步骤1.实验分组共分6组,每组3种配伍。①巴豆、牵牛、巴豆+牵牛②硫黄、朴硝、硫黄+朴硝③牙硝、三棱、牙硝+三棱④丁香、郁金、丁香+郁金⑤人参、五灵脂、人参+五灵脂⑥官桂、赤石脂、官桂+赤石脂2.试前试后对照,观测项目共9个。体温、呼吸、脉搏、粪隐血、尿蛋白、血红蛋白、血沉、红细胞压积,血清蛋白区带含量变化,试前、试后24h,第7天连测3次,结合观察临床,7天后处死,作病理解剖。(四)观察结果将实验结果记录于下表中。中药十九畏对兔牛理指标的影响配体呼脉血红蛋血组别伍温吸搏臼积沉试试前后试试前后试试前后试试前后试试前后试试前I|;试试前后
32中药十九畏对兔血清蛋白的影响组别テ伍情况_清蛋白球蛋白a1a2BY试后试前试后试前试后ー试前ー试后试前试后(五)分析讨论将上述实验结果进行整理,结合有关文献,进行讨论分析,得出恰当的结论。七、接骨膏的制备(-)目的掌握以黄丹为基质的接骨膏的制备方法。(二)准备1.药物麻油0.5kg,黄丹200g,当归、川茸、梔子、刘寄奴、秦无、杜仲、透骨草、木香、燉自然铜、补骨脂、儿茶各20g,乳香、没药、川牛膝各15g,紫草、骨碎补、血竭各30g。2.器材火炉,铁锅,铅丝勺,面盆,玻璃棒。(三)方法和步骤1.炸料先将粗料碾碎(乳香、没药和血竭除外)置锅内,加入植物油浸泡,在不超过240で下炸至药枯。炸料开始时,火力可稍大,待油沸腾后再适当减小火力。以防油溢出锅外,加热中应经常搅拌翻动,使药料受热均匀,直至熬枯(药料外部焦褐而内里深黄)为止。然后用铅丝勺捞去药渣,并用细筛过滤。2.炼油将分离药渣后的药油,继续在锅内加热熬炼至嫩老适度为止。其目的是使油在高温条件下氧化、聚合、增稠,以适合制膏要求。炼油操作是制备膏药的关键。炼油的程度通常从油烟、油花的变化作初步判断。然后再作“滴水成珠”的检査。这三方面的判断标准是:(1)油烟炼油开始油烟为青色,随着继续加热,逐渐转黑而浓,进而变为白色浓烟(扬油时更明显),当看到白色浓烟时,表明炼油已接近完成,可适当减少火力,及时作滴水成珠的检查。(2)油花炼油开始沸腾时,油花多在锅壁附近,待油花向锅中央聚集时,表明炼油已接近完成。(3)滴水成珠用玻璃棒蘸药油少许滴于冷水中,如油珠扩散则证明“过嫩”,需继
33续加热:如油滴聚在水面不散开,说明炼油已经完成。1.下丹炼油完成以后,加入研为细末的乳香、没药和血竭。将油锅端离火源,趁热加入黄丹,黄丹应均匀撒布,并不停用玻璃棒(竹木小棒也可)顺着ー个方向搅拌,以防丹沉聚锅底,使油丹充分化合。黄丹加完后,应随时检查老嫩。其检查方法是取反应物少许滴入水中,数分钟后取出,以不粘手、撕能成丝且能折断者为老嫩适度。2.去火毒下丹成膏后,待膏药稍冷时以细流倾入盛有较多量冷水的盆中,并用木棍搅动,使膏药随水旋成带状以去“火毒”。待膏药冷却凝结,即可取出反复捏压(手应先浸水,以防膏药粘手难以洗脱)。去净内部水分,制成团块即可。(四)观察结果重点观察颜色、熔化温度和膏药的粘着力(五)分析讨论1.黑膏药制备的关键エ艺是什么?2.分析油丹化合后,其生成物的主要化学成分。ハ、膜剂、栓剂、颗粒与片剂的制作(-)目的掌握膜剂、栓剂、颗粒、片剂的制备エ艺。膜剂是ー种新剂型,它系将药物溶解或均匀分散在成膜材料配成的溶液中,制成薄膜状的药物制剂。栓剂系将药物与基质混合制成供塞入机体不同腔道的・种固体剂型。颗粒剂是ー种新剂型,它系将药物的细粉或提取物制成干燥的颗粒状制剂。片剂系将药物的细粉或提取物与赋形剂混合制成干燥的片状剂型。(二)准备1.药物膜剂:金银花100g、黄苓100g、连翘200g、聚乙烯醇(PVA)15g,甘油2g、乙醇适量栓剂:金银花、黄岑、连翘(与膜剂用量相同)吐温ー805ml,聚乙二醇(分子量600)70ml,聚乙二醇(分子量60000)25g,乙醇适量颗粒:制马钱子、延胡索干浸膏、丹参、当归、川茸、熾自然铜、血竭、三七各适量片剂:盐酸小槩磯500g,淀粉450g,蔗糖450g,乙醇(45%)250-300ml,硬脂酸镁14g2.器材膜剂:蒸锅,玻璃板1块,玻璃棒1个,胶皮圈(0.1mm厚)2个。栓剂:水浴锅,栓剂模型。颗粒:电炉,粉碎机,真空泵,粉碎机,药筛,三角烧瓶,冷凝管,抽滤瓶,比重瓶,温度计。片剂:药筛、压片机(三)方法和步骤1.膜剂(1)先将金银花、黄岑、连翘加水适量制成溶液1301n1。(2)取聚乙烯醇15g事先用80%乙醇浸泡24〜48h,用前用蒸储水将乙醇洗净,置于容器内,
34加上述溶液100ml,在水浴上加热至完全膨胀溶解,最后加甘油1g,待冷至适当稠度,分次放于玻璃板上,继用两端套有胶圈的玻璃棒向前推进溶液,制成薄膜,放于烘箱内蛾(60℃以下),然后于紫外灯下照射30min灭菌,封装备用。注意制膜温度不宜低于35℃,温度低易凝结。1.栓剂(1)按上述量分别称取金银花、黄苓、连翘,吐温ー80,水适量,制成溶液130ml。(2)取一容器将聚乙二醉在水浴上溶化,继将上述溶液加入聚乙二醉液中,搅拌均匀,适当降温,倒入栓剂模型中,冷却即得。2.颗粒剂(1)配料,按处方将上药炮制合格,称量配齐。将制马钱子,元胡干浸膏,血竭,三七4味单放。(2)将延胡索干浸膏、血竭、三七3味混合在ー起,共轧为细粉,过100目筛。再将制马钱子单独轧为细粉,过100目筛。然后将制马钱子粉用递加混合法与其它3味药粉混合均匀。(3)取红花、当归、川茸、丹参、自然铜共同粉碎成粗粉。采用闭路式水循环提取法煎煮2次。第1次加水8倍量,冷浸30nlin后煮沸2h;第2次加水6倍量,煎煮1.5h,滤取药液,把2次药液合并,再用高速离心机4500转/min,离心lOmin,取上清液,经减压低温(70℃左右)呈稠膏状(50℃测比重为1.20)。(4)混合,取马钱子等4味混合与浓缩稠膏搅匀,分成小块,采用真空干燥。(5)制粒,取上项干燥小块,用打粒机制成的均匀颗粒,分装备用。3.片剂取盐酸小案磴、淀粉及蔗糖以60目筛混合过筛2次,加45%乙醇湿润混拌,制成软材,先通过12目筛2次,再通过16目筛制粒,在60〜70°C干燥。干粒再通过16目筛,继之加入干淀粉5%(崩解剂)与硬脂酸镁充分混合后压片即得盐酸黄连素片。(四)观察结果1.膜剂掌握制膜厚度,制成的膜剂厚约0.1mm。2.栓剂制成的栓剂应有一定的硬度和韧性,引入体腔后经一定时间能液化,且液化时间愈快愈好,以聚乙二醇为基质的栓剂液化时间约为30〜40min。3.颗粒制成的颗粒色泽一致,均匀,全部能通过10目筛,通过20目筛小颗粒不得超过20%.4.片剂片剂应具有一定硬度。(五)分析讨论讨论总结中药膜剂、栓剂、颗粒、片剂的制作技术要点。九中药蜜丸剂的制备(-)目的1.了解蜜丸对原料和辅料的处理要求。2.掌握蜜丸的制备方法与操作要领。(二)准备1.药物:熟地,山萸肉,丹皮,山药,茯苓,泽泻,蜂蜜。2.器械:粉碎机,7号药筛,加热锅。(三)方法和步骤蜜丸的制备,甫点介绍六味地黄丸的制备过程。
351.原料的准备;取熟地160g,山萸肉80g,山药80g,丹皮60g(茯苓60g,泽泻60g,以上中药用粉碎机粉碎成细粉,过7号筛,混匀,备用。2.辅料的制备:取蜂蜜置锅中加热煮沸,蒸发除去部分水分,待温度达到105〜115.C时,过滤除去死蜂及沫,即得嫩蜜,嫩蜜含水量在17〜20%,密度为1.35左右,色泽无明显变化。3.蜜丸的制作:每100g药粉用嫩蜜约8〇〜110g,混匀,制丸块,搓丸条,制丸粒,每丸重9g,即得。(四)分析讨论1.制备蜜丸时,一般性药粉,燥性药粉,粘性药粉其用蜜量、炼蜜程度和药用蜜温度应怎样掌握?2.丸剂的常规质量检查都有那些?十双黄连注射液的制备(一)目的1.通过双黄连注射液的配制,掌握中药注射剂的制备过程及其操作注意事项。2.熟悉中药注射液的常规质量要求及其检查方法。(-)准备1.药物:金银花,黄苓,连翘,吐温ー80,注射用水。2.器械:中药提取分离装置。(三)方法和步骤以双黄连为例说明中药注射剂的制备过程。其中双黄连处方的组成为:金银花1000g,黄苓1000g,连翘2000g,吐温ー8010ml,注射用水加至4000ml。1.取连翘、黄苓加入8倍量注射用水,加热煮30min,再将双花加入煮30min,过滤,药渣加6倍量注射用水煮4〇〜50min,过滤,两次滤液合并浓缩至1000ml。2.浓缩液加乙醇处理两次,第1次醇含量70%,第2次醇含量80%,双层滤纸抽滤,滤液回收乙醇。3.用1%氢氧化钠调pH7〜7.5。加活性炭煮沸过漉,分装于盐水瓶中,放消毒锅内热处理一次,冷却后备用。4.分装时加注射用水至lg/ml,调pH6.5〜7,加吐温-80,灌封于20ml安瓶中,于115℃灭菌30min。5.双黄连注射剂的质量标准:(1)鉴别:a.取本品1ml,加三氯化铁试剂2滴,产生蓝绿色沉淀。b.取本品2ml,加裴林试液2ml,置水浴上加热,产生红棕色沉淀。(2)检查:pH6.5〜7,溶血试验、热原检查及过敏试验应符合药典标准。(四)分析讨论1.水醇法制备中药注射剂的依据是什么?还有哪些制备方法,各适用范围如何?2.中药注射剂制备中每步操作的目的是什么?有哪些注意事项?十ー、复方当归注射液的制备(-)目的通过复方当归注射液的制备,掌握中草药注射剂的生产流程。
36(二)准备1.药物当归、川茸、红花、吐温ー80,注射用水、酒精、盐酸、氢氧化钠、活性炭、汽油,曙红(伊红)溶液。2.器材电炉,冰箱,手提式消毒器,搪瓷面盆,铝锅、烧杯,量筒.,药物天平,玻璃棒,垂熔玻璃漏斗,滤球漏斗,布氏漏斗,抽滤瓶,贮液瓶,抽气泵,安甑(5ml),無切割器,酒精喷灯,喷射式安証洗涤器,烘箱,铝盘,安甑灌注器,双焰熔封灯,脚踏皮老虎,安甑固定木槽,伞棚式安甑检查灯,镜子,印泥,蜡纸,铁笔,钢板。(三)方法和步骤中药注射剂的工艺流程见下页图。L安甑的质量检査和处理(略)3.复方当归注射液的配制(1)配方当归250g川苛250g红花250g吐温ー8010ml注射用水适量制成1000ml
37[干热灭菌](2)制法①浸出取当归、川茸加蒸储水1000ml,加热,回流1〜2h后,蒸徳,收集蒸储液约500ml,加入0.5〜1%吐温,严封,100ヒ湿热灭菌30min后备用。药渣用水煎煮2次,每次30min,滤过,合并滤液浓缩至500ml。另取红花加水煎煮3次,每次20〜30min,滤过,合并滤液浓缩至250ml。②醇处理取当归、川芳水煎浓缩液与红花水煎浓缩液分别用乙醇处理,第1次使含醇量达60〜70%,第2次使含醉量达80〜85%,搅匀,静置40h以上,游除杂质,回收乙醉,分别浓缩至每ml相当原生药5g。③水处理当归、川苜浓缩液与红花浓缩液分别加蒸储水380m!与180ml搅匀,冷藏24h,分别滤过后合并,混匀,加注射用水750ml,冷藏24h后滤过,再浓缩至450ml。必要时可加针用活性炭处理。④配液取上述水处理后的浓缩液与当归、川茸蒸徳液500ml合并,混匀,调整pH值至?左右时,加注射用水至1000ml.(3)滤过将上述配制成的药液用滤纸,滤过至贮液瓶中,再经垂熔玻璃滤球4号或5号滤过,药液经澄明度检查合格后,即可进行灌注(不合格者应再回滤)。(4)灌注用安甑灌注器灌注。①调节灌注容量首先调节容积调节螺丝,使玻璃注射器的容积约为5.1ml,然后试灌若干支安甑,检查装量是否合格,不合格者再适当调节容积调节螺丝。(根据《中华人民共和国药典》的规定,安甑装量为2〜10ml者取样3支,开启时注意避免损失,将内容物分别用干燥的注射器抽尽,随即注入干燥的量筒中,在室温下检视,每支注射液的装量均不得少于其标示量。如有1支的装量少于标示量,应再按上述规定,取样测定,测定结果应全部符合规定)。②灌注将灌注针头插入安甑颈正中,注意不要使灌注针头与安甑颈内壁相撞,以防玻璃屑入安甑中,然后抽吸药液至标示号,再缓慢地注入安甑中(勿使药液溅起在安甑壁上)。往安瓶注药后,应立即回药,以防针头还带有药液水珠。灌注时,注意压药与针头打药应很好配合,不要针头刚进瓶口就给药或针头临出瓶口时才给完药。1.熔封已灌注好的安甑应立即熔封,使药液与外界隔离,避免污染。小量生产多采
38用双焰熔封灯进行熔封。(1)调节火焰点燃两盏酒精灯,然后脚踏皮老虎,调节含汽油的混合气的供气量。将火焰调至火力最强的蓝色,并使二焰对准相遇而稍现火花。(2)熔封取已灌注的安瓶,插入木制固定槽,移置火焰下,使安瓶颈部从二焰交叉点通过。熔融后用镜子依次钳去上端已软化的颈丝而使口封闭,或者左手持安瓶,使颈部置火焰尖端,并不断旋转,使受热均匀。待完全熔融后,右手持镒子挟住顶端,迅速拉断,然后再将断端烧圆。安瓶熔封应严密,不漏气,安瓶封口后长短应整齐一致,颈端应圆整光滑,无尖头及小气泡。1.灭菌将熔封后的安甑,立即放入铝锅中加水煮沸30〜40nlin灭菌。2.质量检查(1)安甑漏气检查将灭菌后的安甑乘热浸入0.05%曙红溶液中,如曙红溶液由孔隙进入,使药液染色而被检出。(2)澄明度检查取复方当归注射液,置伞棚式安瓶检查灯下,距光源约20cm处,先与黑色背景,次与白色背景对照,用手指夹持安瓶一端,轻轻反复倒转,使药液流动。在与安甑同高的位置并相距15〜20cm处,以目检视,不得有可见浑浊与不溶物(如纤维、玻璃屑、白块、白点、色点等)。(3)无菌、热原检查安全试验及溶血试验等。(略)3.印字和包装在蜡纸上刻写“复方当归针”及批号,放在蓝或红色印泥上,将安甑从蜡纸上滚过,将字印在安瓶上。安甑印字后,即可进行包装,包装盒内放有割颈用的小砂轮及说明书。(四)观察结果按质量要求,检查试制的复方当归注射液是否合格。(五)分析讨论中药注射剂制作流程的关键有哪些。十二黄苓昔的提取(一)目的1.通过黄苓苜的提取,了解常用的中药提取方法。2.掌握黄苓中提取黄尊背的工艺。(二)准备1.药物:黄苔、乙醇、氢氧化钠、浓盐酸。2.器械:中药提取分离装置。(三)方法和步骤1,介绍常用的提取方法(1)煎煮法:用水作溶剂,将药材加热煮沸一定的时间,以提取其所含成分的ー种方法。(2)浸渍法:用定量的溶剂,在一定的温度下,将药材浸泡一定的时间,以提取药材成分的ーー种方法。(3)渗漉法:将药材粗粉置浸漉器内,溶剂连续地从浸漉器的上部加入,浸漉液不断从下部流出,从而浸出药材中有效成分的一种方法。
39(4)回流法:用乙醇等易挥发的有机溶剂提取药材成分,将浸出液加热蒸徳,其中挥发性溶剂溜出后又被冷凝,重复流回浸出器中浸提药材,这样周而复始,直至有效成分回流提取完全的方法。(5)水蒸气蒸储法:根据道尔顿定律,相互不溶也不起化学作用的液体混合物的蒸气总压,等于该温度下各组分饱和蒸气压(即分压)之和。因此,尽管各组分本身的沸点高于混合液的沸点,但当分压总和等于大气压时・,液体混合物即开始沸腾并被蒸储出来。2.黄岑中提取黄苓甘的エ艺(1)取黄岑生饮片200g,加水1600ml,煎煮1h,二层纱布滤过,药渣再加水1200ml,煎煮0.5h,同法滤过。(2)合并滤液,滴加浓盐酸,酸化至pH1〜2,80°C保温0.5h,使黄苓玳沉淀析出。(3)弃去上淸液,沉淀物抽滤,取滤饼加入10倍量水,使之呈混悬液,用40%氢氧化钠溶液调至pH7,混悬物溶解,加入等量乙醇,滤去杂质,滤液加浓盐酸调至pH1〜2,加热至80℃,保温0.5h。(4)黄岑甘析出后,滤过,沉淀物以少量50%乙醇洗涤后,再以5倍量乙醇洗涤,干燥,即为黄尊背粗品。(四)分析讨论1.各种提取方法中都有哪些优缺点?2.黃苓首提取中应该注意哪些问题?十三黄苓昔的分离(一)目的1.通过黄苓甘的分离,了解常用的分离方法。2.掌握聚酰胺薄层层析分离鉴定黄尊背的方法。(二)准备1.药物:黄苓昔粗品,聚酰胺薄膜,醋酸。2.器械:中药提取分离装置。(=)方法和步骤1.介绍常用的分离方法(1)水提醇沉淀法与醇提水沉淀法水提醇沉淀法是先以水为溶剂提取药材有效成分,再以不同浓度的乙醇沉淀去除提取液中杂质的方法;醇提水沉淀法是先以适宜浓度的乙醇提取药材成分,再用水除去提取液中杂质的方法。(2)透析法利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过的性质,借以达到分离的ー种方法。(3)盐析法在含蛋白质等高分子物质的溶液中加入大量的无机盐,使其溶解度降低,沉淀析出,而与其他成分分离的ー种方法。(4)萃取法利用混合物中的不同成分,在两种互不相溶的溶剂中分配系数不同,而达到分离有效成分的ー种方法。(5)酸碱法利用中药成分在水中的溶解性与酸碱度有关的性质,在溶液中加入适量酸或碱,调节pH值至一定范围,使这些成分溶解或析出,以达到提取分离的方法。(6)层析法又叫色层分析法,是分离复杂混合物的物理方法。主要是利用混合物中各成分的理化性
40质的差别,使各成分以不同程度分布在两个不相混溶的相中。主要包括薄层层析、吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析等。1.聚酰胺薄层层析分离鉴定黄苓贰(1)样品编号:A:黄苓昔标准品低浓度B:黄苓首标准品高浓度C:提取黄苓甘粗品低浓度D:提取黃苓背粗品高浓度黄岑甘Rf值为0.4,黄岑中其它成分Rf值为0.48。(2)做ー个5cmX7cm的聚酰胺薄膜,距下沿0.5~lcm处划线。分别将A、B、C、D四个样品按一定距离点于线上,吹干。(3)用36%醋酸展开至展开剂前沿,取出吹干。(4)紫外灯下观察斑点位置。(四)分析讨论1.各种分离方法都有那些优缺点?2.聚酰胺薄层层析法的原理是什么?十四、槐米中芦丁的提取(-)目的通过槐米中芦丁的提取,学习中草药黄酮类成份的提取方法。(二)准备1.药品:槐花米20g;石灰乳:熟石灰20g,加300ml水,搅拌,静置,取上清液待用。2.器械:1000ml烧杯1个,500ml烧杯3个,500w电炉1个,广泛PH试纸1盒,温热熨斗1个,9cm、15cm滤纸各1盒,玻璃棒2根,酒精灯1个,布氏漏斗1个,抽滤瓶1个,电烘箱等。(三)实验方法和步骤槐米中芦丁的提取方法见下图。槐花米(20g)在研钵屮研碎(不宜过碎,妨碍过滤),置1000ml烧杯中,加水400ml,在搅拌下加石灰乳至PH8-9,加热至沸30min,保持PH8~9,倾出上清液,过滤,帀复提取1次,合并滤液。残渣滤液用Hcl调pH5左右,静置20min,过滤
41芦丁粗品滤液悬浮于200~300ml蒸储水中,加热溶液,趁热过滤。不溶物滤液放置30min,抽滤,水洗,7〇〜80℃干燥精制芦丁图槐米中芦丁的提取流程图操作说明:(1)采用碱提取,酸沉淀的方法,是因为芦丁结构中有多个酚羟基,呈一定的酸性,可溶于碱性溶液中,碱性溶液酸化后即可析出芦丁的粗品。(2)精制操作是利用芦丁在冷水中不溶(1:10000),在热水中微溶(1:200)的溶解度差进行的,该精制方法可获得较纯的晶形(微细针晶)成品.(四)结果计算所得精制芦丁的提取百分率。精制芦丁的提取百分率=精缶や?二臂重量、,&)x100%槐米花重量(g)(五)分析讨论根据实验过程,分析并讨论如何提高精制芦丁的百分率。十五、中药粉末的显微鉴别(-)目的了解中药粉末显微鉴别的技术,掌握淀粉粒、草酸钙结晶、花粉粒等显微特征,熟悉粉末装片的方法。(二)准备1.药品:半夏、大黄、金银花、密蒙花(过40目或60目筛),马铃薯,水合氯醛液,稀碘液,苯三酚,蒸徳水。2.器械:显微镜,酒精灯,牙签,镒子。(三)实验方法和步骤1.观察半夏块茎的淀粉粒和草酸钙结晶(1)淀粉粒①制片:用牙签挑取少许半夏粉末,置于载玻片的蒸储水中,加盖玻片。②观察:将标本片置显微镜下观察,可见众多淀粉粒,其中单粒呈圆球形,半圆形,直多角形,通常较小,脐点呈点状、裂隙状,常由2〜8个单粒组成。(2)草酸钙针晶①制片:在载玻片中央加水合氯醛试液1〜2滴,用牙签挑取半夏粉末适量,置于水和氯醛液滴中,拌匀,置酒精灯上微热,并用牙签不断搅拌,稍干(切勿烧焦),离火微冷,加蒸储水1〜2滴拌匀,微微倾斜玻片,用吸水纸吸去蒸储水,在剩余物上又滴加水合氯醛
42试液,如上法再处理一次,最后滴加甘油,盖上盖玻片。②观察:将标本置于显微镜下观察,可见草酸钙针晶存在于圆形或椭圆形的薄壁细胞中,成束或散在,有的已从破碎的细胞中散出,有的已经折断。半夏的针晶束常呈浅黄色或深灰色,散在的针晶则无色透明,有较强的折光性。2.观察大黄的草酸钙簇晶(1)制片在载玻片中央加水合氯醛试液1〜2滴,用牙签挑取大黄粉末适量,置于水和氯醛液滴中,拌匀,微微倾斜玻片,用吸水纸吸去蒸储水,在剩余物上又滴加水合氯醛试液,最后滴加甘油,盖上盖玻片。(2)观察:镜下观察,见草酸钙簇晶大小不等,直径21135um,棱角大多短钝,簇晶形状呈不规则矩圆形或类长方形。3.观察金银花的花粉粒(1)制片在载玻片中央加水合氯醛试液1〜2滴,用牙签挑取金银花粉末适量,置于水和氯醛液滴中,拌匀,微微倾斜玻片,用吸水纸吸去蒸禰水,在剩余物上又滴加水合氯醛试液,最后滴加甘油,盖上盖玻片。(2)观察金银花花粉粒黄色,类圆形或圆三角形,直径60~92um,外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹,具有3个萌发孔。4.观察密蒙花的星状毛(1)制片:同金银花。(2)观察:星状毛多断碎。完整者体部2细胞,每细胞2分叉,分叉几等长或长短不一,尖端稍呈钩状。毛直径12~31um,长50'424um,形如星光放射,故名。5.观察马铃薯块茎的淀粉粒(1)操作:切取马铃薯ー小块,用刀片刮取少许混浊液,置于载波片上,或用马铃薯直接涂片,加蒸爛水一滴,盖上载玻片。(2)观察:将标本片置于显微镜下观察,可见马铃薯淀粉粒多数为单粒,少数微复粒。个别微半复粒。单粒多呈大小不等的卵圆形颗粒,较小的单粒则呈圆形。单粒有一个明亮的脐点,脐点常偏离较小的一段,并有明暗交替的层纹所环绕。复粒由两个或几个单粒组成,即有两个或多个脐点,脐点周围只有臼己的层纹而无共同的层纹。单粒与复粒的区别是每个脐点,除有自己的层次外,还有共同的层次。淀粉粒观察清楚后,加稀碘液一滴,可见淀粉粒被染成蓝色。(四)结果绘出马铃薯的单淀粉粒和复淀粉粒、半夏的草酸钙针晶、大黄的簇晶、金银花的花粉粒以及密蒙花星状毛。(五)分析讨论中药粉末的显微鉴别过程中,应注意哪些问题?十六、中药化学成分预试(-)目的中药的化学成分比较复杂,先通过简单的试验,初步了解其中所含成分的情况,为选用适宜的提取和分离有效成分的方法提供依据。通过试验掌握常用的试管预试法和圆形滤纸层析预试法的操作方法。(二)准备1.动物兔2.药物95%乙醇、盐酸、乙醛、对硝基苯胺、亚硝酸钠、次硝酸紹、碘化钾、硫酸铜、
43酒石酸钾、氢氧化钾、氯化钠、白明胶、3,5一二硝基苯甲酸、苦味酸、三氯化铁、碳酸钠、氢氧化铉、硫酸、荀三酮、Xー蔡酚、镁粉、硼酸、丙酮、枸椽酸、氢氧化钾、氯仿、硫酸钠、冰醋酸、盐酸羟胺、铁氟化钾、甲基红、甲基橙、石蕊、磷铝酸、三氯化铝、醋酸酊。1.器材20目筛,水浴锅,试管,管塞,漏斗,量筒,量杯,吸管,滴管,培养皿,剪刀,试剂瓶,洗瓶,圆底烧瓶,直形冷凝管,电炉,酒精灯,薄层喷雾器,紫外荧光灯,电吹风,脚踏皮老虎,电动离心器,台秤。(=)方法和步骤1.试管预试法(1)样品的制备①酸性乙醇提取液称取通过20目筛的中药粉末10g,カ叭70ml0.5%盐酸乙醇溶液,在水浴上回流10nlin,乘热过滤,滤液供检查酚性成分、有机酸和生物碱等。②水提取液称取通过20目筛的中药粉末10g,加入100ml水,在室温浸泡过夜,供检查氨基酸、多肽和蛋白质等。剩余药渣及浸液在60C水浴上回流lOmin,乘热过滤,热滤液供检查糖、多糖、皂甘、甘类和糅质等。③甲醇提取液称取通过20目筛的中药粉末10g,加K70nli甲醇,在水浴上回流lOmin,乘热过滤,滤液供检查黄酮及其背类、蕙醍及其背类、强心甘、香豆精及其甘类、内酯、酯类、挥发油,植物脩醇和油脂等。④含植物色素、树脂较多的中药,为了避免颜色反应的干扰,可先加入100ml乙醛,在水浴上回流lOmin。过滤,滤液用圆形纸层析预试法检查内脂、酯类成分、游离香豆精、游离黄酮、游离蔥醍和挥发油等。经乙醛处理后的药渣再按甲醇提取法,其提取液供检查黄酮背、强心甘、香豆精甘等。(2)试剂的配制①重氮化试剂取对硝基苯胺0.35g溶于5ml浓盐酸,再缓缓倒入蒸储水中稀释至50ml«另取亚硝酸钠5g溶于70ml蒸储水中。用前将两液等量混合置于冰水中备用。②碘化强钾试剂(Dragendorff试剂)取次硝酸锈8g,溶F17ml30%硝酸(比重1.18)中,搅拌,慢慢滴入含有碘化钾27.2g的20nli水溶液中。静置一夜,取上清液,加水稀释至100m!0③碱性酒石酸铜试剂(Fehling试剂)取硫酸铜结晶6.93g,溶于100ml水中。另取酒石酸钾结晶34.6g,氢氧化钾10g溶于100ml水中,使用时取两液等量混合。④2%红细胞悬浮液自哺乳动物静脉采血2ml,搅拌去除纤维蛋白,以2000r/min离心分离红细胞,用生理盐水洗涤3次,再加100ml生理盐水均匀混合。⑤氯化钠白明胶试剂取白明胶1g溶于50ml水中(在60C水浴中加热助溶),加入氯化钠10g,待完全溶解后,加水稀释至100ml。⑥3,5一二硝基苯甲酸试剂(Kedde试剂)取1ml2%的3,5一二硝基苯甲酸乙醇溶液,3ml4%氢氧化钠乙醇溶液,与7ml水混匀(使用时配制)。⑦碱性苦味酸试剂(Baljet试剂)取9ml1%苦味酸乙醇溶液,1ml10%氢氧化钠乙醇溶液(不含碳酸钠)混匀(使用时配制)。
44(3)试验及结果判定A.酚性成分的检查三氯化铁试验取1ml酸性乙醇提取液,加入1%三氯化铁乙醇溶液1-2滴,呈现绿、蓝绿或暗紫色者,为阳性反应。重氮化试验:取1ml酸性乙醇提取液,加入1ml3%碳酸钠溶液,在沸水浴中加热3min,再至冰水浴中冷却,滴加新配制的重氮化试剂1〜2滴,呈现红色,为阳性反应。B,有机酸的检查酸碱度试验:用pH试纸测定水提取液的酸碱性,颜色指示在pH7以下,表明含有有机酸成分。显色试验:取1ml酸性乙醇提取液,用5%氢氧化锈溶液调节至中性。再按圆形滤纸层析法检查有机酸。C,生物碱的检查取15ml酸性乙醇提取液,用5%氢氧化佞溶液调节至中性,在水浴上蒸干,其后加5%硫酸溶解残渣,过滤,其滤液供下述试验:碘化钝钾试验:取滤液1ml,加碘化锌钾试剂1-2滴,呈现浅黄色或红棕色沉淀者,为阳性反应。D.氨基酸、多肽和蛋白质的检查双缩服试验:取被检冷水提取液1ml,滴加10%氢氧化钠溶液2滴,摇匀,滴入0.5%硫酸铜溶液,随加随振摇,呈现紫色、红色或紫红色者,为阳性反应。萍三酮试验:取被检冷水提取液1ml,滴加0.2%荀三酮溶液2〜3滴,摇匀,在沸水浴中加热5min,冷却后,呈现蓝或蓝紫色者,为阳性反应。E糖、多糖和甘类的检查碱性酒石酸铜试验:取被检热水提取液1ml,滴加新配制的碱性酒石酸铜试剂4〜5滴,在沸水中加热5min,呈现棕红色氧化亚铜沉淀者,为阳性反应。a-蔡酚试验:取被检热水提取液1ml,滴加5%a-茶酚乙醇溶液2〜3滴,摇匀。沿试管壁缓缓滴入0.5ml浓硫酸,在交界处呈现紫红色环者,为阳性反应。F.皂昔的检查泡沫试验:取被检热水提取液2ml,置于带塞试管中,用カ振摇Imin,如产生大量泡沫,放置lOmin,泡沫没有显著消失者,为阳性反应。溶血试验:在玻片上滴一滴红细胞混悬液,置于显微镜下,滴加被检水提取液少许,如红细胞破裂、消失,为阳性反应。此试验也可在试管内进行。G,糅质的检查三氯化铁试验:取被检热水提取液!ml,滴加1%三氯化钠白明胶试剂ピ2滴,呈现白色沉淀或混浊反应者,为阳性反应。H.黄酮类或其首类的检查盐酸一镁粉反应:取被检甲醇提取液1ml,加入浓盐酸4〜5滴及少量镁粉。在沸水浴中加热3min,呈现红色者,为阳性反应。荧光试验:取被检甲醉提取液1ml,在沸水浴上蒸干,加入硼酸的饱和丙酮溶液及10%枸椽酸丙酮溶液各1ml,继续蒸干。将残渣在紫外灯下照射,呈现强烈的荧光现象时,为阳性反应。I.蔥醍或其昔类的检查
45碱性试验:取被检甲醇提取液1ml,加入10%氢氧化钠溶液1ml,如产生红色反应,加入30%过氧化氢1〜2滴,加热后红色不褪,用酸调节至酸性,红色消失者,为阳性反应。醋酸镁试验:取被检甲醇提取液1ml,加入1%醋酸镁甲醇溶液3滴,呈现红色者,为阳性反应。J.强心昔的检查3,5一二硝基苯甲酸试验:取被检甲醇提取液1ml,濶ル3,5一二硝基苯甲酸试剂3〜4滴,呈现红色或紫色者,表明含有强心昔。碱性苦味酸试验:取被检甲醇提取液1ml,加入碱性苦味酸试剂1滴,放置15min后呈现橙色或橙红色者,为阳性反应。K,内酯、香豆精或其背类的检查重氮化试验:取被检甲醉提取液1ml,加入3%碳酸钠溶液1ml,沸水浴中加热3min,再至冰水中冷却,加入新鲜的重氮化试剂1〜2滴,呈现红色者,为阳性反应。L.植物帯醇、三菇成分的检查冰醋酸一浓硫酸试验:取被检甲醇提取液1ml,在水浴上蒸干。再用冰醋酸1ml溶解残渣,加入醋酸肝ー浓硫酸(19:1)试剂1ml混匀,呈现黄色转变为红色—青色f污绿色变化反应者,为阳性反应。氯仿ー浓硫酸试验:按前法制备被检残渣用氯仿1ml溶解,加浓硫酸1ml,如在氯仿层呈现红或青色反应,在硫酸层有绿色荧光出现者,为阳性反应。M,挥发油、脂肪的检查取被检中药粉末2g,加20ml乙醛,温浸30min后过滤,滤液供如下试验:挥发油试验:取被检乙醛滤液1ml,置于玻璃皿内自然挥发,如留有油状物残渣,加热后油状物消失或减少者,为阳性反应。油脂的检查:取被检乙継滤液2ml,置于玻璃皿上自然挥发,将残渣加无水硫酸钠1〜2粒,置于酒精灯上直接加热,如产生白色刺激性气体者,为阳性反应。2.圆形滤纸层析预试法(1)样品的制备取被检中药粉末5g,加95%乙醇50ml,在水浴上回流lOmin。过滤,滤液浓缩至25nli备用。(2)试验步骤及方法取直径I2.5cm的普通圆形滤纸ー张,滤纸中心处打ー小孔,备插入滤纸芯之用。将0.1ml乙醇提取被检液滴加在距纸中心约1cm处(如图4—1)。歩圆滤纸可同时点上8〜10个样品。样品滴好后,将一小条滤纸芯插入滤纸的中心小孔。移到盛有展开溶剂直径为12cm的培养皿中,滤纸芯浸在溶剂中,滤纸上再盖以同样直径的培养皿,以进行层析。溶剂的前沿达到滤纸边缘后,取出滤纸,待溶剂挥发后,根据情况,选择分别喷以不同的显色剂,以滤纸上出现的颜色斑点,确定样品的成分。展开溶剂:甲醇或95%乙醇。(3)显色和结果判定①酚性成分的检查显色剂以2%三氯化铁乙醇溶液与2%铁氧化钾水溶液等量混合使用。呈现蓝ー紫色斑点者,为阳性反应。②有机酸的检查显色剂取0.1%甲基红乙醉溶液5ml,0.1%甲基橙水溶液15ml,0.1%石蕊水溶液
4620ml,混匀使用。呈现黄ー红色斑点者,为阳性反应。③植物脩醇、倂体皂甘、三砧类、三菇皂甘的检查显色剂以新配制的5%磷铜酸乙醇溶液,喷后置于120℃烘5min至显色为止。呈现蓝ー蓝紫色斑点者,为阳性反应。图4T圆形滤纸层析预试法④内酯、酯类、香豆精及其音类的检查显色剂用异羟后酸铁试剂。包括:盐酸羟胺20g溶于50ml水,以乙醇稀释至200ml;氢氧化钾50g溶于最小量水,以乙醇稀释至500ml;三氯化铁10g溶于20ml36%盐酸,再用200ml乙醛振摇混匀。使用时先将前两种溶液按1:2比例混合,过滤,滤液喷滤纸,烘干后再喷后ー种溶液,在80で烘2min。呈现蓝ー紫色斑点者,为阳性反应。⑤黄酮及其首类的检査先在紫外灯下观察荧光,然后喷以1%三氯化铝试剂,再观察荧光是否加强。若在紫外灯下呈现黄色、黄绿色、蓝色荧光斑点,经试剂喷后,其荧光显著加强者,为阳性反应。⑥蔥盤及其昔类的检查显色剂以2%氢氧化镀溶液。呈现橙红或紫红色斑点者,为阳性反应。⑦强心甘的检查显色剂先喷2%3,5一二硝基苯甲酸乙醇溶液,再喷4%氢氧化钠乙醇液。呈现紫红色斑点者,为阳性反应。⑧生物碱的检查显色剂用碘化锡钾试剂(取次硝酸紹。.85g溶于!0ml冰醋酸,加40ml水混匀;另取碘化钾8g溶于20ml水中。使用时取两溶液各5ml,加冰醋酸20nli混均喷用)。呈现棕色、棕红色斑点者,为阳性反应。⑨氨基酸的检查显色剂用0.2%的三酮水溶液,喷匀后,80C烘干!0min«呈现红色蓝色、蓝紫色斑点者,为阳性反应。(四)分析讨论试管预试法是利用中药中各类成分溶解度的差异,选用适当的溶剂将一类溶解度相近的成分提出,再对提取液做一些特异的颜色反应或沉淀反应,初步判定其所含成分,这种方法简便易行。但是,某些定性反应也有局限性,如植物所含成分复杂,若含植物色素、树脂等较多时其颜色反应不易观察,故有时影响实验结果的正确判断。圆形漉纸层析法是用层析方法将屮药粗提取液屮的成分在纸上展开,利用各种显色剂显色,来检查所含的成分,这种方法简便、快速、用量少,但也存在前述的缺点。总之预试验只能提供初步的线索不能完全肯定或否定某种成分的存在。预试验后填写实验报告ー份,并据结果提出用哪些方法进行提取和分离。十七、中药化学成分的提取、分离与鉴定(-)目的总体了解中药化学成分的提取和分离方法;掌握常用提取法的操作技术;重点学会运用层析法鉴定中药化学成分。(二)准备1.药物黄苓、黄柏、大黄、八角茴香、薄荷。60%及95%乙醇、20%石灰乳、10%盐酸、浓盐酸、40%氢氧化钠、冰醋酸、乙酸、6mol/L氢氧
47化钠、5%氢氧化钠一2%氢氧化铉混合液、氯化钠、正丁醇、醋酸镁、次硝酸锌、冰醋酸、碘化钾、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、内酮、石油酸、高镒酸钾、氧化铝、硅胶G、1,8一二羟基蔥醍。1.器材电炉,煤油炉,水浴锅,铝锅,台秤,烧杯,容量瓶(25、125ml),具塞烧瓶,圆底烧瓶(2000,1000,500),三角烧瓶,水蒸汽发生器,冰凝管(直形、球形),挥发油测定器,量筒(1000、100ml),分液漏斗(500、250ml),玻璃板(15X5、20X5cm),新华I号漉纸,pH试纸,铅笔,圆规,直尺,剪刀,电吹风,铁台,固定夹,乳胶管,层析缸,荧光灯(波长2537A)。(三)方法和步骤本实验分3部分进行;首先提取中药化学成分;第二将提取所得的浓缩液进行分离和精制;第三步用层析法鉴定分离所得的化合物是否为某已知化合物(或有效成分)。1.中药化学成分的常用提取法实验分4组进行,每组分别安装4种提取装置,提取时作详细记录。(1)煎煮法煎煮一般多用水为溶剂,操作简便,多数有效成分可被提出。但由于水能使多种成分溶解,故不需要的化学成分和杂质等也被提取出来,造成滤过和提取的困难。含挥发性成分及化学成分遇热易破坏的中药,不宜采用煎煮法。取中药薄片或碎块(黄苔),放入铝锅内,加入1〇〜20倍量水,搅拌,浸润20〜30min,直火加热,开始宜用强火(电炉),沸后改用文火(煤油炉),保持煎沸lOmin。用纱布过滤,得滤汁(头汁)。药渣再加8倍量冷水,按上法煎沸,沸后煎煮30min,滤过得二汁,合并2次煎液,静置,备用。注意事项①煎煮不宜用铁锅,最好用陶(或搪)瓷器皿,实验室可用玻璃器皿。②煎煮前宜加冷水浸泡,有利于有效成分的溶出。③煎煮时间和次数,随药材性质而定。(2)渗漉法渗漉法是在药粉上添加浸出溶媒,使溶媒渗过药粉,由于浸液比重大而向下移动,造成了良好的浓度差,使扩散能较好地自然进行。因此,此法不仅提取效率高,同时节省溶剂。本法不宜用挥发性很强的溶剂,一般常用的溶剂为不同浓度的乙醇、酸或碱性乙醇、酸性或碱性水等。取中药(黄柏),用研钵研碎,过30目筛,秤取粗粉15g,置烧杯中,加入3倍量的20%石灰乳使其充分湿润和膨胀,浸渍30〜60min。取脱脂棉ー块,用脱脂纱布包裏,并以溶剂湿润。铺垫于渗漉器底部出口处。然后,分次将已湿润好的中药粗粉,填装于渗漉器内,每填装ー层压平,不能有松有紧留有空隙,如此层层填装完毕后,在药粉上面盖以滤纸或纱布,再铺ー层干净的玻璃珠轻压,以免加入溶剂时使药粉冲起或飘浮(图4—2)。药粉填装完毕后,加入溶剂,打开渗漉器下口的螺丝夹,待少量溶剂流出排除筒的空气后,旋紧螺丝夹,将流出的浸出溶媒倒入筒内,并使溶剂液面超过药面儿厘米,加盖放置,浸渍24〜48h,使溶剂充分渗透和扩散。浸渍一定时间后开始渗漉,渗漉液流出速度一般每2〜5ml/min。在渗漉过程中,需要随时添加溶剂,使药材中的化学成分充分浸出。将收集的渗漉液静置24h,滤过,备用。注意事项①药粉在渗漉筒中的松紧及压カ的均匀度会影响浸出。松紧不匀使部分药粉不能得到应有的浸取,压カ不匀造成浸出不完全或堵塞。②渗漉过程中,药料上部要始终保持一定量的溶剂,以免药料干裂而使渗漉不全。
48③渗漉的速度,应依药材的性质,制剂的种类和浸出成分等决定。图4—2渗漏(3)回流法采用有机溶剂加热提取中药化学成分时,或提取易挥发的化学成分时,为防止溶剂及化学成分的挥发,需采用回流法。回流法提取效率高,速度快,并可节约溶剂。将药材粗粉(大黄),装入大小适宜的圆底烧瓶中,添加适量的溶剂(95%乙醇)至烧瓶容量的1/2或1/3(但需浸过药面),连接冷凝器,于水浴锅上隔水加热。当沸腾后,溶剂蒸汽经冷凝器冷凝后,又流回烧瓶药粉中,如此回流提取至预定的时间后,滤取提取液,药渣再添新溶剂,反复回流提取2〜3次,滤过,合并提取液,回收溶剂,得浓缩液,备用(图4—3)。图4-3回流装置图4-4水蒸汽蒸徳装置注意事项①溶剂装入烧瓶中的量不可太满(不得超过烧瓶容量的2/3),并在烧瓶中事先装入止沸剂(如玻璃珠等)。回流装置各接口处要严密,以免跑气、漏液。②多数有机溶剂易燃烧,要注意安全,应在水浴上加热,不可直接用火加热。③冷凝器的大小,应根据溶剂的沸点和需要回流的溶剂体积而定,要求溶剂蒸汽能冷凝完全。一般不宜采用蛇形冷凝管,以免回流不畅而发生意外。(4)水蒸汽蒸储法水蒸汽蒸储法,是利用水蒸汽加热中药,使中药中的挥发性成分随水蒸汽ー起蒸徳出来。本法常用于挥发油类的提取。开始时,水蒸汽发生器和盛中药(薄荷)的烧瓶应同时直火加热,至沸腾后烧瓶改用酒精灯小火加热。蒸馈至蒸储液中无挥发汕味时停止。收集播出液分层备用(图4-4)。注意事项①烧瓶应向水蒸汽发生器方向倾斜,以免飞溅起来的泡沫、药渣等进入冷凝器而流入接收瓶。蒸汽发生器的装水量不得超过其容量的2/3。②中断蒸储时,必须先将蒸汽发生器和烧瓶中间的三通管下口的螺丝夹打开,使与大气相遇后再停止加热,以防止烧瓶内液体回流到蒸汽发生器中。中国药典中挥发油测定器也是ー种水蒸汽蒸储装置,如果要提取少量挥发油,亦可用此装置。其用法如下:称取八角茴香80g,捣碎后置1000ml圆底烧瓶中,加蒸徳水700ml,振摇混合后,连接挥发油测定器,并从冷凝管向测定器的刻度部分添加蒸储水至溢流入烧瓶为止。宜火加热
49至储出液基本上不呈混浊为止,收集蒸储液约500ml0实验完毕,各组将提取所得药液分别装入行塞烧瓶中,贴上组别、制作者姓名、日期。置4℃冰箱中。2.中药化学成分的常用分离法经过提取所得的浓缩液,仍是多种成分的混合物,因此需要进行分离和精制。常用的分离法有:(1)pH梯度分离取以上经提取的黄岑浓缩液,用浓盐酸调pHl〜2,加热至80℃,保温30min,黄岑素析出,滤出沉淀,加入相当于沉淀物8倍量的水,搅匀,使黄岑素粗品混悬于水中,以40%氢氧化钠调至pH7,再加入等量的95%乙醇。使黄苓素成钠盐溶解,过滤,滤液用浓盐酸调节pH2,充分搅拌,并加热至8。ヒ,黃苓素析出,过滤,以95%乙醇洗涤至PH4,干燥即得黄苓素。(2)液ー液萃取选用与药液不相混溶的溶剂,使之充分混合接触,以便将药液中有效成分,由原药液中转溶于新溶液中,而杂质或不需要的化学成分,仍留在原药液中,然后将两液分离,以便达到有效成分分离精制的目的。本实验吸取上次实验所得大黄提取液2nd,置100ml圆底烧瓶中,加冰醋酸8ml,在沸水浴上回流3min,待冷后加乙鮭30ml,以棉花过滤到分液漏斗中,并以20ml乙醛分2次洗涤,与滤液合并,在冷却情况下,向分液漏斗中加6M/L氢氧化钠液25ml和5%氢氧化钠ー2%氨水混合液25nli,摇振提取,以冷水冷却,放置分层,分出红色的碱水层,收集碱水层。乙醛层再用混合碱液(每次20ml)提取2次,直至乙醜层无色。碱水液储存备用。(3)盐析中药的某些成分,可溶于水,但难溶于无机盐的水溶液,用此性质,向中草药提取液的水溶液中,加入适量的无机盐后,这些成分就离析出来。所用盐析剂,除食盐外还有硫酸钠、醋酸钠、硫酸钱等。加入盐析剂的数量随不同品种而异,浓度可配成5%、10%,等等。盐析除可提取某些化学成分外,也用于除去某些杂质。本实验取八角茴香蒸储液,加食盐使之饱和(每100ml储出液约加食盐40g),搅动后放置1〜2h。将上溶液小心倾出于分液漏斗中(不需带出食盐),加乙暇!00ml振摇,待水和乙醜层分离后,分出下层的水,将上层乙醛液从分液漏斗上口转入200nli三角烧瓶中,加无水硫酸钠适量,放置过夜,过滤,将乙醛液移入蒸禰烧瓶中,回收乙酸(切不可用明火),残留物即为八角茴香油。实验完毕,将分离所得物质储存于具塞瓶中,贴上组别、姓名、日期,置4ヒ冰箱中。3.中药成分的鉴定(纸层析法和薄层层析法)纸层析法(1)样品和标准品溶液的制备①大黄提取液(由上次实验而得)。②标准品溶液:精密称取1,8一二羟基蔥醍10mg,置25ml容量瓶中,加甲醇于水浴上加热使之溶解,用甲醉调到刻度。(2)滤纸准备将供层析用的杭州新华滤纸ー张,放在干净的玻璃上,裁成滤纸条(8X30cm)2张,在距纸端约2cm处。用铅笔轻轻划ー横线,于横线上每隔2cm处划ー圆圈(直径约0.3cm以内)以供点样用,滤纸的另一端打ー圆形小孔供悬挂时用。(3)点样用毛细管吸取样品溶液分别滴于滤纸上,每点直径不超过0.3cm,每次点后待
50干(或用电吹风吹干),然后再继续点第二次,ー共点4〜5次(注意点子不能大,否则有拖尾现象),点完后吹干或晾干,以备层析用。滤纸:圈1点大黄提取液(4)展开剂乙酸乙酯:甲醇:水=100:16.5:13.5(是质量还是体积比)(5)展开先将预先选择好的展开剂(溶液系统)加入标本缸中,加入量以使液层髙约l-2cm为度,密盖放置片刻使缸内空气为展开剂的蒸气饱和,即将点有样品的滤纸放入,悬挂在悬钩上,先将滤纸悬挂稍高些离开展开剂液面,让溶剂蒸气先将滤纸纤维饱和,再使滤纸的底边浸入展开剂中约1cm,样品中的各成分即随溶剂的上升而逐渐分开。展开至28cm处,取出纸条,用铅笔划下溶液前沿,然后显色。(6)显色用1%醋酸镁甲醇溶液。(7)结果显色后用铅笔划下色点的位置,求每色点的Rf值。样品的Rf值与标准品Rf值对照检识。显色后,也可放在紫外灯下观察荧光。(8)作业根据结果写出实验报告。Rf值=起点线至斑点中心的距离/起点线至溶剂前沿的距离一般说来,在固定的层析条件下,ー个化合物的Rf值是个常数,所以它对鉴定成分有重要的参考价值,尤其在有已知物对照的情况下,更是确定一个成分的有力佐证。薄层层析法(1)制板薄层板就是将吸附剂均匀地涂铺在载体h(最常用的是2〜3mm厚的玻璃板)使之成一薄层状。欲分离的样品就在这ー薄层吸附剂上进行层析分离。涂铺的方法有干法及湿法两种。①干法涂铺即称取一定量的吸附剂(常用的氧化铝,本实验用氧化铝6g)堆放在玻片的一端,用两端粘有1〜2层胶布的玻棒向前或向后均匀地刮过,使氧化铝在玻片上成ー均匀的薄层,这样的薄层板乂叫“软板”或“干板”。铺好后可直接点样,用近水平法展开。这种“软板”制作容易而简便,缺点是展开过程要轻拿轻放,显色不方便,不能保存;分离效果有时不如“硬板”好。②湿法涂铺是将吸附剂加水适量调成糊状,为了使制成的薄层板较为牢固,常在吸附剂中加入适量的粘合剂,最常用的是燉石膏,即成市售硅胶G。薄层糊的调配:称取6g硅胶G,加入2〜2.5倍量水。在乳钵中不断搅拌研磨数分钟,至成均匀粘稠的糊状,一•般研磨至肉眼观察没有水与吸附剂分离的现象,而目.糊的表面有奶油样的光泽即可倾倒在二块玻板上立即涂铺。一般可徒手涂铺,即将玻片置于平台用掀起一边再放下的方法使之反复颠簸,成为均匀平坦的薄层。铺好的薄层板应在数分钟内凝固,厚薄均匀,没有分层,表面光滑,没有凸起的颗粒,不易自玻板上剥脱。一般薄层的厚度以0.25mm为宜。在HOC烘lh,放置干燥器中备用。(2)样品和标准溶液的制备①黄柏提取液:取前一次实验所得黄柏渗漉液,测pH在12以上,加10%盐酸调pH为5~6,静置,过滤,取滤液在水浴上浓缩至稠膏状,加3〜5倍量95%乙醇,沉淀过滤,取滤液回收(或挥去)。
51②大黄提取液(由上次实验而得)。③标准品溶液(i)黄连素溶液:取黄连素粉少许,加氯水碱化,放在水浴上除氨,残渣加95%乙醉(加热)使溶。(ii)1,8••ニ羟基蔥醍标准品溶液。(3)层析干板①点样每板点2点,一点是黄柏提取液,另一点是对照标准品(黄连素液),二点间隔2cm,每点直径不超过0.3cm。②展开剂氯仿:甲醇=9:1。③展开放于长形层析缸,采用倾斜上行法。④观察结果先在紫外荧光灯下观察,记录斑点的颜色、大小、位置,然后喷雾显色。喷以改良碘化紹钾液(见中药化学成分的预试)。与标准品对照记录结果。湿板①点样每板点2点,一点是大黄提取液,另一点是对照标准品(1,8一二羟基蔥醍液)。②展开剂乙酸乙酯:甲醇:水=100:16.5:13.5.③展开放于标本缸中,采用上行法层析。④观察结果先喷以1%醋酸镁甲醉溶液,然后在紫外灯下观察荧光,分别记录供试品与标准品斑点的颜色、大小、位置。(四)分析讨论1.对中药有效成分的鉴定结果作出评价。2.分析提取和分离过程中哪些是成功的?哪些是失败的?十八、中药制剂的含量测定(一)目的通过光电比色法测定中药制剂中的含量,了解药品检验的相关技术。(-)准备1.药品大黄提取液、1,8一二羟基蔥醒、6moi/L氢氧化钠溶液、5%氢氧化钠ー2%氢氧化钱混合液(下称混合碱液)、冰醋酸、乙酸、甲醇。2.器材721型分光光度计,容量瓶(100、50ml)吸管,水浴锅,烧杯。(三)方法和步骤1.标准溶液的配制精密称取在105C干燥2h的1,8一二羟基蔥醍20mg,置50ml容量瓶中,加甲醉,于水浴上加热使溶,再用甲醇调至刻度。精密吸取含1,8一二羟基蔥醍的甲醇溶液5ml,加20ml甲酔,使成80ug/ml。(正确)2.标准曲线的制备精密吸取标准溶液1、2、3、4ml,分别置小烧杯中,在水浴上蒸
52去甲醇,加混合碱液10ml,摇匀,在535nm波长处测定光密度,以光密度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。1.含量测定精密吸取各组的大黄提取液2ml(编号),置100ml圆底烧瓶中,加冰醋酸8ml,在沸水浴上回流30min,待冷后加乙酸30ml,以棉花过滤到分液漏斗中,并以20ml乙歷分2次洗涤,与滤液合并。在冷却状态下向分液漏斗中加6mol/L氢氧化钠液25ml和混合碱液25ml,摇振提取,以冷水冷却,放置分层,分出红色的碱水层,收集碱水层。乙醛层再用混合碱液(每次20ml)提取2次,直至乙醛层无色。将提取的碱水液置100ml容量瓶中,在沸水浴上加热30min,冷至室温后加混合碱液至刻度,混匀,精密查出相应浓度,并按下式计算出大黄提取液中总蔥醍A的含量。A(mg/ml)=MX5X50/1000M由曲线查微克数。(四)观察结果计算出各组大黄提取液中总蔥醍的含量。(五)分析讨论1.比较各组所得提取的含量,找出含量差异的原因?2.中药的含量测定还有哪些方法?十九、荆芥、柴胡的解热作用(-)目的观察解表药荆芥、柴胡的解热作用。(二)准备1.动物家兔2.药物伤寒副伤寒甲乙三联菌苗,1:1荆芥煎剂,1:1柴胡煎剂,生理盐水,凡士林。3.器材台秤,体温计,10ml注射器,酒精棉球。(三)方法和步骤1.发热家兔的准备家兔称重后测体温,挑选体温在38〜38.5ヒ者,耳静脉注射伤寒副伤寒甲乙三联菌苗(每公斤体重〇.5ml),观察2h后,以体温升髙1℃以上者作实验用。2.第1组家兔灌服1:1荆芥煎剂(〇.5ml/kg体重),第2组家兔灌服1:1柴胡煎剂(剂量同上),第3组家兔灌服等量的生理盐水作对照。3.灌药后每隔30min测体温ー次,并作记录。(四)观察结果43组家兔实验前后的体温,分别绘制体温曲线。(五)分析讨论分析荆芥和柴胡对实验性发热家兔的退热作用。
53二十、清热药的体外抗菌实验(-)目的通过实验,掌握中药体外抗菌实验的方法,了解清热药对病原菌的抑制和杀死作用。(二)准备1.菌种根据实验条件可选用大肠杆菌、沙门氏杆菌、肺炎球菌、链球菌、绿脓杆菌、金黄葡萄球菌,ー种或数种。先接种在适于生长的培养基内,置于37ヒ恒温箱中培养24h,待菌种复壮后使用。再取复壮的菌种ー环,放在适宜的培养基内,置于37℃恒温箱中培养。培养时间及所需培养基因细菌的各类不同而异。一般细菌培养6h,菌液浓度每ml相当于9亿左右,再用肉汤液1:500稀释后供使用。链球菌、肺炎双球菌等培养18h,菌液浓度相当于每ml3亿左右,再用肉汤液1:5稀释后供使用。2.药物清热药如黄连、黄岑、地丁、梔子等。将欲试药物制成100%水煎剂(1:1煎剂)。经55157.6Pa(即81b)气压灭菌20min,冷却后置冰箱中备用。3.培养基一般细菌如葡萄球菌、肠道杆菌等,可采用普通肉汤培养基或普通肉汤琼脂培养基。链球菌、肺炎双球菌等对营养要求较高的病原菌,可采用羊血肉汤培养基。4.器材试管(高压灭菌后备用),接种环,酒精灯等。(三)方法与步骤1.试管法用普通肉汤培养基或羊血肉汤培养基与100%中药煎剂进行倍比稀释(第一管双倍培养基),稀糅度为!:2、1:4、1:8……1:256,每管量为1ml。然后将菌液分别接种于不同浓度的药液培养基中,接种量为已稀释好的菌液0.1ml。同时设药液(药液与培养基1:2),细菌(细菌与培养基0.1:1);培养基(不加药液与菌液)各一管,做为对照。将上述试管摇匀后,置于37℃恒温箱中培养24h,再观察结果。2.平板法先将药物按试管法稀释为!:2-1:256等不同浓度。将各稀释度的药液1ml,置于无菌平皿中,然后将各平皿加已溶化的琼脂培养基9ml,迅速与药液混匀,对照用10ml琼脂培养基。已凝固的平板作标记后置于37℃恒温箱中1〜2h,使其水分干燥。取出平皿,将细菌以划线法接种于平板上,再置于37C恒温箱内培养24h后观察结果。(四)观察结果1.试管法首先在观察细菌对照管呈混浊,而培养基对照管、药物对照管呈透明清朗的前提下,再观察试管的混浊情况,以判查不同浓度药液的抑菌作用,如试管内液体混浊,证明有细菌生长,用“+”表示:如试管内澄清透明,证明无细菌生长,用“一”表示,将观察结果记入下表。
541.平板法主要观察平板上有无细菌生长。注意应在观察对照皿无细菌生长的前提下记录结果。观察和判断方法同试管法。(五)分析讨论将全班各组实验结果进行比较,如结果相近可计算平均值,如结果差别较大,应分析讨论其原因。二"!ー、清热药的体内抗菌实验(-)目的用某些清热药,对人工感染的实验动物进行抗菌活性试验,以了解淸热药的体内抗菌作用。(二)准备1.动物健康小鼠6〜12只,体重20g左右,等分为3组,即健康对照组、感染组、感染给药组。2.药物可选用清热燥湿的苦参、黄连等制成100%灭菌煎剂。3.感染菌可用临床分离出的大肠杆菌24h的培养物。4.器材注射器、剪毛消毒用品等。(三)方法与步骤5小鼠分3组并编号记录,饲养在同一条件下。1.健康对照组不感染,不给药,观察其生活情况,做为对照。2,感染组用分离出的大肠杆菌培养物进行腹腔接种感染,但不给药。以观察其是否发病,发病后的情况及其结果。3.感染给药组按上述感染组方进行感染,感染后lh腹腔注射药液0.5ml,并观察其情况及结果。(四)观察结果试验开始后,每隔ー定时间观察各组小鼠的情况,并详细记录其发病情况,最后观察其存活结果。(五)分析讨论
55综合全部试验结果,并统计全部试验数据,分析清热药对大肠杆菌的体内抗菌效果。二十二、承气汤系列的攻下作用比较(-)目的本实验着重了解攻下药的代表方3种承气汤(大承气汤、增液大承气汤和复方大承气汤)的下法原理和主治功能有何异同。(-)准备1.动物取健康家兔13只,体重2kg,注意动物情况的异同性,以减少误差。2.药物大承气汤:大黄10g(后下)、芒硝10g(冲)、枳实10g、厚朴10g。增液承气汤:上方加玄参10g、麦冬10g、生地10g。复方大承气汤:大承气汤加莱繭子10g、赤芍10g、桃仁10g。上述3方,分别作成煎剂,浓缩为100nli备用。活性炭500g。生理盐水1000ml。不用炭末亦可改用食用色素染红麦数片供试。3.器材兔开口器、细导尿管、金属注射器、兔解剖台、手术剪、麻绳、钢卷尺等。(三)方法和步骤1.炭末推进实验取家兔12只,分为4组。实验前禁食1天,用5%炭末加10%阿拉伯胶制成悬液,每兔灌服10ml,在灌炭末前20min先灌试药。通常在灌药后30min,用颈椎脱臼法将动物处死,立即剖腹,将消化道自贲门直至直肠末端完整地摘出,平铺于木板上,测其全长,并记录炭末推进的实际距离,计算炭末推进率。计算公式:炭末推进率=实测炭末推进距离/家兔肠道全长距离X100%2.对小肠分泌的影响取家兔1只,先将腹部毛剃去,用846(〇〇lml/kg)皮下注射进行麻醉,沿腹部白线切开,以减少出血,打开腹腔时要防止肠管涌出。手术操作要轻柔,术中要注意保温、保湿,用盐水纱布覆盖创面,术后要及时关闭腹腔。选取小肠4段,每段5cm,用棉线结扎两端,每段距离3cm,分别注入试药,其中一段注入生理盐水。分别注入1ml,30min后,抽取肠内分泌液,比较试前试后有何不同。(四)观察结果将实测数据填入下表实验分组炭末推进实验肠液分泌结果肠道全长实测长度推进率试前试后大承气汤增液承气汤复方大承气汤
56对照(五)分析讨论上述结果与泻下作用强弱有何差异?与中兽医理论“急下存阴”ヽ’‘增水行舟”有何关系?在临床选方上有何意义?二十三、木槟硝黄散及其拆方对兔离体肠管的作用(-)目的了解某些攻下方药对肠管的作用及其临床意义。(二)准备1.动物家兔2.药物大黄煎液(1.5%),芒硝煎液(5%),槟榔煎液(0.5%),木香煎液(0.5%),木硝黄煎液(100ml煎液中含木香0.5g、大黄1.5g、芒硝5g),木槟硝黄煎液(100ml煎液中含木香、槟榔各0.5g、芒硝5g、大黄1.5g)。大黄与木香不宜久煎,一般后入。台氏液。3.器材眼科剪刀和镒子,普通手术剪刀和镜子,烧杯,缝针,缝线,麦氏浴皿,L型通气管,球胆,注射器(5ml、1ml),螺旋夹,双凹夹,铁台,酒精灯及其架,火柴,温度计,量杯,记纹鼓,杠杆,描记笔,胶泥,打气筒等。(三)方法和步骤1.家兔1只,击毙或耳静脉注入空气致死,立即打开腹腔,剪取小肠数段,置于台氏液中,洗净肠内容物,供实验用。2.仪器妥善装置后,取小肠一段,长约2cm,沿肠管剪去肠系膜。在肠肌的两端用缝针各对穿丝线一条,其中一端丝线略短,并联结在L形通气管ー端的小钩上,置于盛有40ml台氏液的麦氏浴皿中;肠肌的另一端丝线略长,连结在描记笔尾上。3.麦氏浴皿置于保温热水烧杯中,为使烧杯中热水保持在38℃左右,在烧杯下方置ー微火酒精灯,并时刻注意火候,以免温度偏高或偏低。4.L形通气管的另一端,用橡皮管连接于充满空气的球胆上,放松螺旋夹,使球胆内空气经L形通气管小钩端的小孔,徐徐放出气泡,每秒约1〜2个气泡溢出,以供肠管活动所需耍的氧气。5.开记纹鼓记录,先描记正常蠕动曲线,然后依次加入下列药物于麦氏浴皿中,加药时应尽量接近肠肌,但不能触动肠肌,每加换ー种药液前,必须用温台氏液冲洗2〜3次,待肠蠕动恢复正常后再加药,观察并描记肠蠕动曲线。(四)观察结果1.加大黄煎液0.1ml后描记肠蠕动曲线,观察其结果。依次观察加0.1ml木香煎液、槟榔煎液、木硝黄煎液及木槟硝黄煎液后的结果。2.加0.15ml以上的槟榔煎液,造成肠痉挛收缩后,再加木硝黄煎液0.5ml以上,可观察到解痉的结果。(五)分析讨论
571.从实验中可知哪一味药是促进肠蠕动的主药。2.从实验中可知哪ー组合为最佳配方。3.木硝黄煎液解除槟榔的痉挛在中啓医理论上有什么意义。二十四、马价丸对兔实验性肠套叠的解除作用(-)目的了解马价丸对兔肠管的作用,探讨其临床意义。(二)准备1.动物家兔,1.5〜2.5kg。雌雄不限,实验前禁食48h,不禁水。2.药物马价丸煎剂:木香1g、槟榔1g、青皮1.5g、大黄3g、芒硝6g、牵牛子3g、荆三棱1.5g、木通0.7g、郁李仁1g,加水煎成200ml(大黄、木香后入)备用。生理盐水500ml,戊巴比妥300mg。3.器材解剖台,保定绳,注射器,手术剪,手术刀,培养皿,纱布等。(三)方法和步骤1.手术兔仰卧保定于解剖台上,耳静脉注射戊巴比妥钠25mg/kg,使其麻醉。在腹中线卜.剑状软骨后2指作5〜6cm长切口,取出回肠,并在距回盲瓣30cm及70cm处分别挂线为记。分离出两侧迷走神经。2.给药(1)第1组,在70cm处向肠内注射生理盐水5ml,以作对照。(2)第2组,在70cm处向肠内注射木槟硝黄散煎剂5ml。(3)第3组,耳静脉注射木槟硝黄散煎滤液5ml。(4)第4组,切断两侧迷走神经,再耳静脉注射木槟硝黄煎滤液5ml。3.观察实验肠套卷解除情况给药后,在30cm处用1ml注射器活塞将回肠人工造成ー个长约2cm单腔逆向肠套卷,然后将小肠置于切口内,切口处以ー适当大于伤口的培养皿覆盖,周围以温生理盐水纱布围绕,以保持肠段一定的温度与湿度。开动计时钟,记录套叠还纳的时间,并观察肠蠕动情况。设定lh内不还纳作为永不还纳。(四)观察结果肠套叠还纳时间及肠蠕动记录表对照组肠内给药组耳静脉给药组切断迷走神经组还纳时间肠蠕动情况(五)分析讨论1.肠套叠是怎样被解除的?
581.马价丸解除肠套叠的作用途径是什么?二十五、川贝母的止咳作用(一)目的观察川贝煎液对豚鼠用枸掾酸引咳后的止咳作用。(二)准备1.动物豚鼠(体重相近,每只不超过200g)。2.药物1:1川贝液、17.5%枸椽酸、生理盐水。3.器材磅秤,喉头喷雾器,带盖玻璃缸,1ml注射器(消毒),酒精棉球,秒表。(三)方法和步骤1.豚鼠称重后,观察正常状态下的呼吸数。2.实验豚鼠每100g体重0.5ml1:1川贝母煎液,ロ服,对照豚鼠100g体重0.5ml生理盐水,ロ服。3.ロ服30min后,实验组和对照组豚鼠同时放入玻璃缸内,用喉头喷雾器将17.5%枸椽酸向缸内喷雾2min。(四)观察结果观察两组5min内的咳嗽次数,记入下表中。组别体重实验前咳嗽次数喷雾后咳嗽次数实验组对照组(五)分析讨论从实验结果分析1:1川贝液对豚鼠用枸椽酸引咳后的止咳作用,并进行评价。二十六、杏仁及枇杷叶的平喘作用(-)目的观察杏仁煎液及枇杷叶煎液对豚鼠以组织胺引喘后的平喘作用。(二)准备1.动物豚鼠(体重相近,每只不超过200g)。2.药物!:1杏仁煎液、1:!枇杷叶煎液、0.4%组织胺、2%氯化乙酰胆碱、生理盐水。3.器材磅秤,喉头喷雾器,带盖玻璃缸,1ml注射器(消毒),酒精棉球,毛巾,秒表。(三)方法和步骤1.豚鼠称重后,观察正常状态下的呼吸数。2.将豚鼠放入玻璃缸内,加盖后,并以毛巾塞严缝隙,用0.4%组织胺加2%氯化乙酰胆碱混合液喷雾5s后,取出豚鼠,观察豚鼠的呼吸数及异常表现。
591.实验组豚鼠每100g体重口服1:1杏仁煎液或1:1枇杷叶煎液各0.5ml。对照组豚鼠每100g体重口服生理盐水0.5ml。2.服药后30min,两组豚鼠同时放入缸内,按上法喷雾引喘。(四)观察结果观察实验组及对照组豚鼠的呼吸数及异常表现,记入下表中。组另リ体重实验前呼吸数实验后呼吸数及异常表现杏仁煎液枇杷叶煎液对照组(五)分析讨论从实验结果分析杏仁煎液及批杷叶煎液的平喘作用,并进行评价。二十七、独活及秦先的止痛作用(-)目的观察独活、秦芫等祛风湿药的止痛作用。(-)准备1.动物家兔。2.药物1:1独活煎液、1:1秦无煎液、饱和氯化钾液。3.器材痛阈测量仪(頫ー9型,5ml或10ml注射器,兔保定架,磅秤,秒表,剪毛剪,酒精棉球。(三)方法和步骤1.将兔称重后,按站立姿势固定在网架或保定架上,在耳外缘内侧剪毛后接上测痛电极(上端电极浸生理盐水,下端电极浸饱和氯化钾液),测痛3次(每次30s),每次间隔Imin,取3次痛阈平均数作为实验前家兔痛阈值。2.按每kg体重3ml耳静脉注射100%独活液,注射后每隔lOmin测痛1次,共测3次。3.另取家兔,按每kg体重3ml耳静脉注射100%秦芫液,注射后每隔lOmin测痛1次共测3次。(四)观察结果注射药物实验前痛阈值(mA)实验后痛阈变化(mA)lOmin20min30min40min50min独活煎液秦无煎液计算lOmin、20min、30min、40nlin、50min后痛阈提高百分率。计算方法:痛阈提高百分率=(实验后痛阈值ー实验前痛阈值)/实验前痛阈值X100%(五)分析讨论分析所得结果,并评价独活及秦先的止痛作用。
60二十八、五苓散的利尿作用(-)目的通过本实验,主要观察五苓散的利尿作用,以加深对利湿方药功效的理解。(二)准备1.动物选同一品种健康家兔,体重相近,约2kg左右。雌雄各2只。2.药物3%异戊巴比妥钠注射液或25%氨基甲酸乙酯,生理盐水,将五苓散(猪苓3份、茯苓3份、泽泻4份、白术2份、桂枝2份)制成1:1煎剂。3.器材磅秤,兔手术台,常规手术器械(套),塑料导尿管(用市售18号无毒聚氯乙烯医用塑料管代替),10ml玻璃注射器及针头,剪毛剪,烧杯,缝合丝线,记滴器或秒表。(三)方法和步骤1.3%异戊巴比妥钠注射液作耳静脉麻醉家兔(0.8ml/kg),或25%氨基甲酸乙酯(lg/kg)做耳静脉注射麻醉。将兔仰卧保定于手术台上。2,在下腹部剪毛(约ー掌大的面积),于近耻骨联合上缘,沿腹中线旁开约0.5cm处,做7cm的腹壁切口,开腹找出膀胱(若充满尿液,可用手轻轻压迫使之排空)。在膀胱底部前3〜4cm处,用小止血钳剥离出两侧输尿管,右手持眼科剪在输尿管上剪开ー斜向创口(剪ロ为输尿管的1/2,再将一根充满生理盐水的细塑料导尿管向肾脏方向插入2cm,然后用缝合线结扎固定。再以同样方法将对侧输尿管也插入塑料导管。最后将两支塑料导管的游离端合并在ー起,使其开口向下,固定于手术台的ー侧,尿液即由导管慢慢滴出。下面放烧杯,收集尿液。腹部手术创ロ用浸有温生理盐水的纱布覆盖。其余3只家兔也进行同样的手术。3.尿液记滴有两种方法。其ー,将塑料导管开口连接于记滴器上,自动记滴;其二,人工记滴,即从导尿管排出第一滴尿液的时间算起,计数5min内排出的滴数(或排出3滴尿液所用的时间,也可做为ー种记数方法),作为实验用药前泌尿指标的自身对照。4.分组,2只为实验组(雌雄各1只),实验前对尿液记滴,然后用注射器向小肠内注射五苓散煎剂(5ml/kg),给药后每隔15min观察1次,连续观察60min»另外两只兔为对照组,用生理盐水(5ml/kg)注于小肠,做对照,观察记数方法同实验组。(四)观察结果项目给药前尿量给药后尿量组别各兔尿量平均值各兔尿量平均值实验组1号2号对照组3号4号观察实验组与对照组,给药前后的尿量变化,并记录填入上表内。(五)分析讨论根据实验结果,分析并讨论五苓散的利尿作用。
61二十九、理气药对离体肠管的作用(-)目的观察了解枳实、青皮、木香和槟榔对离体肠管蠕动的影响作用。(二)准备1.动物家兔。2.药物50%枳实煎剂,10%青皮煎剂,50%木香煎剂,10%槟榔煎剂,硝酸毛果芸香碱,硫酸阿托品,台氏液。3.器材电动记纹仪,描记笔杆,记时器,麦氏浴皿,L形管,球胆,万能夹,石棉网,酒精灯,螺旋夹,温度计,恒温水浴,烧杯,平皿,缝针,剪刀,綴子,滴管,铁台,双凹夹,乳胶管。(=)方法与步骤1.离体兔肠的实验装置于实验前调节水浴锅,使温度保持在38±0.5'C,在水浴锅内的麦氏浴皿中盛50ml台氏液,另将橡皮球胆充满空气(氧气),连接一通气管,备用。2.离体兔肠肌的制备取健康兔ー只,击头致毙,剖开腹腔,找出邻近胃的十二指肠(或近阑尾处的回肠),用剪剪下数段,每段长约1.5〜2cm,浸入一盛有38±0.5'C台氏液的平皿中,将一端用小镒子轻轻夹住,用玻璃吸管以台氏液将肠段内冲洗干净,然后将肠段内一端用线扎紧并结ー小环,以便将肠固定于通气管上,另一段用丝线结紧,以便将丝线连接于描笔上,置于盛有台氏液的麦氏浴皿中,观察并描记实验前肠管蠕动情况。然后向麦氏浴皿中滴入10%青皮煎剂0.2〜0.4ml,观察肠蠕动情况,并进行描记。Imin后用38℃台氏液冲洗麦氏浴皿中的液体。待肠蠕动恢复后,向麦氏浴皿中滴入2%硝酸毛果芸香碱0.8〜0.9ml,描记肠蠕动,洗之再滴入10%青皮煎剂0.5〜0.7ml,观察并记录结果变化。如上法分别作枳实、木香煎剂的实验。每换ー种试验煎剂应另取一段肠管。使用槟榔煎剂后不滴入毛果芸香碱而改用阿托品试验。(四)结果观察整理肠蠕动的强度、次数、时间等数据。(五)分析讨论比较各药对离体肠管蠕动的影响。三十、理气药对在体肠管运动的影响(一)目的了解厚朴、枳实等健脾理气药对动物肠管运动的影响,以验证健脾理气药的药理作用。(二)准备1.动物豚鼠(体重0.5〜1kg)。2.药物5%厚朴煎剂,50%枳实煎剂、厚枳合剂(系以上2药液的等份混合液)、1%戊巴比妥钠液,台氏液。3.器材万能支柱,漏头架,石棉网,双凹夹,烧瓶夹,豚鼠固定板,线绳,剪刀,
62镜子,酒精灯,温度计,500nli烧杯,1ml注射器,天平,台秤,秒表。(三)方法和步骤1.取豚鼠,称量体重后,按0.3〜0.4ml/100g体重腹腔注射1%戊巴比妥钠液,并仰卧固定于固定板上。2.待麻醉后,切开腹壁,使肠管外露;翻转木板,并固定于支柱上,使肠悬垂于37〜38℃恒温台氏液中。3.观察肠管正常蠕动情况,作记录;先向小肠内注入台氏液0.5〜1ml,观察肠蠕动有无变化?作为对照;再向小肠注入50%厚朴煎剂(或枳实煎剂、厚枳合剂)0.5〜1ml,观察肠管蠕动有何变化?分别作好记录(记录时按肠管每Imin平均蠕动次数统计。)(四)观察结果实验结果记录于下表中。项目正常情况台氏液厚朴煎剂枳实煎剂厚枳合剂蠕动次数持续时间(五)分析讨论1.健脾理气药厚朴、枳实的药理作用如何?2.厚朴、枳实煎剂对肠管运动的影响如何?3.厚枳合剂对肠管运动的影响如何?并与各单味药剂对比观察,作出判断。三十一、健脾理气散对瘤胃内环境的影响(-)目的通过瘤胃纤毛虫的计数和瘤胃发酵强度的观察,了解健脾理气散对瘤胃部分内环境的影响。(二)准备1.动物牛或羊2.药物5%福尔马林,30%廿油,液体石蜡,碘酊,酒精,健脾理气散(白术30g、茯苓60g、槟榔30g、甘草30g、麦芽60g、神曲60g,前4味药煎水,候温冲麦芽、神曲)。3.器材胃导管,100ml注射器及其针头,纱布,显微镜,锥形瓶,20和1ml的吸管,乳糖发酵管,纤毛虫计数室(南京农业大学制)等。(三)方法和步骤1.纤毛虫计数(1)采样通常取瘤胃液进行纤毛虫计数。无论用胃导管或注射器或从瘤胃瘻管中抽取瘤胃液,都应固定部位,尤其是要固定时间采样,灌药前采1〜2次,灌药后24h、48h各采1次。用胃导管采样时,尽可能使导管插至瘤胃背囊,若靠前庭区过近往往在样品中混有较多的唾液,则应弃之重做。采样量在牛至少200ml,羊20〜50ml即可。
63(2)样品处理以4层纱布将瘤胃液滤于锥形瓶中,轻轻旋转并反复倒转数次,以使纤毛虫分布均匀,然后迅速地吸取20ml置于另一锥形瓶中,加入等量的50%福尔马林,此时样品被稀释1倍。按前法使之混合均匀,从中吸取1ml置于盛9ml30%甘油溶液的试管中,此时样品被稀糅为20倍,作为供检样品。(3)镜检计数:用手握住盛有待检样品的试管,堵住管口,慢慢地反复倒转8—10次,使其混匀。以大口滴管从试管中央吸取1ml样品,均匀地滴入计数室,静置片刻,在低倍镜下计数。在计数室不同代表部分,观察20个视野,计算纤毛虫总数(A),并求出每个视野(即1mm"体积)中纤毛虫的平均数(B),最后按下式公式计算出1ml瘤胃液中的纤毛虫数。BX20X1000=lml瘤胃液中的纤毛虫数。也可直接写成AX10ソ1ml瘤胃液。每个样品应做两次计数,以其平均值代入上式。如果计数室有改进,可按其说明进行计算。1.瘤胃液发酵强度变化观察(1)采样同纤毛虫计数。(2)发酵强度观察瘤胃液采得后,随即取10ml置于!0ml乳醜发酵管中,并滴入适量液体石蜡,以隔绝空气,置37〜40℃温箱中培养24h,观察其产气量,即发酵强度。(四)观察结果1.灌药前瘤胃液纤毛虫数和发酵强度如何?2.灌药后瘤胃纤毛虫总数和发酵强度有何变化?三十二、川号煎液对蛙肠系膜血管的影响(-)目的通过观察川号煎液对蛙或蟾除肠系膜血管状态的影响,帮助理解理血药的活血化瘀作用。(二)准备1.动物蛙或蟾蛛2只。2.药物1:1川苜煎液,生理盐水,任氏液。3.器材药物天平,有孔蛙板,探针,大头针,眼科镶,眼科眼科剪,普通生物显微镜,接目测微器,玻璃注射器(2〜5ml)。(三)、方法和步骤1.将2只蛙或蟾蛛称重后,用探针破坏脊髓,分别仰卧固定于蛙板上。使右侧腹壁靠近蛙板孔。于右腹部打开腹壁,轻轻拉出小肠伴。将肠系膜展开,小心地铺在蛙板的孔上。注意不要牵拉太紧,以防撕破肠系膜血管或阻断血流。然后用大头针固定蛙的四肢,以及肠系膜。2.将蛙板固定于显微镜的载物台上,物镜对准肠系膜,在低倍镜下寻找ー・条血流通畅且明显的血管,观察并用接目测微器测定血管的直径(外径),注意血流速度。将数据记录于表内。实验观察过程中,不时用任氏液湿润肠系膜,以防干燥,影响血流。
642.取1只蛙(或蟾蛛)在皮下淋巴囊内注射川茸液(0。5ml/10g体重),另1只蛙注射生理盐水。注射后每隔5min观察血管直径和血流速度,将结果记录于表内。(四)观察结果观察注射药液前后,血管口径及血流速度变化,记录下表内,并绘制血管口径变化曲线图。(五)分析讨论根据实验结果,分析讨论川芳的活血化瘀作用。组别注药前血管口径注药后不同时用血管口径5,10t15t20t25,30r35f40i45i50注药蛙(或蟾蛛)注生理盐水蛙(或蟾蛛)三十三、桃红四物汤对离体子宫的影响(-)目的通过实验了解当归、红花与桃红四物汤等活血通经药物对子宫的作用及其临床意义。(-)准备1.动物未孕家兔4只,以发情母兔为最佳,怀孕家兔不宜选用。2.药物洛氏液1000ml(秤取氯化钠9g、氯化钾0.4g、无水氯化钙0.1g、碳酸氢钠0.2g、葡萄糖1g。在配制洛氏液时,应首先将氯化钙完全溶解后方可加入,否则将会产生沉淀,影响实验效果。)50%的桃红四物汤煎剂:桃仁、红花、当归、川茸、赤芍各!5g,生地25g,共计生药100g,加水30mL煎沸2次,每次30min,浓缩至200ml,冬天置于室内,次日仍可使用,夏天放入冰箱备用。同样制备20%的红花煎剂与20%的当归煎剂各100m!〇另取麦角新碱注射液(每1ml含麦角新碱0.3mg)1盒。3.器材同离体肠管试验。(三)方法和步骤1.取实验动物,用颈椎脱臼法处死,剖腹取出子宫,立即置于盛有洛氏液的玻璃平皿中,轻柔剥离附着于子宫壁上的结缔组织和脂肪组织。将一侧子宫的两端分别用线结扎,一端固定,另一端与描记杠杆连接。2.先记录正常运动曲线,然后分别加入实验药物。从0.1ml开始,最后加至1ml。反应达到最明显之后,更换新鲜洛氏液,静置适当时间可重复试验。3.营养液的选择是关键,多种动物的子宫离体标本对台氏液不够敏感,最常用的是洛
65氏液。除了营养液的选择外,气体与温度也是影响离体实验成败的关键因素。(四)观察结果观察子宫的正常收缩,与用药后的变化。主要指标有张カ(以各次收缩之间的最低点表示);强度(幅度)以每次收缩所达到的最高点表示;频率,每lOmin收缩的次数;子宫活动カ(以强度和频率的乘积表示)。(五)分析讨论分析上述4种药物对子宫的作用有何特点?结合兽医临床用药有何实用价值?三十四、延胡索乙素的镇痛作用(一)目的镇痛实验可作为镇痛中药的筛选和发现新的止痛药。现有的镇痛试验法很多,热板法和酒石酸睇钾刺激法是易做的两种。通过实验以掌握实验方法和结果的判定。(二)准备1.动物小鼠(14〜20g)2.药品延胡索乙素注射液,30%安乃近注射液,生理盐水,0.05%酒石酸睇钾溶液。3.器材热板水浴,温度计,注射器,针头,酒精灯,烧杯(200ml、50ml),钟罩,天平。(三)方法与步骤先做热板法,后做酒石酸睇钾刺激法。每组进行分エ,一人负责保持温度,一人看表,一人记录。每组取小鼠4只,分别称重,编号,作好记录。1.热板法在ー恒温水浴箱内,放一个导热的铝碗或铜碗,水温保持于55℃,取平均值,记室温。将欲试小鼠放入铜碗或铝碗中,立即按秒表记录时间,从开始置入时至小鼠由于痛感而舐后肢为止的时间为痛阈。正常小鼠,一般在放入后10~20s内,开始有不安状态,可能有举前肢、踢后肢、跳跃等。但这些动物不易确定。最后是舐后脚,即以此动物为痛觉的指标,并立即记录时间,将鼠取出。用此法挑选反应在40s内的小鼠4只。合适小鼠选出后,再每隔2.5min依次测小鼠正常痛阈值一次,将4只小鼠所得两次正常痛阈值平均后,作为给药前痛阈值。给药及给药后的痛阈测定:将称好体看的小鼠作记号,按下列药物及剂量计算各鼠所需的药液,再依次每隔2.5min,分别给予下列药物。第1鼠:腹腔注射延胡索乙素注射液0.2ml第2鼠:腹腔注射延胡索乙素注射液0.4ml第3鼠:腹腔注射3%安乃近注射液0.2ml第4鼠:腹腔注射生理盐水0.2ml注射完毕,仍依次每隔2min测定各组痛阈值(如60s内仍无反应者,亦应把鼠取出作为阴性,因时间太久会把脚烫坏)。每鼠每隔lOmin观察药物作用一次,直到用药后lh为止。记录实验结果。
66给药及给药后测定全部操作时间的安排时间操作时间操作0,第1鼠给药12.5,第2鼠测定2.5'第2鼠给药15,第3鼠测定5.0’第3鼠给药17.5,第4鼠测定7.5'第4鼠给药20'第1鼠测定10'第1鼠测定根据全组实验结果,按下列公式计算不同时间的痛阈提高百分率。痛阈提高百分率%=(用药后平均反应时间一用药前平均反应时间)/用药前平均反应时间X100根据每组不同时间的痛阈提高百分率作图,横坐标代表时间,纵坐标代表痛阈提高百分率,画出各组的曲线,比较各药的镇痛强度、作用开始时间及维持时间。实验室温度ー鼠サ体重药1111剂量痛觉反应时间用药前(正常)用药后12平均10/203040/50602.酒石酸铀钾刺激法取体重14〜19g小鼠20只,分为2组,每组10只,一组皮下注射被试药液(延胡索注射液)0.2ml»另ー组注射生理盐水作对照。lh后,二组小鼠每只腹腔注射。.05%酒石酸睇钾溶液0.2ml,观察lOmin左右,如出现歪扭现象(间歇地收缩,・侧腹部扭歪,躯干或腹部下凹伸张后腿),说明酒石酸睇钾刺激引起小鼠痛觉反应。记录反应动物数/动物总数的比例。计算每组反应百分率,二组对比,如给药组的反应百分率小于对照组的反应百分比率在30%以上者,一般即认为这种药物有镇痛作用。当实验组与对照组动物数相等时,其镇痛百分率用下式计算:行ー,・ハセ实验组没反应的动物数一对照组没反应动物数镇痛百分率=实验组动物数一对照组没反应的动物数kI。。%(四)观察结果分别写出热板法的痛阈提高百分率和酒石酸镖钾法的镇痛百分率。(五)分析讨论
67对延胡索的镇痛作用作出评价。三十五、赤芍的活血化瘀作用(-)目的通过赤芍复钙时间的测定,了解赤芍活血化瘀的部分作用。(二)准备1.药物20%赤芍煎液(pH7),生理盐水,0.025M氯化钙,血浆(牛)。2.器材试管(10X100mm),吸管(1ml),恒温水浴箱,试管架。(三)方法和步骤1.取试管11支,按次序排列,自第2管起,每管加入生理盐水0.2ml,再取20%赤芍分别加入第1,2管各0.2ml。2.从第2管的混合液中吸出0.2ml,放入第3管,这样依次稀释至第10管,从第10管中吸出0.2ml混合液弃之。第!1管为対照管。3.从第1管至第11管,每管各加入0.2ml血浆后将各管置于水浴箱,经37℃恒温孵育30min,然后每管再加入0.025M氯化钙0.2ml,分别记录每管的凝固时间。4.以上试验重复3〜5次,取其平均值。(四)观察结果20%赤芍煎液加血浆后的复钙时间测定结果试管编号12345678910对照药物稀释倍数20%原液248163264128256512生理盐水时间(五)分析讨论为什么会出现以上的不同凝固时间?三十六、外用止血药比较(-)目的了解外用药止血试验的・些方法;观察药物的止血效果。(-)准备1.动物家兔,小白鼠。2.药品生蒲黄、蒲黄炭、活性炭、桃花散、云南白药、地榆炭,2%戊巴比妥钠。3.器材兔固定台,剪刀,手术刀,持针钳,止血钳,银子,缝线,纱布,棉花,注射器,针头,秒表,小白鼠固定管等。(三)方法和步骤实验分四组进行。每组人员分工:手术2人,记录1人,观察止血效果1人,记时1人,做准备工作1人。每组取兔1只,用2%戊巴比妥钠水溶液(每kg体重3〇〜40mg)耳静脉注射,麻醉后,将兔固定于兔手术台上,进行如ド试验。
681.切除部分肝组织止血试验剪去腹底部毛后,自腹中线切开5〜7cm,注意不要切破横膈。术者用手轻轻拉出肝脏,周围用生理盐水纱布填贴固定,以防肝脏缩回腹腔,但不可固定太紧,以兔影响肝脏血液循环。为使实验统ー标准,故先用硬质料剪成2cmXl.3cm长方形ー块,将它贴于肝表面,用利刀沿其四周迅速下刀,深度控制在0.4〜0.6cm,用有齿綴子提起后,迅速切取此肝组织,创面要见到血液涌出(最好统一能切到有小动脉涌射出血),迅速将被试药(如果用粉剂,则直接撒于布上;如果用注射剂,则将注射剂浸透纱布贴敷)敷于创面,同时按下秒表,如创面没有射血或渗血现象即为止血。记载止血时间。2.兔股动脉全切断试验本试验主要是练习方法,所以可用做过肝切除术的兔继续进行。将已止血的肝还纳入腹脸,用止血钳钳封腹切口。于兔的鼠蹊部和股内侧剪毛,切开皮肤,分离,充分暴露出股动、静脉,可将左右两侧同时分离暴露,ー侧为试验组,ー侧为对照组,记时人下令后,左右二侧股动静脉同时全切断,分别同时敷卜.试验药及对照药(如试验药为粉剂,对照药也须是等量的粉剂,如试验药为注射剂,则用纱布浸透贴敷,对照药也用纱布浸药,空白対照可用生理盐水纱布),比较观察测定止血时间。3.鼠断尾试验选择同样大小、尾的粗细相仿的小鼠每图4—5小鼠固定示意图组6只,装入小鼠固定管内(如图4—5).每鼠尾按同一距离(距尾根)作上标记,记时人下令后,同一时间剪下标记处的鼠尾,分别按上供试药品,记录止血时间。解释上述结果,对止血效果作出评价。三十七、补气方药对脾虚小鼠的作用(~)目的观察党参、黄芭、四君子汤对脾虚小鼠模型的补气作用。
69(二)准备1.动物健康小鼠(18〜20g)。2.药物党参、黄黄、白术、甘草、大黄、芒硝、厚朴、枳实、番泻叶、生理盐水。3.器材鼠罐,小鼠灌胃管,天平,温度计、綴子、锅,电炉,毛剪。(三)方法和步骤1.脾虚小鼠模型的准备(1)将大黄、芒硝、厚朴、枳实按1:2:1:1的比例配伍,煎成每1ml含生药1g的大承气汤备用。将蕃泻叶以沸水冲后浸泡8h过滤,使之每1ml含生药0.3g备用。将党参、白术、茯苓、甘草按5:2:2:1的比例配伍,煎成每1ml含生药2g的四君子汤备用。将党参煎成1:1煎剂。将黄黄煎成1:1煎剂。(2)将小鼠随机分成3组:第1组每天每只灌服大承气汤0.5ml;第2组每天每只灌服蕃泻叶液1ml;第3组毎天每只灌服生理盐水1ml作对照。各组均连续灌服5-7天。(3)在灌药开始日起每天或隔日每只小鼠均测体帀和体温ー次。每天观察小鼠的精神、食欲、粪便及肛门、四肢活动及被毛情况,・直观察到脾虚模型判定标准症状出现为止(体重、体温下降、食欲减退、精神萎靡,便软或泄泻、四肢无カ、及被毛失泽或蓬乱等)。(4)将上2组小鼠分别与对照组作游泳、耐缺氧或耐寒冷试验。(5)将脾虚小鼠分成4组:第1组每天每只灌服100%党以煎剂0.5ml,第2组每天每只灌服100%黄黄煎剂0.5ml;第3组每天每只灌服四君了汤0.5ml;第4组每天每只灌服生理盐水0.5ml作对照。上述药物均连续灌服3~5天。(四)观察结果将观察结果记入下页表中。(五)分析讨论通过本试验观察结果,说明党参、黄黄和四君子汤的补气作用。1,体重变ペ/组别只数开始时均值(g)第3天均值(g)第5天均值(g)第7天均值(g)大承气汤组番泻叶组对照组2•体温变化组另リ只数开始时均值(℃)第3天均值(℃)第5天均值(℃)第7天均值(℃)大承气汤组番泻叶组对照组3.其它观察组另リ只数精神食欲粪便及肛门四肢被毛其它
70大承气汤组番泻叶组对照组4.耐疲劳试验比较组另リ只数平均游泳时间大承气汤组番泻叶组对照组5.耐寒冷试验比较组另リ只数平均死亡时间大承气汤组番泻叶组对照组6.耐缺氧试验比较
71组另リ只数平均死亡时间大承气汤组番泻叶组对照组7.灌服补虚药过程中体重变化组另リ只数开始时均值(g)第3天均值(g)第5天均值(g)注党参组黄黄组四君子汤组对照组8.灌服补虚药过程中体温变化组另リ只数开始时均值CC)第3天均值(℃)第5天均值CC)注ーニーrrrj纟纟勿纟参ま吊照党黄恒对9.灌服补虚药过程中其它观察组另リ只涼精神食欲粪便及肛门四肢被毛其它党参组黄黄组四君子汤组对照组三十八、参麦注射液对兔急性心肌缺血的疗效观察(一)目的了解血.虚病理模型的制作方法。并观察参麦注射液对血虚动物的治疗作用。(-)准备1.动物家兔6只,每组1只。2.药物参麦注射液为人参、麦冬提取制成的灭菌水溶液,每1ml相当于人参、麦冬生药各01g,每盒10x2ml。3.器材心电图仪,兔解剖台板,剪刀,注射器,12号针头,保定麻绳,酒精棉球。(三)方法和步骤1.选择健康家兔,可不麻醉,体息30min描记心电图。2.试验时将家兔背位固定于解剖台上,待安静后,先测其正常心电图。然后在左心区剪毛,消毒,以12号针头一次插入左心室抽全血1/3。lOmin后,再测心电图,测后30min观察记录其精神、结膜、体温、呼吸、心跳等,并按编号1〜5号分别于耳静脉注射参麦注射液2ml,6号兔不注射药为对照,连续注射3日,每日1次。停药3日后再作心电图,并观察记录精神、结膜、体温、体帀、心跳、呼吸等变化。
72(四)观察结果各实验组按下列要求将所测数据分别填入表内。家兔实验セ三心即,缺血记录表组别动物编号时间体重体温心跳呼吸结膜精神心电图波形苍白淡红潮红试验组试前抽血后10~30min抽血后6d对死,、、、组试前抽血后1〇〜30min抽血后6d(五)分析讨论1.家兔心电图描记,试前试后T波波形有何变化?为什么?S-T段是否下降?用药后是否有变化?为什么?2.参麦注射液治疗急性心肌缺血的机理何在?属于何种补益方药?三十九、甘草甜素对破伤风杆菌毒素的中和作用(-)目的通过甘草甜素(Glycyrrhizin)对破伤风杆菌毒素的中和作用实验,说明甘草的解毒作用。(二)准备1.动物健康小鼠,体重14〜15g。2.药物破伤风杆菌毒素,精制破伤风抗毒素,甘草甜素(林启寿著:《中草药成分化学》方法)。3.器材鼠笼,恒温箱,试管架,试管,1ml注射器,注射针头,酒精棉球。(三)方法和步骤1.测定破伤风毒素对小鼠的最小致死量。(原书如此)将小鼠按每组2只分为若干组,设阴性对照组及测毒组。测毒组分别以不同稀释度的破伤风毒素每只小鼠股内侧皮下注射0.2ml,于注射后12、24、……120h观察小鼠反应情况,每天上、下午各1次。从注射毒素起,120h内阴性对照组全部健活,以测毒组小鼠全部死亡的最大稀释度为破伤风毒素对小鼠的最小致死量。详见表4—1、2、3。表4—1破伤风毒素对小鼠最小致死量的测定毒素稀释度注射剂量(ml/只)观察结果(2只/组)IO”0.212h后小鼠痉挛,强直死亡1030.212h后小鼠痉挛,强直死亡10412h后小鼠痉挛,强直死亡
7310夕0.236h后小鼠痉挛,强直死亡1060.2120h后小鼠处于濒死状态若测定如上表得出其最小致死量在105〜IOイ之间,再取105〜10”之间的10个不同稀释进行试验,如表4—1所示。由表4—2得出其最小致死量在5乂10ー5~6メ105之间,故又进行下列稀释度的测定,如表4—3«鉴于毒素的毒力与保存时间的关系,经反复测毒,选择了3个结果较稳定的毒量,作为不同存在时间该毒素对小鼠的最小致死量,即(分数变小数可以)3245~xlO5x0.2zn/,4《xl(y'x0.2〃“,3~xl05x0,2m/表4一2破伤风毒素对小鼠最小致死量的测定毒素稀释度注射剂量(ml/只)观察结果(2只/组)1050.236h后小鼠痉挛,强直死亡2X1050.236h后小鼠强直死亡1只,48h后强直死亡1只3X1050.236h后小鼠强直死亡1只,60h后强直死亡1只4X10-50.248h后小鼠出现痉挛现象,84h后全部强直死亡5X1050.260h后小鼠出现痉挛现象,110h后全部强直死亡6X1050.272h后小鼠出现痉挛现象,110h后强直死亡1只7X1050.272h后小鼠出现痉挛现象,110h后全部处于濒死状态8X1050.284h后小鼠出现痉挛现象,120h后1只处于濒死状态84h后小鼠出现痉挛现象,120h后1只处于濒死状态9X1050.210*0.284h后小鼠出现痉挛现象,120h后1只处于濒死状态表4―3破伤风毒素对小鼠最小致死量的测定III毒素稀释度注射剂量(ml/只)观察结果(2只/组)5X1050.260h后小鼠出现痉挛现象,110h后全部强直死亡10.260h后小鼠出现痉挛现象,110h后全部强直死亡5-X10525-X1050.260h后小鼠出现痉挛现象,110h后强直死亡1只,120h后强直死亡1只355-X1050.260h后小鼠出现痉挛现象,110h后强直死亡1只,120h后强直死亡1只40.272h后小鼠出现痉挛现象,120h后强直死亡1只5-xion6X1050.284h后小鼠出现痉挛现象,120h后强宜死亡1只(四)观察结果
74表4—4甘草甜素对破伤风毒素的体外中和试验组别注入剂量(ml/只)观察结果(10只小鼠/组)3毒素稀释5sxi0,其它成分I破伤风毒素0.2生理盐水0.2II破伤风毒素0.2甘草甜素0.2III破伤风毒素0.2精破抗(0.lm/ml)0.2IV生理盐水。.4(五)分析讨论根据甘草甜素对破伤风毒素的体外中和作用试验,讨论甘草的解毒作用及其临床应用价值。四十、酸枣仁与远志的安神作用(-)目的观察酸枣仁(Zizyphusjujuba)和远志(Polygalatenuifolia)对小鼠的安神作用。(二)准备1.动物小鼠。2.药物50%酸枣仁水浸液,50%远志煎液,生理盐水。3.器材1ml注射器,玻璃钟罩,电铃,鼠笼,镒子,小烧杯。(三)方法和步骤1.将小鼠分批放在装有电铃的玻璃钟罩内,任其自由活动,注意观察活动状况。2,接通电源,待电铃响0.5〜Imin后关闭电源,将出现有转圈、倒卧、抽搐或惊厥的小鼠挑出。3.将出现转圈、倒卧、抽搐或惊厥的小鼠待lOmin后恢复正常时,分别腹腔注射50%酸枣仁水浸液、50%远志煎液各0.4ml,对照组腹腔注射生理盐水0.4ml。待2〜3min后,重复上述电铃刺激。(四)观察结果注意观察给药的两个组和对照组的活动状况,作记录并作比较。(五)分析讨论描述给药前后小鼠的活动状况,并分析安神药的作用。四十一、桃花散对炎性渗出物吸收的影响(-)目的观察桃花散对炎性渗出物吸收的影响,为临床应用提供有关数据。(二)准备1.动物健康同性大鼠。2.药物桃花散,乙醛,1%灭菌巴豆油(用大豆油稀释),0.1%硝酸土的宇溶液,磺胺粉。
751.器材剪毛剪,5%碘酒,注射针头,缝合线,脱脂棉,注射器等。(三)方法和步骤1.用乙酸将大鼠麻醉,剪去肩胛至背部背毛,碘酒消毒,用消毒的注射针头向肩胛间皮下注入空气2ml,针头不拔,随即注入1%灭菌巴豆油1ml。2.24h后,将注射部位(炎灶中心)切开皮肤约7mm,撒入桃花散,注意要撒匀,并记录时间,缝合后观察30min。3.另选取按方法1同样处理过的大鼠,用同2的方法切开小孔后撒入磺胺粉,记录时间,缝合后观察30min。4.用0.1%硝酸土的宁溶液,分别注入炎性灶内。5.将硝酸土的宁溶液注入炎性灶内作为对照组。6.准确记录注射硝酸土的宁的时间及大鼠死亡时间。并将创囊剖开,观察其病理变化。(四)观察结果组另リ死亡时间备注桃花散组磺胺组对照组(五)分析讨论桃花散対炎性渗出物的吸收有什么影响?四十二、大蒜的抑菌作用(-)目的初步了解大蒜中挥发性物质对炭疽杆菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、猪丹毒杆菌、沙门氏杆菌、痢疾杆菌的抑制作用,并掌握倒牛津杯法。(二)准备1.菌种炭疽杆菌,大肠杆菌,巴氏杆菌,猪丹毒杆菌,沙门氏杆菌,痢疾杆菌等标准毒株。2.培养基普通肉汤,普通琼脂平板。3.菌液用直径2mm的接种环取各菌种ー满环,分别接种于含普通肉汤培养基的试管里。37c培养!8-24h.4.大蒜汁无菌操作,将大蒜捣成汁或泥状。5.器材无菌"T”形玻棒,吸管,牛津杯或青霉素盖,镒子,酒精灯和封蜡等。(三)方法和步骤1.在普通琼脂平板的盖上的中央加一无菌牛津杯或倒置的青霉素瓶盖,并用石蜡固定。2.用无菌的吸管炭疽杆菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、猪丹毒杆菌、沙门氏杆菌、痢疾杆菌的菌液,分别滴于普通琼脂平板上(2滴),用无菌“T”字形玻棒将菌液抹匀。3.将大蒜汁0.2ml注入已经固定的牛津杯内或青霉素瓶盖凹陷内,或用无菌镒将大蒜泥填入
76其内,然后将已接种菌液的琼脂培养基倒置于盛有大蒜汁的培养皿盖匕切勿与牛津杯或青霉素盖相接触。放入37℃培养24h。另外,以同法注0.2ml无菌生理盐水于牛津杯内,以作对照。(四)观察结果培养24h后,观察并测定抑菌圈的大小。(五)分析讨论应用此法还能做哪些中药抑菌试验,为什么?四十三、洋金花制剂的麻醉效果观察(-)目的通过本试验,掌握中药麻醉一般操作技术,观察中药麻醉的效果及其特点。(二)准备1.动物可根据情况选用马、牛、羊、猪等。2.药物东萇若碱注射液,6%毛果芸香碱注射液,5%葡萄糖生理盐水注射液。3.器材各种注射器、手术常规器材等。(三)方法与步骤1.实验动物准备术前动物绝食!2~24h,手术部位去毛消毒,并检测体温、脉搏、呼吸等。2.麻醉先给动物肌肉注射氯丙嗪(马50〇〜700mg,牛50〇〜600mg,羊20〇〜250mg,猪100〜200mg)做基础麻醉。30min后将中麻II号(马0.4mg/kg,牛0.47mg/kg,羊0.17mg/kg,猪0.5mg/kg)加入5%葡萄糖生理盐水中,进行静脉滴注。经20〜30min诱导期动物即可倒地,角膜、肛门反射消失,针刺皮肤无反应,即可进行手术。3.手术根据情况可作切皮,开腹,肠管等不同手术。4.术后待动物自然苏醒。亦可用催醒剂6%毛果芸香碱(马、牛9〜14ml,羊猪2〜3ml)皮下注射,促其苏醒。(四)观察结果1.麻醉后应对动物表现及各系统生理活动进行观察,并将结果记录在下页表内。2.在手术过程中应根据动物的表现,作好麻醉效果的记录,做为判定麻醉效果的标准,可参照下列项目进行观察。(1)麻醉后多长时间动物倒地;(2)瞳孔是否散大:(3)肛门括约肌是否松驰:(4)针刺测痛的情况及范围;
771.记录麻醉的诱导期,麻醉期的时间,如用催醒剂,应记录注射后的变化。2.手术后应加强对动物的护理,并观察有无后遗症。(五)分析讨论通过实验分析中药麻醉效果,并讨论中药麻醉的优缺点。第五章针灸一、马属动物常用穴位取穴法(-)目的掌握马属动物常用穴位取穴的方法,以便准确定位,为临床应用奠定基础。(二)准备1.动物马(驴或骡)。2.主要器械针具,保定用具,马针灸穴位挂图。(三)方法和步骤现将常用穴位列举如下,并按照所述部位分别取穴。1.头颈部穴位(1)分水上唇外面,正中旋毛处,一穴。(2)姜芽鼻外翼的鼻翼软骨角顶端是穴,可先向对侧拉紧鼻唇部,鼻翼软骨角即可显露;左右侧各一穴。(3)玉堂门齿后方上腭第三棱中央两旁,即口内上腭第三腭褶正中旁开1.5cm处是穴,左右侧各一穴。(4)通关将舌拉出口外,向上翻转,紧握舌体,舌系带两侧的舌下静脉是穴,左右侧各一穴。(5)锁口口角后上方约2cm的口轮匝肌外缘处,左右侧各一穴。(6)开关口角后上方延长线与咬肌前缘交界处的凹陷是穴,左右侧各一穴。(7)三江内眼角下方3cm处的眼角静脉上是穴,左右侧各一穴。
78(8)太阳外眼角后方3cm处的面横静脉上,左右各一穴。(9)睛明下眼睑眼眶上缘,内外眼角间内、中1/3交界的凹陷处是穴,左右眼各ー穴。(10)睛俞上眼睑正中,眼眶下缘,左右眼各一穴。(11)开天眼球角膜与巩膜交界处下缘中点是穴。左右眼各一穴。(12)耳尖耳背侧距耳尖端约3cm,耳大静脉内、中、外三支汇合处是穴,左右耳各ー穴。(13)大风门头顶部,门鬃根部前方正中央骨棱上为主穴,主穴斜下方两侧3cm处为副穴,共三穴,呈三角形排列。(14)天门两耳根后方连线正中央枕骨崎后的凹窝中,一穴。(15)上关颤弓下方,下颌关节后上方凹陷中是穴,马咀嚼时该关节凹陷显著,左右侧各一穴。(16)下关下颌关节下方凹陷中是穴,左右侧各一穴。1.前肢部穴位(1)膊尖肩胛骨前缘,肩胛骨前角与肩胛软骨结合部的凹陷中是穴,左右侧各一穴。(2)膊栏肩胛骨后缘,肩胛骨后角与肩胛软骨结合部的凹陷中是穴,左右侧各一穴。(3)肺门膊尖穴前下方,肩胛骨前缘上、中1/3交界处是穴,左右侧各一穴。(4)肺攀膊栏穴前下方,肩胛骨后缘上、中1/3交界处是穴,左右侧各一穴。(5)弓子肩胛岗后方,肩胛软骨上缘正中点直下方10cm处是穴。左右各一穴。(6)抢风以中指按压肩端,拇指伸展向后按取,臂三头肌长头与外头之间的凹陷处是穴,左右侧各一穴。(7)肩井肩端臂骨大结节上部之凹陷,从肩端上按取,其近端凹陷中是穴,左右侧各一穴。(8)肘俞肘头直前方凹陷中是穴,左右侧各一穴。(9)胸堂胸骨两旁,胸外侧沟下部的臂皮下静脉上是穴,左右侧各一穴。(10)夹气腋窝正中是穴。左右肢各一穴。(11)乘重槎骨上端外侧韧带结节直下方肌沟中是穴。左右各一穴。(12)前三里前臂外侧上部,槎骨上、中1/3交界处的肌沟中是穴。左右各一穴。(13)三阳络在前肢槎骨外侧韧带结节下方约6cm处的肌沟中。进针角度为15-20度角,沿着橈骨后缘向内下方刺入1〇〜13cm,使针尖抵达夜眼皮下,以不穿透为度。左右各一穴。(14)缠腕球节上方外侧,筋前骨后的指(趾)外侧静脉上是穴,前肢者名前缠腕,后肢者名后缠腕,左右侧各一穴,共四穴。(15)蹄头蹄冠上缘前方稍偏外侧2cm(前蹄头),或正中(后蹄头),有毛无毛交界处,左右侧各一穴,共四穴。2.躯干部穴位(1)风门耳后二指,寰椎翼前缘正中凹陷处是穴,左右侧各一穴。(2)伏兔耳后四指,寰椎翼后缘凹陷中是穴,左右侧各一穴。(3)颈脉下颌骨角后下方4指处,颈静脉沟上、中1/3交界处的颈静脉上是穴,左右侧各一穴。(4)九委伏兔穴后方2指,鬣毛根部下方2指半处取ー委(上上委):膊尖穴前方3指,鬣毛根部下方4指处取九委(下下委);在此两穴之间,沿菱形肌下缘分为8等份,由前向后为二至八委(上中委、上下委、中上委、中中委、中下委、下上委、下中委),呈弧形排列。(5)大椎第七颈椎与第一胸椎棘突间的凹陷中,左右各一穴。(6)髻甲髻甲最高点前方4指,颈础线上方顶点处,一穴。(7)百会腰荐十字部中央凹陷处,一穴。(8)肾俞百会穴旁开4指处(约6cm)是穴,左右侧各一穴。(9)肾棚肾俞穴前方4指处是穴。左右各一穴。(10)肾角肾俞穴后方4指,距背中线四指处是穴,左右侧各一穴。(11)八窖荐椎各棘突间,背中线旁开4指处是穴,左右侧各四穴,由前向后分别称为上
79窖、次窖、中窖、下窖。(12)关元俞最后肋骨后缘上端的器肋肌沟中是穴,左右侧各一穴。(13)脾俞倒数第三肋间上端的骼肋肌沟中是穴,左右侧各一穴。(14)肝俞倒数第五肋间与肩端至臀端连线的交点上是穴,左右侧各一穴。(15)肺俞倒数第九肋间与肩端至臀端连线的交点是穴,左右侧各一穴。(16)带脉胸侧壁,肘头后方四4指的胸外静脉上是穴,左右侧各一穴。(17)穿黄胸前中沟两侧一指处的皮肤褶上是穴,左右侧各一穴。1.后肢及尾部穴位(1)巴山百会穴与股骨中转子连线的中点处是穴,左右侧各一穴。(2)路股百会穴与股骨中转子连线的中、下1/3交界处是穴,左右侧各一穴。(3)环中髄结节上端与臀端连线中点的肌沟中是穴,左右侧各一穴。(4)大胯股骨中转子前下方凹陷处是穴,左右侧各一穴。(5)小胯股骨第三转子后下方凹陷处是穴,左右侧各一穴。(6)邪气尾根切迹旁开线与股二头肌沟相交处是穴,左右侧各一穴。(7)汗沟邪气穴下方4指的股二头肌沟中是穴,左右侧各一穴。(8)仰瓦汗沟穴下方4指的股二头肌沟中是穴,左右侧各一穴。(9)掠草膝盖骨外下方,膝外、中直韧带之间凹陷处是穴,左右侧各一穴。(10)阳陵膝关节外后方,胫骨外課后上缘凹陷处是穴,左右侧各一穴。(11)后三里掠草穴后下方,小腿上部外侧,腓骨小头直下方肌沟中是穴,左右侧各ー穴。(12)肾堂股部内侧,膝关节水平线的隐静脉上是穴,左右侧各一穴。(13)后海肛门与尾根之间的凹陷处,一穴。(14)尾根尾根背侧,第一、第二尾椎棘突之间,在活动尾根时出现的凹陷处,一穴。(15)尾本尾根腹侧正中,距尾根四指的尾静脉上,一穴。(16)尾尖尾尖顶端,一穴。(四)分析讨论1.马常用穴位的取穴方法有几种?2.马常用穴位的主治?二、牛常用穴位的取穴法(一)目的掌握牛常用穴位的准确位置及取穴方法,以便准确定位,为临床应用奠定基础。(-)准备1.动物:牛。2.主要器材:针具,保定架,牛针灸穴位挂图及模型。(三)方法和步骤1.头颈部穴位(1)天门位于两角根连线正中后方的凹陷中,即枕骨外结节与寰椎之间凹陷处,正中一穴。(2)顺气位于口内上腭嚼眼处,即硬腭前部切齿乳头两旁的鼻腭管开口处,左右各ー穴。(3)舌底口内舌底腹面两侧血管上,舌系带前端两侧的舌下静脉上,左右各一穴。(4)睛俞位上眼眶的正中,即眶上突下缘正中,针刺眼睑与眶上突之间,左右各ー穴。(5)睛明内眼角外侧,两眼角内、中1/3交界处的下眼睑上,左右各一穴。(6)太阳外眼角后方的顕窝中,左右各一穴。(7)耳尖耳背侧,距耳尖3cm处的耳静脉上,左右各一穴。2.前肢穴位(1)膊尖位肩前部,肩胛骨前角与肩胛软骨连接处的凹陷中,左右各一穴。
80(2)膊栏肩胛骨后角与肩胛软骨连接处的凹陷中,左右各一穴。(3)肩井位肩关节部,臂骨大结节直上的凹陷处,左右各一穴。(4)抢风位臂骨三角肌隆起背侧的凹陷中,左右各一穴。(5)胸堂胸外侧沟下部的臂头静脉上,左右各一穴。(6)夹气位于腋窝内,刺入肩胛下肌与下锯肌间的疏松结缔组织内,左右各一穴。(7)前缠腕位掌部,球节上方,指深屈肌腱与骨间中肌肉,每肢左右各一穴。(8)涌泉前肢蹄叉正中,第三、四指的第一指节骨中部背侧面,左右各一穴。(9)前蹄头前肢蹄叉上缘两侧,有毛与无毛交界处,每肢内外侧各一穴。1.躯干及尾部穴位(1)三台背中线上,第三、四胸椎棘突间,一穴。(2)苏气背中线上,第八、九胸椎棘突间,一穴。(3)百会腰部背侧正中线上,腰荐十字部,即最后腰椎与荐椎之间接合部,一穴。(4)关元俞最后肋骨后缘与第一腰椎横突顶端间,在背最长肌与骼肋肌之间的肌沟中,左右各一穴。(5)脾俞倒数第三肋间,背最长肌与器肋肌之间的肌沟中,左右各一穴。即六脉的第一穴。(6)后海肛门与尾根之间的凹陷中,一穴。(7)尾本位尾的腹侧,尾根后约6cm处的尾静脉上,一穴。(8)尾尖尾尖腹侧,下有尾静脉,一穴2.后肢穴位(1)后通膊膝关节后方的凹陷中,左右肢各一穴(2)肾堂后肢股内侧的皮下隐静脉上,左右肢各一穴(3)掠草膝关节下缘稍外方,膝外、中直韧带之间的凹陷中,左右肢各一穴(4)后三里胫骨外課下方凹陷处,即趾外侧伸肌和第三腓骨肌的肌沟中,左右肢各ー穴。(5)后缠腕球节上方的趾屈肌腱与骨间中肌之间的凹陷处,每肢内外各一穴。(6)滴水后肢蹄叉正中,第三、四指的第一指节骨中部背侧面,左右各一穴(四)分析讨论1.牛常用穴位的取穴方法有几种?2.牛常用穴位的主治?三、猪常用穴位的取穴法(-)目的掌握猪常用穴位的准确位置及取穴方法,以便准确定位,为临床应用奠定基础。(-)准备1.动物:猪。2.主要器材:针具,保定架,猪针灸穴位挂图及模型。(三)方法和步骤1.头颈部穴位(1)天门后脑窝正中,两耳根后缘连线的中点处,一穴。(2)耳尖耳廓背面,距耳尖约一指处的三条耳大静脉支上,每耳任取ー穴。(3)山根吻突上缘弯曲部第一条皱纹上,正中及两侧旁开1.5cm处各一穴,共三穴。(4)开关口角后方,从外眼角向下引ー垂线与口角延长线相交处,左右侧各一穴。(5)玉堂口内,上腭第三棱正中旁开0.5cm处,左右侧各一穴。2.躯干部穴位
81(1)大椎第一胸椎与最后颈椎棘突之间,肩胛骨前缘的延长线与背中线相交处的凹陷中,一穴。(2)苏气第四、五胸椎棘突间,肘突向背中线作垂线,其交点是穴,一穴。(3)断血在背腰正中线上,最后肋骨与第一腰椎棘突间是其中穴,在其前后各ー个凹陷中再取其余两穴,共三穴。(4)百会由荐椎向前触按,在腰荐结合部的凹陷中取之,一穴。(5)肾门第三、第四腰椎棘突间凹陷中,即由百会穴向前数的第三个凹陷中是穴,ー穴。(6)脾俞六脉的第二穴,即倒数第二肋间,器骨翼上角水平线上,左右侧各一穴。(7)关元俞最后肋骨后缘,与六脉穴同高位处是穴,左右侧各一穴。(8)肺俞倒数第六肋间,与肩端至臀端连线相交处是穴,左右侧各一穴。(9)阳明最后两对乳头基部外侧旁开约1.5cm处是穴,左右侧各ニ穴(10)尾尖:在尾梢尖部取之,一穴(11)后海在尾根下,肛门上的隐窝中,一穴。(12)肛脱肛门两侧旁开1cm处,左右侧各一穴。1.前肢部穴位(1)抢风肩端与肘骨头连线的中点凹陷中是穴,左右侧各一穴。(2)前缠腕前肢内外悬蹄侧面稍上方的凹陷中,左右前肢各二穴,共四穴。(3)涌泉在蹄叉正上方约1.5cm的凹陷中是穴,左右前肢各一穴。(4)前蹄叉前蹄叉正上方顶端处,左右前蹄各一穴。2.后肢部穴位(1)后三里膝盖骨外侧后下方约6cm处的凹陷中是穴,左右后肢各一穴。(2)后缠腕后肢内外悬蹄侧面稍上方的凹陷中,左右后肢各二穴,共四穴。(3)滴水在蹄叉正上方约1.5cm的凹陷中是穴,左右后肢各一穴。(4)后蹄叉后蹄叉正上方顶端处是穴,左右后蹄各一穴。(四)分析讨论1.猪常用穴位的取穴方法有几种?2.猪常用穴位的主治是什么?四、犬常用穴位的取穴法(-)目的掌握犬常用穴位的位置和取穴方法,以便准确定位,为临床应用奠定基础。(-)准备1.动物:犬2.主要器材:针具,保定用具,犬针灸穴位挂图及模型。(三)方法和步骤1.头部穴位(1)分水上唇唇沟上1/3与中1/3交界处,一穴。(2)山根鼻背正中,有毛与无毛交界处,一穴。(3)三江内眼角下的眼角静脉处,左右侧各一穴。(4)睛明内眼角上下眼睑交界处,左右眼各一穴。(5)耳尖耳廓尖端背面脉管上,左右耳各一穴。(6)天门头顶部枕骨后缘正中,一穴。2.前肢穴位
82(1)肩井肩峰前下方的凹陷中,左右侧各一穴。(2)肩外俞肩峰后下方的凹陷中,左右侧各一穴。(3)抢风肩外俞与肘俞间连线的上1/3与中1/3交界处,左右侧各一穴。(4)都上肩外俞与肘俞间连线的下1/4处,肘俞穴前上方,左右侧各一穴。(5)肘俞臂骨外上牒与肘突间的凹陷中,左右侧各一穴。(6)四渎臂骨外上課与槎骨外踝间前方的凹陷中,左右侧各一穴。(7)前三里前臂外侧上1/4处,腕外屈肌与第五指伸肌间,左右侧各一穴。(8)外关前臂外侧下1/4处,楼骨与尺骨的间隙中,左右侧各一穴。(9)内关前臂内侧,与外关相对的前臂骨间隙中,左右侧各一穴。(10)阳辅前臂远端正中,阳池穴上方2cm处,左右侧各一穴。(11)阳池腕关节背侧,腕骨与尺骨远端连接处的凹陷中,左右侧各一穴。(12)膝脉第一腕掌关节内侧下方,第一、第二掌骨间的掌心浅静脉上,左右侧各ー穴。(13)涌泉第三、四掌(跖)骨间的掌(跖)背侧静脉上,每肢各一穴。(14)指(趾)间掌(趾)、指(趾)关节缝中皮肤皱褶处,每肢三穴,共十二穴。1.躯干及尾部穴位(1)大椎第七颈椎与第一胸椎棘突之间,一穴。(2)陶道第一、二胸椎棘突之间,一穴。(3)身柱第三、四胸椎棘突之间,一穴。(4)灵台第六、七胸椎棘突之间,一穴。(5)命门第二,三腰椎棘突之间,一穴。(6)百会第七腰椎棘突与荐骨间,一穴。(7)ニ眼第一、二背荐孔处,每侧各二穴。(8)尾根最后荐椎与第一尾椎棘突间,一穴。(9)尾本尾根部腹侧正中血管上,一穴。(10)尾尖尾末端,一穴。(11)后海尾根与肛门间的凹陷中,一穴。(12)肺俞倒数第十肋间,距背中线6cm处凹陷中,左右侧各一穴(13)肝俞倒数第四肋间,距背中线6cm,左在侧各一穴。(14)脾俞倒数第二肋间,距背中线6cm,左右侧各一穴。(15)肾俞第二腰椎横突末端相对的骸肋肌肌沟中,左右侧各一穴。(16)关元俞第五腰椎横突末端相对的骸肋肌肌沟中,左右侧各一穴。(17)天枢脐眼旁开3cm,左右侧各一穴。(18)中脱剑状软骨与脐眼之间正中处,一穴。2.后肢穴位(1)环跳股骨大转子前方,左右侧各一穴。(2)后三里小腿外侧上1/4处,胫腓骨间隙中,距腓骨头腹侧约5cm处,左右侧各ー穴。(3)解溪胫骨内侧与胫附骨间的凹陷中,左右侧各一穴。(4)肾堂股内侧隐静脉上,左右侧各一穴。(四)分析讨论1.犬常用穴位的取穴方法有几种?2.犬常用穴位的主治是什么?
83五、白针疗法(-)目的1.掌握白针(毫针、圆利针、小宽针)的操作方法。2.体验与观察针感反应。(二)准备1.动物:马,牛。2.主要器材:毫针,圆利针,小宽针。(三)方法与步骤1.针前准备(1)针具检查:按不同穴位选择适当针具,并检查有无生锈、弯裂、卷刃、针锋不利、针尾松动等,发现问题,及时修理或废弃。(2)消毒:穴位剪毛后用碘酊消毒,针具和刺手用酒精消毒。(3)保定患畜。2.切穴法:切穴的手叫押手,一般用左手切穴,穴位不同切穴方法不同。(1)切押法:用左手拇指尖切押穴位皮肤,右手持针,使针尖沿押手拇指甲前缘刺入。(2)舒张法:用左手拇、食指按压穴位皮肤上,并向两侧撑开,使穴位皮肤紧张,以利进针。穴位皮肤松弛时用此法。(3)夹持法:用左手拇、食指将穴位皮肤捏起,针尖从侧面刺入,如锁U穴。3.持针法:刺穴的手叫刺手,一般用右手持针刺穴。(1)毫针持针法:因其细而长,易弯易颤,持针时,用刺手的拇指、食指捏针柄,中指和无名指护住针身或用拇、食、中指捏握针柄,捻转进针。长毫针可用拇、食、中三指捏针尖部,留出适当深度,先将针尖刺入皮肤,再持针柄捻转进针。(2)全握式持针法:此法持针有力,用于圆利针,小宽针或大宽针,即用拇指、食指捏持针尖,留出适当深度,其余三指握针身,并将针尾抵于手心中。(3)持笔式持针法:用拇、、食、中三指握针尾,中指尖抵按针身以控制入针深度。4.进针法(1)捻转进针法:左手切穴,右手持针,针尖刺入皮肤,左右捻转刺入所需深度。此法用于毫针进针,如因皮厚针细不易进针时,可先将14〜16号短针头刺入穴位,再把亳针沿针头孔刺入。(2)急刺进针法:圆利针,小宽针多用此法。即用轻巧的而敏捷的手法,将针快速刺入穴位。(3)飞针法:圆利针、小宽针可用,实属急刺法。其特点是不用切手,以刺手点穴并施针,辅助动作多,进针速度快,能分散患畜注意力,减少刺皮痛,故入针完毕患畜安然不动或稍有回避。多用于不老实的患畜。5运针法:运针是针刺入穴位后,为了增强针感,而运动针体的方法,仅应用于毫针和圆利针。临床常用的运针手法有:提、插、捻、搓、捣、颤、拨等。提:将针向外、向浅拔谓之提。插:将针向内、向深扎,谓之插。捣:快速连续提插谓之捣。捻:左右捻转针身谓之捻搓:单向捻针谓之搓。颤:留针期间,用指弹击针尾使针颤抖。拔:手捻针柄摆动穴内的针尖谓之拔。6.留针:将针留在穴内一定时间。
841.退针:又称拔针或起针、有两种方法。(1)捻转退针法:押手轻按穴位皮肤,刺手握针柄捻转退出。(2)抽拔退针法:刺手握针柄迅速拔出。2.针刺角度:指针体与穴位皮肤平面所构成的角度,由针刺方向所决定。(1)直刺:针体与穴位皮肤呈90,角、垂直刺入。(2)斜刺:针体与穴位皮肤呈45,角刺入。(3)平刺:针体与穴位皮肤呈15‘角沿皮刺入。3.针刺深度:不同穴位要求不同深度,但火针穴位施毫针可适当深些。4.针穴举例(1)毫针睛俞穴:左手切穴,下压眼球,右手持针,以捻转进针法,斜向后上方刺入6cm,留针不运针,捻转退针。(2)毫针脾俞穴:入针4〜6cm,捻转运针或搓针,观察针感一肌肉收缩、颤抖、凹腰、举尾。(3)小宽针急刺抢风穴:不留针或留针不捻针。(4)圆利针飞针百会穴:针法见前飞针法。(四)分析讨论1.何谓得气?如何体验针感?2.针穴中个人有何体会?六、血针疗法(-)目的1.掌握宽针和三棱针的使用方法。2.掌握血针不同穴位的术式。(-)准备1.动物:马和牛2.主要器材:大宽针、中宽针、小宽针、三棱针、玉堂钩、针槌、针杖。(三)方法与步骤1.术前准备:患畜根据施针要求进行保定,施针穴位剪毛、消毒。2.三棱针刺血法:多用于体表浅刺,如三江、大脉穴;口腔内穴位,如通关、玉堂穴等。针刺时右手拇、食、中指持针,使针尖露出适当长度,呈垂直或水平方向,用针尖刺破血管,起针后不要按闭针孔,让血液流出,待达到适当的出血量后,用酒精棉球轻压穴位,即可止血。3.宽针刺血法:(1)手持针法:以右手拇、食、中指持针体,根据所需的进针深度,留出针尖一定长度,针柄抵于掌心内,进针时动作要迅速,准确。使针刃一次穿破皮肤及血管,针退出后,血即流出。针刺缠腕、曲池等穴位时常用此法。(2)针锤持针法:先将宽针夹在锤头锯缝内,针尖露出适当长度,推上锤箍,固定针体。施针时,术者手持锤柄,挥动针锤使针刃顺血管刺入,随即出血。针胸堂、肾堂、蹄头等穴位常用此法。(3)手代针锤持针法:以持针手的食、中、无名指握紧针体,用小指的中节放在针尖的内侧,抵紧针尖部,拇指抵押在针体的上端,使针尖露出所需刺入的长度。挥动手臂,使针尖顺血管刺入,血随即流出。4.泻血量的掌握:血针的泻血量直接影响治疗效果。泻血量的多少应根据患畜的体质强弱、疾病的性质、季节气候及针刺穴位来决定。一般膘肥体壮的病畜放血量可大些,瘦弱体小病畜放血量宜小些;热证、实证放血量应大;寒证、虚证可不放或少放;春、夏季天气炎热时可多放;秋、冬季天气寒冷时宜不放或少放;体质衰弱、孕畜、久泻、大失血的病畜,禁忌施血针。施血针后,针孔要防止水浸、雨淋、术部宜保持清洁,以防感染。5.常用穴位举例
85(1)三江:术者面向马头站于病马左前方,左手拇指按压脉管,或轻弹脉管使之怒张,右手持三棱针,于血管汇集处下方沿血管平刺,入针0.5〜1cm,出血。低头保定可增加出血量。(2)玉堂:保定马头,术者以弓箭步站于马头左侧,左手拇指顺口角伸入,顶住上腭,另四指紧压鼻梁,则马ロ张开;右手持三棱针或小宽针,或用玉堂钩,平刺0.5cm,出血。刺后可以左手拇指向切齿方向捋压数次,以保证出血。(3)通关:保定畜头,术者站于病畜头部左侧,左手食、中、无名指并拢,顺口角伸入口内,将舌拉出并翻转舌体,食指屈曲顶住舌面,其它四指紧握舌体两侧,使静脉管显露,右手持三棱针,平刺0.5cm,出血。(4)颈脉;高系马头,以细绳活扣紧扎于穴下颈部,使脉管怒张;将大宽针装于针槌±,术者站于病畜头侧左前方,左手抓笼头,令头稍偏右侧,右手持针槌,摆动槌柄数次,使针刃对准穴位,急刺0.5cm,出血。放够血量,左手执绳端急拉,松脱颈绳,右手猛拍畜背,并叫醒病畜,血立即止住。(5)胸堂:高系马头,使穴位皮肤舒展,脉管显露;术者将大宽针装于针槌上,半蹲式站于病畜患肢肩侧,一手握髯甲部鬣毛,一手持针槌,使持槌的臂肘紧贴自己胸侧,靠腕カ摆槌急刺〇.5cm,出血。放血后,松系马头,即可止血。(6)缠腕:助手提举健肢,术者左手按穴,右手持三棱针或小宽针,沿血管平刺0.5cm,出血。如该部有软肿(滑膜炎),可直刺软肿,放出积液。本穴可一针刺透内、外缠腕2次,即令助手提举患肢,术者左手拇、食指紧按内、外两侧穴位,右手持小宽针于筋前骨后静脉管处直刺,ー针急透二穴,出血。(7)蹄头:病畜站立保定,术者将大宽针装于针槌上,手持针槌站于病畜前肢右侧,以弓箭步弓身向下,左手按定马体,右手运槌轻手急针,先刺左肢前蹄头,再刺右肢前蹄头。针后蹄头时,术者站于病畜后肢右侧,左手推按雁翅骨尖,弓身向下,右手运槌轻针急刺,先针左肢后蹄头,再针右肢后蹄头。若用针仗针刺蹄头穴则更为方便安全。(8)带脉:病马保定,术者以侧身步站于病马肩侧左方,面向畜体后方,左手按髻甲,右手持大宽针或中宽针,食指中节横压穴位前方,使血脉怒张,然后急刺进针,出血。也可用针槌急刺。(9)肾堂:提举健后肢保定,术者以弓箭步站于病马健肢股部,一手握尾根,一手持大宽针,向上斜刺脉管,出血。或站于马体后方,一手拉马尾,一手以装有中宽针的针槌急刺脉管,出血。(10)尾本:固定两后肢保定,术者站于病畜左侧后方,左肘抵压髄结节,左手提举尾根,右手持中宽针或小宽针,向上沿血管急刺,撒尾血即出,举尾血不流。(四)分析讨论1.血针疗法的作用原理有哪些?2.各个常用的血针穴位主治是什么?3.血针操作中的个大体会如何?七、火针疗法(-)目的掌握火针疗法的缠针、烧针和针刺方法,为临床应用打下基础。(二)准备1.动物:马,牛。2.主要器材:各种型号火针。(三)方法与步骤1.烧针法(1)缠裹烧针法:用棉花将针尖及针体一部分缠裹成梭形,内松外紧,或用一些小布块叠穿于针尖及部分针体上,然后浸透植物油(一般用普通食油),点燃烧针体,针尖向
86上并不断转动,使其受热均匀。待油尽火将熄时,用镜子夹去棉花(或小布片)残余灰烬,即可进针。(2)直接烧针法:用植物油灯或酒精灯的火焰,直接烧热针尖及部分针体,而后立即刺入穴位。1.针刺法烧针前预先选好穴位,一般选定3〜4穴,经剪毛消毒,用碘酊或龙胆紫标记穴位,待火针烧透后,左手按穴,右手拇、食、中三指执针身尾端,速取掉棉灰,急刺穴中,进针深度根据穴位而定。一般可留针5〜10min,也可不留针。2.起针法起针时,轻轻捻转针身,即可将针拔出。针孔需用碘酊棉球消毒,外敷消炎膏、胶布或贴膏药均可,敷以薄棉以火棉胶封闭则更好。术后应加强护理,防止摩擦啃咬及雨水淋烧针孔,以防感染(若发生针孔化脓,应及时行外科处理)。火针经770天后,オ可行第二次扎针,二次选穴不宜重复上次已用过的穴位。3.火针穴位:火针穴位基本与白针穴位相同,但应注意避开血管,常用的有颈上九委、膊上ハ穴、胯上八穴、腰间七穴等。(四)临床应用火针治疗马后肢风湿症。(1)穴位选择邪气:尾根切迹旁开线与股二头肌沟相交处是穴。掠草:膝盖骨外下方,膝外、中直韧带之间凹陷处是穴。阳陵:膝关节外后方,胫骨外課后上缘凹陷处是穴。后三里:掠草穴后下方,小腿上部外侧,腓骨小头直下方肌沟中是穴。(2)操作方法:按照上面介绍的烧针法、针刺法、起针法进行操作,在针刺中火针直刺邪气穴4.5cm,斜向后上方刺入掠草穴3〜4.5cm,直刺阳陵穴3cm,斜向下方刺入后三里穴2〜4cm。(3)观察结果:将治疗后的结果并逐一记录。(五)分析讨论1.谈谈个人实习火针操作法的体会。2.火针的作用原理是什么?ハ、巧治法(一)目的掌握抽筋、气海、姜牙、弓子、夹气、垂泉、肤俞、前槽、莲花、滚蹄等穴位的巧治方法。(二)准备1.动物:牛、马2.主要器材:三角刀,月牙刀,三弯针•,三棱针,抽筋钩,姜牙钩,导气管,注射器,针头。方法和步骤I抽筋穴针术(用以治疗马低头难的ー种方法):站立保定,夹住下唇,头部妥善保定。术部消毒。一手拉紧上唇,另一手持三角刀顺穴位切开皮肤约1.2〜1.5cm,或以大宽针刺破穴位皮肤,然后将抽筋钩插进切口内,勾出上唇蹄肌腱,反复牵引数次,拿去钩针,前拉上唇,上唇提肌腱自然缩回。必要时,消毒缝合。2气海穴针术(用以治疗马鼻孔狭窄、呼吸不畅的方法):站立保定,头与顶平。左手握好鼻孔,用一木棒塞入鼻孔6cm,并与鼻上缘紧帖,右手持月牙刀,自下而上割开3〜4.5cm的切口(驴弯、马直),或以术者的食、中指插入鼻腔,并伸直叉开,即将穴位皮肤撑展,以手术剪由下而上剪开。手术时切勿伤骨,否则流血不止。割鼻后每天用新鲜洁净水冲洗刀ロー
87次,以防愈合,待两侧伤ロ长好为止。3姜牙穴针术(用以治疗马冷痛):站立保定,夹住上唇。针左侧穴时,鼻捻子向右侧歪。针右侧时鼻捻子向左侧歪,姜牙骨尖则突起。固定姜牙基部,用大宽针割开皮肤。再用姜牙钩勾出鼻翼软骨割去尖部,或以大宽针刺入姜牙骨中挑拨数次即可。4弓子穴针术(用以治疗牛、马肩膊肌肉萎缩、肩膊麻木、脱膊等疾患):站立保定。穴位剪毛消毒。提起穴部皮肤,用大宽针刺破之,以消毒纱布盖住针孔,术者连同纱布捏起周围皮肤,向外牵拽数次后再捏紧针孔,由针孔向肘头方向推挤气体。如此发复四、五次,则肩部皮下组织,充满气体。最后封闭针孔。进气方式,还可用注射器注入,为净化空气,在注射针头裹ー酒精棉球,抽动针芯,空气通过针头酒精棉而充满注射器,然后通过针孔,将净化的空气注入穴内,直至肩部充满气体为止。5夹气穴针术(用以治疗牛、马里夹气):动物站立或横卧保定。术部消毒。先用大宽针刺透术部皮肤。然后用夹气针(光滑面朝里侧)沿针孔向外上方刺入(决不可向内上方刺入,以免刺入胸膛),深达肩臂内部的疏松结缔组织内,也可将大宽针与夹气针尖合并ー起穿过穴位皮肤,退出大宽针,再缓缓推进夹气针。在推进夹气针时遇有障碍,切勿强刺,可换ー个地方再刺,感到轻松,则继续向前推进,达到一定的深度(一般24〜30cm)后,可以前后摇动患肢数次,也可在退针后再摇动患肢。术后消毒,注意护理。6垂泉穴针术(用以治疗牛、马漏蹄):前蹄漏,可由助手提举固定患肢;后蹄漏,可用二柱栏保定,患肢后方转位固定。以利刀割剜患部,排除脓血异物,用酒洗净,再以头发油炸炭或血竭粉或烟丝填塞其孔,黄蜡封口,垫薄铁片钉掌护之。厩舍保持清洁干燥,勿涉水或驻立泥中。7廉俞穴针术(用以治疗牛、马肚胀):站立保定。术部剪毛消毒,用大宽针将皮肤切ー小口,略上移皮肤,插入套管针,并固定之,拔出针芯,即有气体排出,为防止虚脱,应控制针ロ,使气体缓缓排出,待气体排完后,插针芯于套管内,一手压住术部,一手缓缓拔出套管针,消毒,火棉胶封口。8前槽穴针术(用以治疗胸水和脓胸):站立鼻捻保定。术部剪毛消毒。提起穴部皮肤,用大宽针刺入皮肤,将套管针顺针孔刺入胸内,抽出针芯,使胸水或脓缓缓流出,胸水流出一定量时,则将针芯插入套管内,ー并拔出。若是脓胸,还可作适当冲洗。9莲花穴针术(用以治疗脱肛症):两后肢“8”字形保定。排除宜肠积粪。用2%明矶水冲洗脱出的宜肠(莲花),然后以三棱针或小宽针散刺莲花,或用剪刀除去坏死粘膜,并用适量明矶水揉擦,挤出水肿液,缓缓送回肛门内。如整复后继续脱出时,可在肛门周围作一荷包缝合,必要时内服缓泻药或补中益气汤。10滚蹄穴针术(用以治疗滚蹄):横卧保定,患肢靠近地面,系部前面贴近木桩,用绳套在蹄枕上部,插以木棍,将木棍一端扎于木桩上,术者用小腿顶紧另一端;以大宽针顺屈腱侧方切ー小口,将针平行深入至屈腱下方,达腱的1/3处,由内向外划动切割,切断约1/3,此时术者小腿用劲顶紧木棍,尽量使球节伸直,同时可听到“咯嚙”♦声,即可使滚蹄矫正。最后消毒,扎上绷带,装上矫形的蹬状蹄铁。(四)观察结果观察巧治后的反应和疗效。(五)分析讨论1.巧治中应该注意哪些问题?2.巧治中个人有什么体会?九、电针疗法(-)目的
88通过实验掌握电针的操作方法,为临床应用打下基础。(二)准备1.动物:马、牛、猪。2.主要器材:兽用电疗机,圆利针,毫针。(三)方法和步骤1.将患畜保定,根据病证选定2〜4个穴位,剪毛消毒,先按毫针针法刺入穴位,使出现针刺反应。2.将电疗机的正负极导线分别夹在针柄上,当确认输出调节在刻度“0”时,再接通电源。3.频率调节由低到高,输出档由弱到强,逐渐调到所需的强度,以患畜能接受治疗为准。通电时间一般为15~30min,也可根据需要适当延长。4.在治疗过程中,为避免患畜对电刺激的适应,可适当加大输出;也可随时调整电疗机使输出和频率不断变化;也可每数分钟停电一次,然后继续通电。最后结束时,频率调节应该由髙到低,输出由强到弱。5.完成一•次治疗时,应先将输出频率旋钮调至刻度“0”后,再关闭电源,接着除去金属夹,退出针具,消毒针孔。6.一般每日或隔日施针1次,5〜7日为ー疗程,每个疗程隔3〜5日。(四)临床应用1.电针治结(1)操作方法:将患畜保定,选取双侧关元俞为一穴组,穴部剪毛消毒,针具消毒。左手切穴,右手持针,与穴位皮肤垂直刺入约6〜8cm;然后在两个针柄分别接上正负两极电源,打开电疗机的电源开关,调节电压和频率,就可以见到患畜的腹壁出现和电流频率相•致的节律性震动。在通电治疗过程中,电压要逐渐由低到高,频率逐渐由慢到快,•般加髙电压要同时加快频率,但也可加大电压不加快频率。电压由低到高,频率由慢到快,当见到动物全身出现强烈颤动或几秒钟强直时,再将电压逐渐降低,频率逐渐减慢。此期间需持续lOmin左右,如此反复2〜3次即可。最后关闭电源,去掉导线,起针、穴位消毒。(2)观察结果:将治疗后肠音、排粪等出现时间作一记录。2.电针治疗母畜不孕症(1)选穴子宫弛缓:主穴为后海,配穴为百会、雁翅。卵泡囊肿:主穴为肾棚,配穴为雁翅、肾俞。卵巢静止;双侧雁翅穴。持久黄体:双侧雁翅穴。(2)操作方法:将患畜保定,在选定的穴位上进行剪毛、消毒、进针。然后将电疗机的正负极导线分别夹在针柄上,将输出调节到刻度为“〇”位时,接通电源,调节频率由低到高,输出由弱到强,逐渐调到所需强度。通电时间15〜30min。完成治疗时,应先将输出和频率旋扭调至刻度“0”处,关闭电源,除去金属夹,拔除亳针,消毒针孔。每日或隔日一次,5〜7日为ー疗程,每个疗程间隔3天。(3)观察结果:将治疗前与治疗过程所观察到的外部发情表现及直肠检查卵巢形状、大小,卵泡及黄体的大小和数目以及子宫的变化作ー记录。(五)分析讨论1.电针疗法的作用原理是什么?2.电针操作中个人有何体会?十、水针疗法(-)目的通过实验学会水针疗法的操作技术。
89(二)准备1.动物:马,牛,猪,羊。2.药物:5〜10%葡萄糖溶液,0.5〜2%盐酸普鲁卡因,中药注射液,抗生素类药物。3.主要器材:注射器,封闭针头,毛剪等。(三)方法和步骤1.注射部位的选择(1)穴位注射:除血针穴位外,一般毫针穴位均可使用。可根据不同的病证,选用不同的主治穴位。例如前肢上部疾病,常在抢风穴注射;腰背部疾病,可选腰背两侧的穴位注射。(2)痛点或敏感点注射:选用循经络分布所触到的敏感点,或根据触压诊断找出患畜软组织损伤处的压痛点进行注射。(3)患部肌肉起止点注射:对一般痛点不明显的慢性腰肢疾病的患畜,可在患部肌肉起止点进行注射,注射深度要达到骨膜和肌膜之间。2.药物的用量:药物用量的多少,可根据肌肉厚薄而定,如肌肉较厚的部位,用量较多;肌肉较薄的部位,用量适当减少,如每次采用2〜3个穴位注射时,每穴可注入20〜30ml;如在四肢、头部肌肉较薄部位,每穴可注入!0-20ml:头部和耳穴等处一般0.5〜2ml即可。3•操作方法:保定好患畜,在选好的注射部位剪毛并按照常规进行消毒。根据病证选准药物,按肌肉部位的深浅、药量的多少,选用适宜的注射器和针头,对准穴位或痛点快速刺入。按照针刺的角度和方向要求,刺到ー定深度时,上下缓慢提插,也可旋转针体,待达到针感后,用针筒回抽ー下,看有无回血。如无出血时,即可将药液慢慢注入,针后消毒针孔。一般药液不宜注入关节腔内,如误注入关节腔内,会引起发热、关节疼痛、红肿和跛行加重,但经2〜3天后症状自行消失,一般不需要治疗,必要时可给予对症处理。4.疗程:注射后局部常有肿胀、疼痛或体温升高等现象,但经过一天左右即可自行消失,所以隔2、3天注射1次为宜。如需每日注射,应另选其他穴位。每3〜5次为ー个疗程,必要时可休药3~?天,再进行第二疗程。(四)临床应用水针治疗奶牛不孕症1.穴位选择百会:腰部背侧正中线上,腰荐十字部,即最后腰椎与荐椎之间接合部,一穴。后海:肛门与尾根之间的凹陷中,一穴。雁翅:髓结节与背中线所作垂线的中1/3与下1/3交界处,二穴。2.操作方法:将奶牛保定,确定百会穴、后海穴、两侧的雁翅穴的位置,局部消毒。每ー穴位用ー支26号针头皮下刺入,其中百会穴刺入3cm,后海穴和两侧雁翅穴分别刺入6cm,得气后每穴分别注入5%葡萄糖15ml,隔2天注射1次,每3次为ー疗程。如需要可在休药5天后进行第二疗程。3.观察结果:将治疗前与治疗过程所观察到的外部发情表现及直肠检查卵巢形状、大小,卵泡及黄体的大小和数目以及子宫的变化逐一记录。(五)分析讨论1.水针疗法的作用原理是什么?2.水针操作中个人体会如何?Hー、激光针灸疗法(-)目的掌握激光针灸穴位治疗家畜常见病的方法,为临床应用打下基础。(二)准备1.动物:牛,马,羊,猪。2.主要器材:氨ー岚激光治疗机,二氧化碳激光治疗机。
90(三)方法和步骤1»氨ー敏激光治疗机的操作:应先接通地线,然后再打开电源开关,调节电压转换开关,使输出工作电流达到规定要求,这时激光管起辉,从输出端发出红色光束,待预热一定时间后,便可进行照射。用毕,先将调压旋钮调至零位,再关闭电源。2二氧化碳激光治疗机的操作:以5W水冷式二氧化碳激光器为例,先将水箱注满常水或蒸储水,接通地线,然后打开电源开关,指示灯亮,水泵开始工作,使冷却水循环不息,一般2min后,再开动高压开关,调到规定要求,激光管即可起辉,可用小木板或纸片检查光束的输出情况。随后关闭高压开关,改用手控或脚踏开关起动激光,投入使用。用毕,将高压调至零位,关闭电源开关。若在寒冷季节,还应放掉冷却水,以防止水箱和激光管冻裂。3.对患畜进行保定。4.选穴:根据不同病症选穴定穴,在穴位上可见用蓝墨水或龙胆紫液标记。例如,大家畜不孕症:选后海穴或阴蒂部。仔猪白痢:选交巢穴。羔羊痢疾:选交巢穴。乳房炎:选滴明穴(脐前约16.7cm,旁开约13.3cm,乳静脉上是穴)、阳明穴(乳头基部外侧)、通乳穴(两乳头中旁开约3.3cm)、阿是穴等。马结症:选关元俞、脾俞、大肠俞、小肠俞等。马翻胃吐草:选脾俞、关元俞、抢风、百会、大跨、小跨等。5.治疗方法:(1)激光针疗法(激光穴位照射疗法):常用的照射方法有3种,即原光束直接照射法(主要用于穴位照射),经铭透镜散焦(用于照射较大的患部)及导光纤维法(用于不便直接照射的部位,如体腔内等)。照射距离一般为3〇〜100cm,激光束与被照射部位呈垂直角度,使光点准确照射在病变部位或经穴上。每次照射10〜15min,一般照射1次或2〜3次不等,以治愈为准。通常每天1次,可连续应用,也可间隔2〜3天照射1次。可连续照射7次为ー个疗程,如不愈,隔2〜3天,进行第二疗程。(2)激光灸疗法(激光穴位烧灼疗法):二氧化碳激光器输出端对准穴位,距离5~15cm,每穴烧灼3〜6s。一般只照射1次,若不愈,隔3天后再烧灼1次。对重症病畜可同时烧灼体躯两侧的同名穴位。如采用扩束照射头,则距离为2〇〜30cm,每一部位辐照5~lOmin,每日1次,可连续辐照6〜7次为ー疗程,这属于温灸法。(四)观察结果:根据临床检查和实验室检测报告,将治疗情况逐一记录。(五)分析讨论:1.激光针灸疗法的作用机理是什么?2.激光针灸疗法中个人有什么体会?十二、针刺麻醉(-)目的通过实验掌握电针麻醉和激光针麻醉的操作方法,为临床应用打下基础。(二)准备1.动物:马或牛。2.主要器材:兽用麻醉治疗综合电疗机或定量电针治疗针麻仪,8-10mW或25〜40mW氨氣激光器,各种亳针若干枚。(三)方法和步骤1.马的电针麻醉(1)保定与消毒:站立、横卧、仰卧均可。在穴位部剪毛消毒。
91(2)取穴与针法:取三阳络穴组。三阳络透夜眼:针体与皮肤呈15〜20,角,由三阳络穴沿橈骨后缘,斜向内下方夜眼穴方向刺入1〇〜12cm,以不穿透夜眼,但能触感针尖为度。抢风穴要垂直皮肤刺入6〜10cm。(3)麻醉方法:先取术部同侧穴位,进行穴位与针体消毒,按针法要求进针,当达到所需深度,采用提插或捻转手法,使家畜产生针感后,在针柄上分别连接电疗电麻机(应先调至麻醉档)的两条输岀导线通电,调节频率由低到高,输出电压由小到大。经3〜5min使电压与频率先后同时调节逐渐达到患畜所能耐受的最大刺激量为止。一般频率在3〇〜50次/s,针刺部位由振颤到强直,家畜表现为安静,诱导期通常为10〜20min,此时针刺术部皮肤,测麻醉程度,当针刺皮肤无痛感,神志保持清醒且很安静,即可施行手术。在手术过程中应ー直通电,如在切皮及牵拉肠管时,患畜若有反应,则可予加大频率和强度,以保持麻醉效果。在针麻过程中,要注意观察,防止掉针。手术结束后,逐渐将频率与电压旋钮调至“0”位,关闭电源,拔去针具,注意消毒针孔,防止感染。1.马的激光针麻醉(1)保定:手术台侧卧保定,穴位剪毛。(2)取穴:三阳络(位于前肢槎骨外侧韧带结节下方2寸处的肌沟中)和抢风或百会和肾门。(3)照射方法:激光输出端与照射的穴位距离为30cm左右,照射角度与针刺角度相同,两个穴位同时照射。一般在照射15min后开始进入无痛状态,而手术则在照射30min后进行。手术过程中应继续照射。牛的电针麻醉常采用百会腰旁穴组,激光麻醉多用百会肾门穴组。(四)观察结果1.效果判定:将针刺麻醉效果共分为四级。优:切开皮肤,分离组织,内脏或患部牵引整复以及缝合等各项操作中,家畜安静,无疼痛反应,或仅有轻微的局部颤动。良:上述手术操作中,个别环节局部出现颤动或躲闪反应,内脏以患部牵引整复时出现短时间的不安或轻微骚动,但能较顺利地进行手术。尚可:各项手术操作中,局部出现明显的颤动或躲闪反应,出现多次间歇性的骚动,但手术尚能进行。失败:各项手术操作中疼痛明显,患畜强烈骚动,手术难以进行。2.结果记录:将电针麻醉和激光针麻醉在手术中的麻醉效果逐一记录。(五)分析讨论1.针刺麻醉的作用机理是什么?2.比较电针麻醉和激光针麻醉的效果及优缺点?十三、艾灸、温熨疗法(一)目的了解和掌握常用艾灸和温熨疗法的操作方法。(二)准备1.动物牛或马,每组1头(匹)。2.药物艾绒、艾卷,生姜、大蒜、食醋5kg、70%酒精或白酒0.75L、麦夫皮7.5〜10kg。3.器材纱布、布袋,麻袋,小盆,50ml注射器,小刷子,火炉,炒锅等。(三)方法和步骤1.艾灸法分为艾炷灸和艾卷灸两种,如根据灸后灼伤皮肤的程度可分为无疤痕灸和疤痕灸两种。(1)艾炷灸包括直接灸和间接灸两种。
92①直接灸根据病情选择适宜大小的艾炷(枣子大或李子大)直接放在穴位上,点燃艾炷尖,待燃烧到底部、不等燃尽就更换ー个艾炷,称为“一壮”。每穴灸5〜10壮或更多一些。其补泻手法是,以点燃艾炷令其自灭,按穴者为补,不按穴者为泻。②间接灸将厚约0.2〜0.3cm的生姜片或大蒜片、药物等,刺上小孔,垫在艾炷和穴位之间。其他操作同直接灸。(2)艾卷灸根据艾灸的方式和对穴位皮肤灼热程度分为温和灸和雀啄灸两种。①温和灸:将点燃的艾卷距穴位约1.5〜3cm处熏烤,每穴连续灸5〜lOmin左右。②雀啄灸:将点燃的艾卷象雀啄食ー样接触一下穴位皮肤、立即拿开,反复操作,每穴灸约3~5min»1.温熨法温熨法常用的有醋酒灸和醋訣灸等。(1)醋酒灸俗称火烧战船或背火鞍。将马或牛保定在四柱栏内,用温醋刷湿背腰部被毛,盖上用醋浸湿的双层纱布,洒上70%酒精(或白酒),点燃,醋干加醋,火小用注射器洒酒,勿使纱布烧干,先文火后武火,连续烧30〜40min,至马耳根或腋下出汗时,用于麻袋盖压灭火焰,抽出湿纱布,固定麻袋,将动物拴于暖厩,勿受风寒。(2)醋块灸将一半麦款放在铁锅内加醋拌炒,加醋的量以手握麦熬成团、放手即散或不全散开为度,炒至数热40~60℃,趁热马上装入布袋,平搭在腰背部施灸。再用同样方法炒另一半麦熬。两布袋交换使用,稍凉就换,直至马耳后或腋下微汗,除去布袋,盖上干麻袋保暖,勿受风寒。(四)分析讨论艾灸和温熨疗法的操作要点及注意事项,作用原理和适应症如何?[附]特定电磁波谱(TDP)疗法(一)目的了解和掌握TDP治疗机的性能、使用方法和临床应用范围。(二)准备1.动物牛或马,每组1头(匹)。2.器材TDP治疗机,每组1架;毛剪,马耳夹子,牛鼻钳,100C温度计,六柱栏(或四柱栏),保定绳等。(三)方法和步骤1.仪器介绍特定电磁波谱(简称TDP)治疗机,原是人医使用的理疗仪器。对多种疾病具有疗效广、见效快、操作简便等特点。目前在兽医临床上也广泛应用。TDP治疗机,系中国人民解放军七四四八エ厂制造、重庆硅酸盐研究所监制的82-6型单头或82-2型双头治疗机。该机分为辐射头、支架、电器控制三大部分,其中辐射头上的主要部分为辐射板。该板表面涂有机体所必须的33种元素。2.操作(1)将动物保定于六柱栏(或四柱栏)内,患部或穴位部剪或不剪毛。将TDP治疗机电源插头插入220V插座内,打开电源开关,工作指示灯亮,表示电源已接通,待照射头有发热感觉,即可根据治疗部位调整治疗机的角度,対准患部或穴位进行照射治疗。(2)每天第一次开机时,应预热5〜lOmin,连续治疗则无需预热。新机器第一次使用时,照射头内可能出现短时雾气和轻微响声,这是由于潮气遇热引起的,稍后即可自然消失。(3)照射距离辐射板距照射体表20〜25cm。对移动不定的家畜,采用人工随时移动辐射头的方法控制距离。(4)照射时间每次照射50〜60nlin,若为对称性穴位,两侧穴位各照射lh。体表温度在照射30min后达40〜52℃。每天照射1〜2次,5〜7d为ー疗程,疗程之间应有适当的间隔时间。(四)观察结果
93在照射过程中,病畜均有频繁的排尿现象,多数病畜频频排软粪。在照关元俞时,牛的瘤胃蠕动增强,马属动物则肠音增强。对病变局部照射时,有祛瘀活血、消炎止痛之功;对牛的前胃弛缓、胎衣不下,马属动物的肠弛缓、副鼻窦炎等均有效。结合本次实习所选病例,观察记录治疗中病畜的表现。(五)分析讨论探讨TDP的作用原理有那些?十四、软烧疗法(一)目的了解和掌握软烧的操作方法。(二)准备1.动物牛或马,每组ー头(匹)。2.药物95%的酒精0.5kg或市售60°白酒1kg,醋椒液(取陈醋1kg,花椒50g,混合煮沸20〜30min,待温备用)。3.器材保定绳,毛刷一把,软烧棒(取圆木棍1根,长40cm,直径1.5cm,一端为手柄,另一端用棉花包裹,外用纱布或绷带包扎,再用细铁丝扎紧,呈圆形或长圆形棉纱球,长约8cm,直径3cm)。(三)方法和步骤将动物保定于柱栏内,将健肢向前方或后方转位固定。以毛刷蘸醋椒液将术部周围上下大面积涂刷。将软烧棒的棉纱球先浸醋椒液、拧干,然后喷酒点燃。术者摆动软烧棒,使火焰冲向术部燎烧,先缓慢摆动(文火),待2〜3min后,术部皮温逐渐增高,可加快摆动(武火)。在烧灼过程中要不断涂刷醋椒液,以免被毛燃着和患畜因烧痛而过分骚动;并及时向上加酒,使火焰不断。如此治疗持续30〜45min。(四)观察结果一般在软烧后7〜15d跛行减轻或消失。将变化过程详细记入病历。(五)分析讨论软烧疗法的操作应注意哪些问题?有何临床意义?十五、烧烙疗法(一)目的了解和掌握直接烧烙疗法的操作技术。(二)准备1.动物牛或马,每组1头(匹)。2.药物陈醋0.5kg。3.器材二柱栏,保定绳(围绳1根,长18m、直径3cm:吊绳2条,颈绳),鼻捻子或牛鼻钳1把,尖头刀状烙铁2把,方形刀状烙烧4把,小火炉,煤炭。(三)方法和步骤1.操作病畜预先停食8h»二柱栏保定。在患部先用尖头刀状烙铁画制烙图,再用方头刀状烙铁加大火度。2.注意事项①烧烙部位应避开重要器官,也不要损伤较大的神经、而.管。一般只烧烙一次,如需要在同一部位再次烧烙,应在第一次烧烙创面愈合后再进行,并且尽量避开前次烧烙面。②烙铁要烧红,以从火内取出呈白色为宜,烙铁冷却后应及时更换。③烧烙顺序宜先轻后重,烙铁要顺毛走向运行,刀面一定要平稳接触皮肤,用カ方向
94是下压后拉,切忌前后拖拉。一般先烙内侧后烙外侧,先烙上部再烙下部。④烧烙程度烧至烙线皮肤金黄色、略呈油状为度,然后用醋喷洒术部,再用烙铁轻烙一遍即止。(四)观察结果注意观察烧烙后患肢恢复情况,将结果记入病历。(五)分析讨论烧烙时应注意哪些问题?谈谈对烧烙作用原理的看法。十六、穴位埋线、按摩、拔火罐疗法(-)目的掌握穴位埋线、按摩及拔火罐的操作方法。(二)准备1.动物猪、牛、马各2头。2.药物5%碘酊,70%酒精。3.器材剪毛剪,半弯三角缝针(12X5),1号络制羊肠线,脱脂棉,火罐,长镒子,酒精灯,火柴,棉球,封闭针头。(三)方法和步骤1.穴位埋线可根据病证选穴埋线,如治疗仔猪白痢可选用脾俞、后三里、尾干穴,眼病选睛明、睛俞穴。(1)脾俞穴埋线穴位部剪毛消毒,将穿有羊肠线的缝针,自穴位上方或下方约1cm处进针,通过皮下、肌肉、沿肋间平行方向穿出,使肠线留在穴位内2cm,剪去外露线头,轻轻提起皮肤,将肠线埋入皮下,用碘酊涂擦针孔部位。(2)后三里穴埋线在穴位上方或下方约1cm处进针,通过皮下肌肉,沿与胫骨、腓骨长轴平行的方向穿出,肠线在穴位内保留2cm。(3)尾干穴埋线在穴位右侧或左侧0.5〜1cm处进针,从与尾椎骨长轴垂直的方向穿出,肠线在穴位内保留2cm。(4)睛明、睛俞穴埋线取1cm长的肠线放置在封闭针头的针孔内,将针头刺入穴位,达所需深度(约3〜4.5cm)后,将毫针插入针头孔内,在缓缓退出针头的同时,将肠线推送入穴内。2.按摩常用的基本手法有以下几种。(1)按法用手指或指掌在畜体病痛部位或穴位上按压,如用掌心按,则面积大,使用指背关节尖端或屈曲中指第二节按,则刺激加强。按法具有通经络、开通闭窍之功效,适用于腰背部、臀部等肌肉丰满部位。(2)推法术者肩、肘关节放松,屈腕内收,四指屈曲,手握空拳,大拇指伸直盖住拳眼,用拇指的指腹、指峰附着于治疗部位或穴位上,腕部和指关节来回作有节律的摆动。其作用力点的面积小,易于深透到皮下组织及肌层,能使较深部组织血管扩张,循环加速,具有疏通经络、行气活血的功效,适用于全身各部位。(3)拿法术者以大拇指与其他手指作对称的用カ,把皮肤、肌肉或筋膜用カ提拿起来,可用単手或双手。本法从两个相反方向对同一部位对称施加压カ,并向上提,是强刺激的兴奋手法之一,具有祛风散寒、疏通经络的功效,运用于肌肉丰厚部位。(4)捶法术者双手握空拳或五指伸直臼然并拢,肩肘关节放松,用腕力使掌缘或掌缘与指根部自由起落于治疗部位。捶击力量可根据病情而定。捶法对神经末梢具有兴奋刺激作用,能活跃局部血液循环,具有疏经活络、行气活血之功效,适用于腰背及四肢等部位。
95(5)摇法患畜保定后,术者一手握住患畜关节近端肢体,另手握住关节远端肢体,做旋转、屈伸、外展、肉收等运动。主要是协助关节的正常功能和位置活动,多用于四肢关节部位。(6)摩法术者用手指指腹或掌心放在治疗部位或穴位,来回直线摩动,或顺、逆时针方向作圆形摩动。摩法主要是摩擦力的作用,轻摩、缓摩能起到按抚、镇静及止痛作用。(7)揉法术者用指腹、掌心或掌根部与病痛部位皮肤贴紧揉动。其特点是用カ使病痛部位皮下组织滑动摩擦,刺激比较缓和,多作为强手法后的一种缓冲手法。(8)捏法术者用手指挤捏皮肤、肌肉,多配合揉法使用,具有祛风寒之功效。1.拔火罐常用拔火罐的方法有四种:(1)投火法将酒精棉球(或纸片)燃着后投入罐内,迅速将火罐罩在应拔的部位上。(2)闪火法用锻子夹着燃烧着的酒精棉球在罐内烧一下,立即将棉球取出,迅速将罐子罩在应拔部位上。(3)架火法用ー块不易燃烧而导热性很差的片状物(如姜片、木塞等),放在术部,上面放一小块酒精棉,点燃后,将罐口烧一下,迅速连火扣住。(4)贴棉法用棉花ー小块,用95%酒精浸湿,贴在罐内壁中段,点燃后速罩于术部。注意事项:拔罐部位一般选择肌肉丰满、皮下组织丰富的部位,拔罐前用水浸湿被毛或剪毛。根据部位选用适宜的火罐。拔罐时间一般10〜20min。起罐时按压罐旁皮肤,使空气进入罐内,罐即落下。拨罐后如有损伤、起泡等现象,可涂消炎药膏以防感染。(四)分析讨论穴位埋线、按摩、拔火罐疗法的作用原理是什么?十七、电针对胆管未端括约肌电活动及胆汁分泌的影响(-)目的观察针刺不同穴组対胆管末端括约肌(Oddi氏括约肌)电活动和胆汁分泌的影响。(二)准备1.动物山羊或家兔。2.药物乌拉坦,阿托品,新斯的明。3.器材多导生理记录仪及相应的屏蔽室,GD-1型光电记滴器,57-6电脉冲治疗仪,25cm长铜漆包线(直径200um),25cm长聚氯乙烯塑料管(直径2mm),玻璃注射器,剪毛剪,眼科剪刀,手术刀,持针钳,缝合圆针,三棱缝针,缝线和敷料等。(三)方法和步骤1.麻醉先称供试动物的体重,按1〜1.2g/kg体重的剂量静脉或腹腔注射乌拉坦。2.保定山羊在网床上,家兔于兔保定台上仰卧保定。3.手术腹下剃毛消毒后,在前腹正中旁开约1cm处作一平行于腹中线的切口(家兔切口长5cm,山羊10cm),打开腹腔,在幽门部下约2cm处找出总胆管,其末端膨大部即为括约肌,在其中央和上方0.5cm处安放ー对引导电极,在腹部皮下插ー根针形电极,作接地线用。4.电极准备用25cm长的铜漆包线(直径200um),两端刮去绝缘漆,一端连接于前置放大器,另一端磨锐,用止血钳夹持,横向地穿过胆总管括约肌的浆膜层,露出0.5cm,然后将其弯曲反转,套在预先就套在该铜线上的ー根内径1mm、长2mm的塑料管内,将塑料管向下移动直达铜线根部连接处的组织。再把紧靠套管上铜线加以弯曲,防止套管滑脱。这样ー对双极引导电极就可牢靠地固定在要记录电活动的组织上。5.胆汁引出找出总胆管,分离结缔组织用眼科剪刀将总胆管剪一小口,插入直径2mm的塑料管,缝合固定,引出胆汁,塑料管的另一端套入光电记滴器内。
961.记录装置用多导生理记录仪。放大器参数选择:时间常数为0.03S,髙频滤波1000Hz,纸速0.75mm/S。每次先记录30min的电活动,以波形,频率和波幅为指标,观察针刺大肠俞、关元俞和小肠俞、后海穴组(电针刺激参数为20次/S,10〜20V)5min对括约肌电活动的影响。把记录胆汁分泌的塑料管套入记滴器内,记录针刺上述穴位对胆汁分泌的影响。2.药物试验观察针刺效应20min后,再进行药物试验。先皮下注射阿托品(0.5mg/kg)观察对胆管末端括约肌电活动和胆汁分泌的抑制效应。20min后再皮下注射新斯的明(0.05mg/kg),观察其兴奋效应。(四)观察结果1.将记录纸上胆管末端括约肌电记录记入下表。不同组穴电针对山羊(家兔)胆管末端括约肌电活动的影响穴位组兴奋抑制不明显大肠俞、关元俞小肠俞、后海2.将光电记滴器记录5min的胆汁分泌滴数填入下表格。不同组穴电针对山羊(家兔)胆汁分泌的影响穴位组増加(滴数%)减少(滴数%)不明显(滴数%)大肠俞、关元俞小肠俞、后海(五)分析讨论1.比较不同穴组的针刺效应,分析电针对胆管末端括约肌电和胆汁分泌的影响,说明穴位有无相对特异性。3.注射阿托品和新斯的明以后,对电针效应有何影响。4.十八、针刺对牛瘤胃运动的影响(一)目的1.掌握瘤胃运动描记的方法。2,了解电针治疗瘤胃疾病的机理。(二)准备1.动物水牛或黄牛。2.药物新斯的明,阿托品,生理盐水。3.器材
97(1)电疗机六合无线电元件厂制造的73-2型电疗机,电压9V。(2)19号6〜9cm毫针。(3)胃管内芯气球装置及缓冲(监视)装置。(4)电动双鼓马利氏记纹鼓装置一套。(三)方法和步骤1.实验装置和安装(图5—1)(1)投胃气球的安装①取橡皮管ー根,一端插入短玻璃管,玻璃管不露出橡皮管外,将气球口径部套于橡皮管外,外面再包ー层纱布,用丝线分三段缠绕扎紧(图5—2)。②将装好气球的橡皮管插入胃导管内,可使气球露出胃导管的进胃端,另一端游离于胃导管的体外端。(2)监视装置①取圆锥形的玻璃烧瓶ー只,底部装入适量砂石,以使其放置平稳。在橡皮塞上打两个孔,插入两个弯曲玻管。在ー根弯曲玻管的烧瓶内端,安装一个与投入胃内的气球相同的气球;将橡皮塞塞紧,并以石蜡密封,气球即悬于锥形烧瓶内;其烧瓶外端,与T形玻管相连,以备与胃内气球的橡皮管相连。②另ー弯曲玻管的烧瓶外端接上橡皮管,以备与马利氏气鼓相连。图5—1气球投胃法整体装置示意图图5—2气球固定(3)气球投胃及其与马利氏气鼓通连①在投胃气球和胃导管上涂ー层液体石蜡或其它植物油,将气球反折并裹于胃导管的进胃端,按照投胃管的方法经鼻缓缓地投入瘤胃内;将橡皮管的游离端接上T形玻管,即与监视装置的气球相通;通过T形玻管向胃内和烧瓶内的气球打气(一般以1001111注射器注入600ml气体为宜),可观察到烧瓶内的气球的充气量约占烧瓶体积的1/3左右。②将监视装置烧瓶上另ー根弯曲玻管接上马利氏气鼓。由于瘤胃运动的影响,使胃内气球发生压缩和舒张,由于胃内气球与烧瓶内的气球相通,烧瓶内的气球也发生相应地舒缩。烧瓶内气球的舒缩,引起烧瓶内气体的体积的改变,通过玻璃弯管传递到马利氏气鼓,马利氏气鼓随着瘤胃的运动而发生上下起伏的变化,再通过描记笔的运动记录下来。2.瘤胃描记(1)电针关元俞安装完毕后,即可开动记纹鼓记录。先描记15min作为正常对照,然后针刺关元俞穴,再描记15nlin,作为针刺后的结果。(2)药物对比试验①同上法先描记30min正常瘤胃蠕动,然后取甲基硫酸新斯的明(水牛10mg,斛7mg),加于150ml的生理盐水内进行耳静脉注射,再描记lh,作为注射后的结果。②同上法先描记正常瘤胃运动30min,然后进行电针,当出现瘤胃运动明显加强时,再注射硫酸阿托品,连续描记瘤胃运动的变化。或者,先给试验动物注射硫酸阿托品,然后电针,比较瘤胃运动的变化。(3)注意事项
98①投胃管之前,首先检査气球装置及马利氏气鼓密闭系统是否有漏气现象,若发现漏气,应立即排除。②向气球内打气时,不能打得过多,以免气球过度紧张影响描记,甚至引起气球破裂。③描记结束后松开T形玻管,放出气球内的气体,同时拆卸各接头,最后将装有气球的橡皮管连同胃导管一同抽出。④抽出胃导管时,如发现有障碍,这可能是气球被瘤胃内容物裹缠所致。不可强行抽拉,以免橡皮管拉断落入胃内。这时可轻轻地将胃导管推回胃内,反复推拉多次,即可松动而被抽出。(四)观察结果瘤胃运动情况记录表组别蠕动次数波髙波幅针前针后针前针后针前针后电针关元俞注射新斯的明注射阿托晶阻断(五)分析讨论1.电针关元俞对瘤胃运动仃何影响?2.电针关元俞对瘤胃运动的影响与新斯的明相比有何不同?十八、电针对山羊胃电图的影响(一)目的掌握EGG—1A型胃电图仪的使用,学会分析胃电图,观察针刺对山羊胃电图的影响。(二)淮备1.动物山羊。2.器材EGG-1A型胃电图仪,57-6电脉冲治疗仪,直径0.7cmAg-AgCI圆盘碟状电极,心电图参考电极,人用不锈钢亳针,尼龙搭扣,软质保定绳,保定网,酒精棉球,生理盐水棉球。分析胃电图用20cm直尺、两脚分规和简易计数器。(三)方法和步骤1.将禁食24h的山羊仰卧保定于网床上,在痛胃、网胃、瓣胃和皱胃的体表投影部位及股内侧剪毛,反复用酒精棉球脱脂。2.将4个Ag-AgCl碟状圆盘电极和2个参考电极板垫以生理盐水棉球或涂以导电糊分别放在I〜IV胃与股内侧,尼龙搭扣妥为固定,把电极导线接入胃电图仪,以单极导联无创伤法记录。先记录lOmin禁食状态下的正常胃电图,再观察针刺左后三里、滴水穴组(电针刺激参数为20次/S、10〜20V)后胃电图lOmin,停止电针后再记录lOmin。3.EGG-1A型胃电图仪的操作步骤(1)装记录纸首先按下左边记录纸匣按板,盖板自动跳起,装入记录纸,然后用右手将记录纸拉出ー小截,再将记录纸匣放进。要注意记录纸必须在中间位置,最后用左手轻轻按下盖板。(2)通电各旋钮和开关的位置①电源开关——“美;②记录开关——“准备”;③增益调节开关——“1”;④工作选择开关——“描记”;⑤导联选择开关——“〇”;⑥走纸速度选择开关——“1”;⑦地线插孔,插入接地线。(3)接通电源,开机预热2〇〜30min。(4)校准定标电压。①撤下记录开关“观察”钮,工作选择开关置于“校准”,走纸速度开关置于“1”
99②调“零位调节”旋钮,使热笔居中。③揪下记录开关“记录”钮,走纸开始。④按“校准”按钮,热笔应能描绘出幅值为10曲矩形波(15OUV)。⑤若矩形波幅值不对,可适当调整“热笔温度”调节旋钮,使其达到10廊。完毕后,将工作选择开关置于“描记”。报下记录开关“准备”钮。⑥定标电压校准后(150nV),不得随意改动“热笔温度”旋钮。(5)电极固定将记录开关“准备”钮揪下,导联选择开关置于“0”,把七芯导联线插头插入输入插座,Ag-AgC!电极经过生理盐水棉球或导电糊和羊的I〜IV胃部相接触,各导联线的颜色和对应胃如下:“1”导联一一红色ー一瘤胃;“2”导联ー一绿色ーー网胃;“3”导联ー蓝色ー瓣胃;“4”导联ー一白色一ー皱胃。(6)胃电图记录①将导联选择开关置于“0”,将记录开关“观察”钮撤下,此时热笔应在中间位置。否则调整“零位调节”旋钮使其居中。②将导联选择开关从“〇”一“1”,可观察“1”导联所对应的瘤胃胃电图;从“0”一“2”,可观察“2”导联所对应的网胃胃电图;从“〇”t“3”,可视察“3”导联所对应的瓣胃胃电图;从“〇”一“4",可观察“4”导联所对应的皱胃胃电图。③将记录开关“记录”钮揪下,此时走纸开始,可描记胃电图波形。④每描记ー个导联胃电图,都必须重复②、③步操作。⑤操作完毕后,将开关恢复至开机前状态,切断电源。附:胃电图参数分析。振幅值:系由后往前测量10个波峰峰值的平均值:频率:系由后往前测量3min的波数平均值。(四)观察结果将胃电图纸上的胃电记录,经过分析其结果记入下表。电针左“后三里”和“滴水”穴组对山羊胃电图的影响胃电参数频率(次/分)振幅(uV)胃的部位IIIIIIIVIIIIIIIV电针前电针时电针后(五)分析讨论1.体表胃电记录的优越性。3.电针后三里、滴水穴组后比针刺前对各胃有无显著性影响。十九、电针对山羊胃肠电活动的影响(一)目的观察针刺不同穴组对山羊胃肠电活动的影响,掌握浆膜下埋藏电极的方法及多导生理记录仪的操作。(二)准备1.动物山羊。2.药物乌拉坦或静松灵。3.器材多导生理记录仪及相应的屏蔽室,57-6电脉冲治疗仪,直径1.5mm伯金丝电极,Ag-AgCl圆盘电极,人用不锈钢毫针,剪毛剪,外科剪刀,手术刀,止血钳,眼科弯头镜子,玻璃注射器,
10012G针头,缝合圆针,三棱缝针,缝线,敷料,软质保定绳,保定网床。分析胃电图用20cm直尺、两脚分规和简易计数器。(三)方法和步骤1.麻醉先称体重,静脉或腹腔注射乌拉坦1〜1.2mg/kg体重,如用静松灵,按2mg/kg肌肉注射。2.保定山羊置于网床上仰卧保定,四肢捆扎在网床框上。3.手术术部剪毛,取右上腹旁1cm平行于腹中线切开10cm,拉出瘤胃,在瘤胃中部避开血管,用手术刀轻轻划破浆膜,用弯头镜子伸进浆膜下分离出约0.7X0.3cm的浆膜下腔,插入销金丝电极,并用缝线固定牢。依次找到网胃、瓣胃、皱胃和十二指肠、空肠、回肠和结肠,埋藏电极的方法同瘤胃。每埋好一个电极,均应记录电极导线的颜色与相关胃肠。还纳好胃肠后,依次缝合腹膜与肌层。切口后部皮下用止血钳撑开筋膜,装入Ag-AgCl圆盘电极作接地用,并缝合固定在皮肤上。然后缝合封闭术部皮肤。术后4h进行试验。4.多导生理记录仪的操作方法(1)开机预热!Omino(2)电极插入放大器的输入面板。(3)前置放大器参数选择:时间常数为2S,高频漉波常数为15Hz。(4)将导联选择开关置记录档上,放大器的放大倍数适中。(5)调整墨水描记笔到中心位置。(6)走纸速度0.7mm/S(开始记录观察。(7)试验结束将导联选择开关放在校正电压档,打出500nV校正电压,然后关机。5.试验程序胃电和肠电的记录均采用连续三段记录法,以便分析和统计学处理,即以电针前为对照,比较电针时和电针后的胃肠电活动指标的变化。(1)针刺前记录lOmino(2)电针脾俞和天枢穴组(刺激参数为20次/S,10〜20V)lOmin,且同时记录。(3)拔针后再记录!Omino(4)再改试其他穴组,步骤同(1)〜(3)〇胃肠电参数分析,参考《针刺对山羊体表胃电图的影响》中的胃电图参数分析。(四)观察结果不同穴组电针对山羊胃电活动的影响瘤胃网胃瓣胃皱胃穴位组兴抑不兴抑不兴抑不兴抑不奋制明奋制明奋制明奋制明显显显显脾俞、天枢大肠俞、关元俞不同穴组电针对山羊肠电活动的影响十二指肠空肠回肠结肠兴抑不兴抑不兴抑不兴抑不奋制明奋制明奋制明奋制明显显显显脾俞、后海后海、小肠俞(五)分析讨论1.根据记录分析胃肠电的波形常有几种。2.各穴组的电针效应有否差异性,说明什么问题。
101二十、针灸对机体免疫力的影响第一,氨一気激光穴位照射对细胞免疫功能的影响(一)目的运用植物血凝素(PHA)皮内试验的方法,观察氮ー疑激光照射交巢穴对动物细胞免疫功能的影响。(二)准备1.动物成年健康家兔,每组2只或15〜21日龄的健康仔猪每组2头。2.药物PHA冻干粉(广东省医药エ业研究所产品)10mg,用生理盐水1ml溶解成皮试液;酒精棉,碘酊棉。3.器材気ー氣激光治疗机(功率为5〜8mW)、玻璃注射器(1ml)、游标卡尺、毛剪、兔保定台。(三)方法和步骤将两只家兔(ー只用激光照射,ー只为对照)分别仰缚于兔保定台(仔猪可仰卧保定),剪净脐左侧(或右侧)约lOcn?左右的被毛,常规消毒,皮内注射PHA皮试液0.1ml,24h后用游标卡尺测量局部硬结最大直径和最小直径,取其平均值(胸)。而后对其中ー只兔用功率为5mW的氮ー颊激光治疗机照射交巢穴。激光输出端与穴位的投射距离为10〜15cm,照射2min。在该兔未注射PHA皮试液的右侧(或左侧)剪毛、消毒,皮内注射PHA皮试液0.1ml。24h后用游标卡尺测量注射部位硬结的最大直径和最小宜径,取其平均值(mm)。对照兔除不照射外,其余实验操作同照射兔。(四)观察结果将观察结果,记录于下表。照射而硬结的平均値(廊)照射后硬结的平均值(廊)注射部位反映照射兔对照兔(五)分析讨论试将结果用中西兽医理论阐明本实验的机理。第二,氣一気激光穴位照射对血清蛋白含量的影响(一)目的比较氮ー就激光照射交巢穴前后血清中几种蛋白含量的变化,探讨激光照射穴位对机体免疫力的影响。(二)准备1.动物健康仔猪或羊。2.药物(1)巴比妥缓冲液(pH8.6离子强度0.06)称取巴比妥钠6.38g、巴比妥0.83g于500ml容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度。(2)染色液取氨基黑10B0.5g、甲醇50ml及冰醋酸10ml,再加蒸储水40ml。(3)漂洗液乙醇45ml,冰醋酸5ml及蒸储水50ml。(4)浸出液0.4mol/L氢氧化钠溶液。(5)透明液无水乙醉?0ml及冰醋酸30ml.3.器材氮ー颊激光治疗机(波长为6328A,光斑直径为0.25cm,功率5mW),电泳仪,醋酸纤维素薄膜,微量加样器,载玻片,72型分光光度计,注射器,冰箱等。(三)方法和步骤1.采血试验仔猪或羊分别在激光照射前与照射后24h采血、分离血清,以备作血清蛋白电泳用。2.照射方法用氮ー发激光治疗机照射仔猪交巢穴Imin,照射距离为10~15cm.
1021.血清蛋白电泳(1)准备在电泳糟中加入适当深度的缓冲液,使两槽的液面相平衡。在电泳槽两边放上用缓冲液润透的四层滤纸,滤纸ー侧浸入电泳槽中,利用滤纸起的毛细管作用保持薄膜湿润。(2)点样将醋酸纤维素薄膜浸入巴比妥缓冲液中浸泡20~40min,待完全浸透后,取出夹于滤纸中,轻轻吸去多余的缓冲液,再用微量加样器取3U1被测血清点在薄膜的无光泽面的一端1.5cm处.待血清渗入膜内后,立即将膜反转(即血清面向下),点样端连接负极。置于电泳槽的支架上平直放好,静置lOmin,随后将电泳槽盖好,防止水分蒸发。(3)通电接通电源,调节电压或电流量,电压,10〇〜160V.电流量,按0.4〜0.6mA/cm膜宽度;通电时间,夏季约40min,冬季约50min。图样展开25〜35mm后,关闭电源。(4)染色通电完毕后,将薄膜直接浸于染色液中,经5〜lOmin取出,用漂洗液浸洗数次,直至背景无色为止。(5)定量将漂洗净的薄膜吸干,剪下各种蛋白的色帯,并在无蛋白部分剪下与a「球蛋白同样大小薄膜ー张,分别浸入4mlO.4mol/L氢氧化钠中,振荡数次,让薄膜上的色泽完全浸出。然后,倒出浸出液用72型分光光度计在58〇〜620nm波长下,以空白管校正光密度至〇点,测各条色带的光密度。⑹计算光密度总和为:T=A+a,+a2+P+y各部分蛋白质的百分数为:白蛋白紀A/TX100%,a।球蛋白%=aJTX100%,入球蛋白%=a2/TX100%,。球蛋白%=B/TX100%,Y球蛋白%=Y/TX100%。(7)透明将漂洗干净的薄膜放在玻璃板上,不可有气泡。然后浸于透明液中2〜5min,取出放室温待其自然干燥,即成透明的膜,可用密度计扫描进行定量或作标本永久保存。(四)观察结果氣一気激光照射穴位前后各种蛋白含量变化的比较照射前闕)照射后制)备注Aaia2g¥(五)分析讨论根据实验结果说明気ー筑激光照射穴位对免疫机能的影响。第三,针刺脾俞穴对T淋巴细胞比值的影响(-)目的比较针刺脾俞穴前后动物T淋巴细胞比值的变化,探讨针灸对机体免疫力的影响。(二)准备1.动物马或羊。2.药物亚硝酸钠,对品红,磷酸二氢钾,磷酸以二钠,aー醋酸奈酯,乙二醇单甲醛,蔗聚糖,60%泛影葡胺注射液,甲基绿,甲醛。3.器材电泳仪,离心机,试剂瓶,试管,试管架,载玻片,血细胞计数器,显微镜等。(三)方法和步骤1.血样采集将动物妥为保定,于颈静脉处剪毛、消毒、采血3ml(加肝素25-50u/ml血),作为针刺前对照血样;然后针刺动物的脾俞穴,分别在针后12h、24h颈静脉采血3ml(肝素25—50y/m!血),作针刺后血样。2.检测分别取针刺前、针刺后12h和24h的抗凝血样0.5ml,各加入生理盐水1.5ml稀释混匀后,沿试管壁缓慢加入到装有0.75ml蔗聚糖(Ficoll)分层液的试管中,使血液浮于分层液面
103上;400017min离心20min,将标本分四层,最上层为血浆层,第二层为白膜层、以淋巴细胞为主,第三层为分层液,第四层为粒细胞及红细胞层;用吸管取第二层转移到另试管中,加入适量生理盐水稀释,2000转/min离心5min,弃去上清液,取沉淀物涂片:涂片吹风或自然干燥后,置于甲醛蒸汽中固定10min,浸入孵育液中置于37ヒ恒温箱中浸染45~60min;取出用流水冲洗2-3min,空气干燥,再用甲基绿复染1-1.5min,取出常水冲洗,空气干燥。将涂片在油镜下计数200个淋巴细胞,计算T、B淋巴细胞的百分比。在油镜下,淋巴细胞及其它白细胞的胞核染成绿色,胞浆灰色:T淋巴细胞的胞浆中呈现大小不同、数量不等的黑红色颗粒(一般2-5个);B淋巴细胞,胞浆中无黑红色颗粒。(四)观察结果将针刺前、针刺脾俞穴后12h、24h的T淋巴细胞结果记于下表。针刺前居)针刺后12h(%)针刺后24h(%)(五)分析讨论根据实验结果说明针刺对T淋巴细胞比值的影响。附:T淋巴细胞酯酶染色法的试剂配制1.分层液(1)9%蔗聚糖(Ficoll)称取蔗聚糖9g,加入双蒸馈水100ml。(2)33.9%泛影葡胺60%泛影葡胺20ml/A,加双蒸禰水15.38ml。(3)分层液配制取9%蔗聚糖24份、33.9%泛影葡胺10份进行混合(比重为1.070-1.080)。4℃避光保存,可用6个月。2.孵育液(1)4%亚硝酸钠液称取亚硝酸钠400mg,溶于10ml蒸储水中。需新鲜配制。(2)4%对品红溶液对品红4g,加2moi/L盐酸100ml中,水浴中溶解,过滤。4℃避光保存。(3)磷酸缓冲液(pH7.6,M/15)先分别配制甲液(KH2P0<9.08g,溶于1000ml蒸懶水中)和乙液(无水N^HPO.9.47g,溶于!000ml蒸储水中),然后取甲液13ml和乙液87ml混合,即成M/15磷酸缓冲液。(4)2%a-醋酸奈酯溶液称取aー醋酸奈酯2g,溶于100m!乙二醇单甲醛中。4℃避光保存。(5)孵育液的制备取4%亚硝酸钠溶液。.3nli于小烧杯内,然后加入対品红溶液0.3ml,边加边摇,混匀后放置1〜2min,再加M/15磷酸缓冲液8.9ml,充分混合后缓慢滴入2%a-醋酸奈酯溶液0.25ml,边滴边摇,最后呈现茄花样蓝紫色,有细粒状沉淀,液面似有一薄层油,将pH调整至6.l(pH5.8〜6.4)即可。此量可染片6片,如欲多染,可按比例增量。3.固定液甲醛原液。4.甲基绿复染液取甲基绿1g,溶解于100ml热蒸储水中。第四,针刺脾俞穴对白细胞吞噬能力的影响(一)目的比较针刺脾俞穴前后白细胞吞噬能力的变化,探讨针灸对机体免疫力的影响。(二)准备L动物马、猪、羊等。5.试剂与药物(1)标准菌混悬液取马流产抗原(每ml含100亿菌液)1ml,加生理盐水4ml,制成每ml含20亿个菌的菌液。(2)试验用菌液培养24h以内的葡萄球菌,用生理盐水1〜2ml稀释,制成和标准菌液同样浊度的菌液。(3)75%酒精,3%碘酒,瑞氏液。6.仪器注射器,水浴槽,离心机,吸管,载玻片,显微镜,血细胞计数器等。
104(三)方法和步骤将实验动物妥为保定,于颈静脉处剪毛、消毒,分别在针脾俞穴前与针后6h各采血3ml»取针前与针后全血或血浆各0.5ml,分别加试验用菌液0.5ml混合均匀放37℃水浴30min后,用500r/min离心5min,弃去上清液,吸取沉淀物一滴进行涂片,血膜干燥后,用瑞氏液染色,蒸储水冲洗,自然干燥,油浸镜检。每片检查100个嗜中性白细胞,计数已吞噬的细胞数和被吞噬的细菌总数,分别计算噬菌率和吞噬指数(如100个白细胞中有70个白细胞吞噬了细菌,则噬菌率为70%,共吞噬了300个细菌,则吞噬指数为的300+100=3)。(四)观察结果将实验结果填入下表。针刺前针刺后噬菌率(%)吞噬指数噬菌率書)吞噬指数(五)分析讨论分析针刺脾俞穴前后白细胞的噬菌率和吞噬指数有什么变化?这种变化在临床上有什么重要意义。二十一、破伤风类毒素穴位注射对机体抗体效价的影响(-)目的比较穴位和非穴位注射破伤风抗原后动物抗体效价的变化,探讨穴位对特异性免疫的影响。(-)准备1.动物选择体重相近,性情温驯,无任何疾病的健康马、骡8〜10匹。2.药物破伤风类毒素抗原,羊毛脂,液体石蜡,酒精,碘酒,草酸钠,生理盐水,免疫血清。3.器材采血针,注射器,亳针,试管,吸管,冰箱。(三)方法和步骤1.基础兔疫用破伤风抗原加佐剂按3:3:2的比例(抗原:羊毛脂:液体石蜡),每匹马3mL分2次颈背肌注,两针间隔10d,第二针注射后14d采血10ml,测定抗体效价单位作为基础免疫效价。2.免疫试验按基免效价平均单位将动物分为实验组和对照组。每匹马准备破伤风抗原加佐剂(比例同上)10mL,依次按1、1、1、2、5ml五针注射。对照组,按常规颈背肌肉注射;实验组,取后三里、风门、肺门、肾俞、后海、百会等穴注射,每次一穴,注射时穴位剪毛消毒,先将注射针头刺入穴位,待出现针感后接上注射器注入抗原。每两针的间隔时间为7d,分别于每次注射前和第五针后7、9、lid各采血10ml,测定抗体效价,测定抗体的动态变化和高峰期。3.抗体效价测定方法采用絮状反应法。即以不同量的抗毒素,和一定量的毒素在试管中混合,观察最早发生絮状沉淀反应的一管,计算和ー单位抗毒素首先发生絮状沉淀反应的毒素量,即为ー个絮状沉淀单位(Lf),它可应用于测定抗毒素与毒素的结合力,当毒素和抗毒素中任一为已知时,即可测定未知的含量。每毫升毒素(Lf)含量可按下列公式计算:Lf/ml=抗毒素单位/mix抗毒素ml数+毒素ml数毒素与抗毒素的絮状沉淀反应测定方法举例:管号12345618910毒素(ml)2222222222抗毒素(ml)0.0310.0320.0330.0340.0350.0360.0370.0380.0390.0415CCCCCCCCC时间30PPPPPP(min)60F
10580FFFFFFC:示混浊:P:示颗粒沉淀;F:示絮状沉淀假设本试验的血清,每亳升含抗毒素430个抗毒单位。其中第五管最先出现絮状沉淀反应,按照上列公式计算,每毫升毒素含7.52Lf单位。Lf/ml=430X0.035+2=7.52(四)观察结果将每次测定的抗体效价单位(Lf)填入下表。组别动物号基免效价1注前2注前3注前4注前5注前后7d后9d后1Id实验组对照组总量平均效价(五)分析讨论比较穴位与非穴位注射抗原对机体免疫抗体效价的影响。第六章阉割术一、猪的阉割法(-)目的掌握公、母猪常用的阉割方法。(-)准备1.动物5〜15kg的健康母猪或公猪,15kg以上的母猪或公猪,隐睾猪和阴囊疝猪。2.药物5%碘酊和70%酒精。3.器材阉猪刀具,缝针和缝线。4,术前检查(1)首先了解猪群近期内有无传染病发生,猪的健康状态如何,发现病猪,则不阉割。(2)母猪出现食欲不振、阴户红肿、流白色分泌物等发情现象,则不阉割。(3)公猪检査,还应注意有无阴囊疝和隐睾现象,一旦发现,则作特殊阉割法。(三)方法与步骤L小挑花术(1)保定选ー稍有坡度的清洁场所,使猪头部朝下,以利手术。术者取骑马式站立,或坐凳式蹲坐。凳的高低与术者小腿的长短相近,以便确实保定。术者以左手抓住小猪的左后腿,右手捏住左侧膝前皱裳,使猪右侧卧,背向术者。右脚踩住猪颈左侧(或踩住猪右耳),脚跟着地,脚尖用力,把小猪左后腿向后伸直,使猪呈半仰卧姿势,左脚踩住猪的左后肢小腿部。(2)确定术部位于膝前皱壊与腹中线之间,与倒数第2、3乳头之间相对。拇指按压可感有最低位的凹陷,位于猪背上的中指可触及微结节。(3)手术过程术部消毒,将其皮肤稍向侧方牵移,左手中指抵于髄结节,拇指垂直压迫术部;右手持刀,以拇指及食指控制刀刃的深度,刀尖沿左手拇指前垂直切开皮肤约0.8~1cm(基本与刀刃宽度一致),深度以感到切开腹膜或见腹水为度;此时迅速将阉割刀向上拨动,以扩大创ロ,同时左拇指乘势继续用カ下压,左脚稍用カ踩猪,使猪鸣叫,借猪鸣叫、腹压升高之势,子宫角可随之跳出,
106称之为‘‘透花‘若不能跳出,则用刀柄继续拨动创口,拇指用カ按压,尽量让子宫角自动跳出。若还不能跳出,则用刀柄钩勾取或手指勾出子宫角。当子宫角露出切口外后,继续牵拉子宫角,其方法有两种。一种是用左右手食指第二指节背面用カ压迫腹壁,用两手拇指交替移动拉出两侧子宫角、卵巢及部分子宫体。另ー种是以左手弯曲的食指用カ压迫切口旁腹壁、拇指和其余手指固定子宫角,右手拇指和食指向外牵拉子宫角、并交给左手固定,如此交替牵引,直至拉出卵巢。待两侧子宫角、卵巢、输卵管伞均暴露于创口外面后,ー并捻转或刮挫摘除,切不可将卵巢掉入腹腔。摘除后,切口一般毋需缝合,若切口超过1cm以上则应缝合。最后消毒切口,提起猪的后肢,轻轻摇动,以防肠管嵌在切口内。(4)手术要点和注意事项①阉猪保持空腹较好,子宫容易跳出。若饱腹,则肠管后移,子宫角被压不易跳出。②保定体位应呈半仰卧姿势,术者宜穿胶底鞋或布鞋,既可保定确实,又可防止踩伤小猪。③切口定位必须准确,偏前则肠管容易挤出,偏后则膀胱圆韧带容易挤出。如遇以上情况,应向相反方向部位勾取子宫角。膀胱圆韧带与输卵管比较相似,应注意区别:圆韧带为乳白色,质地较坚韧;输卵管为粉红色,常伴有鲜红色的输卵管伞。④下刀深度视猪体型谨慎控制,避免损伤腹主动脉。切口边缘要整齐,一刀切透皮肤、肌层、直透腹膜,刀子向上飘动,拇指顺势下压,以利子宫自然跳出。⑤小猪子宫角比较细嫩,尤其子宮角分叉处,易于拉断,故不可用カ过猛,同时防止小猪骚动,以免拉断子宫角。2.大挑花术(1)保定体型较小的母猪(15kg以上),术者右手抓住猪的左侧膝前皱賤,使猪右侧倒卧,术者站在猪的背侧,右脚踩住颈部,助手拉住左后腿。体型较大的母猪或老母猪,可令几位助手协助保定。一人握紧两耳,另一人抓住猪的左后腿,再用右脚突然拨动猪体右侧,使猪右侧倒卧,立即在猪颈部压上一棍木杠或扁担,两端各由一人按压,固定住头颈,上侧左后肢由一人保定。(2)确定术部位于左侧股部三角区的中央。三角区的ー边是髄结节到腹下所引的垂线,交于膝前皱裳,另ー边是从膝前皱裳向最后肋骨与肋软骨连接处所引直线,第三边即是最后肋骨与肋软骨连接处向髅结节所连直线。(3)手术过程术部按常规剪毛消毒。术者屈膝位于猪背侧,左手拇指按定切口位置。右手持刀沿左手拇指所按部位作一半月形切口,切口大小视猪体大小而定。以右手食指垂直戳破腹肌及腹膜,对于腹壁较厚的老母猪,可先用刀尖端将腹膜戳ー小口,再用食指分离扩大。切口打开后,右手食指伸入腹腔,沿着腹腔背侧内壁向骨盆入口顶部两侧触摸卵巢,摸到后用第一指节勾住卵巢系膜向外勾拉,也可借助刀柄钩协同勾出。若体型过大、过肥的老母猪,手指难以抵达腹腔下部,可在右侧腹下垫上ー块木块或砖头,以助子宫位置抬高,便于触摸对侧卵巢。若难以勾出对侧卵巢,可用“盘肠法”,即取出于宫角后,逐渐牵引至末端,把卵巢带出。牵引时,勿使子宫角暴露过多,可边牵引边送回。卵巢勾出后,一般毋须结扎,以钝性分离法摘除掉,若卵巢和输卵管充血,则宜结扎后摘除。卵巢摘除后,一般只缝皮肤即可。如创ロ较大,腹壁肌层不能交错覆盖,则应将腹膜作连续缝合,皮肤、肌肉ー并作结节缝合。最后消毒创口。(4)手术要点及注意事项①触摸和勾拉子宫、卵巢的操作,民间总结为“上花对下花,点滴也不差,伸指入,屈指出,小肠软似棉,子肠如豆角,不离尿胞窝”。对临床实践有重要的指导意义。②缝合前必须使子宫角、小肠等完全还纳腹腔。③术后护理,注意防止感染。3.公猪阉割术
107(1)保定小公猪保定时,术者右手握住小猪的右后腿而倒提,头向左侧,背向术者,以左脚踩住猪的颈部,右脚踩住尾根,并用左手腕部按压在小猪右侧大腿的后部,使其向前向上。大公猪保定的方法与大母猪基本相同。(2)确定术部阴囊缝旁侧1〜2cm,尽量向下,不要靠近肛门。(3)手术过程小公猪阉割时,术者以左手中指的背面由前向后顶住一侧睾丸,拇指和食指捏在阴囊基部,将睾丸挤向阴囊底部,以固定睾丸,并使阴囊壁皮肤紧张,便于开刀。术部消毒后,右手持刀沿睾丸最突出部切开皮肤和总鞘膜,挤出睾丸;左手握住睾丸,食指和拇指捏住鞘膜韧带与睾丸连接部;右手撕断鞘膜韧带(白筋),向外牵引睾丸;左手把鞘膜韧带和总鞘膜还纳阴囊后,用食指和拇指固定精索;右手松开睾丸,用食指和拇指在睾丸上方1〜2cm处的精索上来回刮挫或边捻转边刮挫,首至刮断为止。体型很小的猪,也可用刀直接切断精索。于原创口内切开阴囊中隔,以同法摘除另一・侧睾丸。最后消毒切口,挤出包皮囊内白色液体,解除保定。大公猪的阉割方法与小公猪基本相似,仅在睾丸上方1〜2cm处结扎精索后,再摘除睾丸。(4)手术要求与注意事项①术前检査阴囊,发现阴囊疝和隐睾,应作特殊阉割术。②固定睾丸、绷紧术部皮肤,是切开皮肤、总鞘膜和顺利挤出睾丸的关键。③注意术后护理,谨防破伤风。2.隐睾猪阉割术(1)保定根据腹壁切口的位置,采取半仰卧保定(呈45°〜60°倾斜)或倒悬式保定。(2)确定术部一侧性隐睾的术部切口,在隐睾同侧的髓结节向下引一条垂线与腹中线交叉的上方2cm处腹壁上;两侧性隐睾的术部,在左侧髅结节向腹正中线引垂线的交点上方2cm处。也有人采用与阉割大母猪相同的手术部位。(3)手术过程术部消毒,作3〜6cm的切口。通过切口,伸入食指寻找睾丸。睾丸移动性較大,常在腹股沟区、耻骨区、韶区和肾脏后方的腰区,找到睾丸则拉出切口,结扎精索,切除睾丸,然后分层缝合,消毒切口。3.阴囊疝猪阉割术(1)保定一般采用倒悬式保定,可使小肠返回腹腔,利于手术。也可な侧横卧保定。(2)确定术部疝气发生在哪ー侧,就在阴囊的哪ー侧切口。(3)手术过程先将阴囊内的小肠整复回腹腔内。术部消毒,切开阴囊壁,注意不要切破总鞘膜,剥离总鞘膜至腹股沟管环,并固定之,防止小肠再次挤向总鞘膜,就在固定处用消毒丝线横穿ー针,作“8”形结扎,离结扎线外侧1〜2cm处切断,则总鞘膜、精索连同睾丸一并摘除。若肠管不能送回腹腔时,可能发生粘连,则需小心切开总鞘膜,伸入手指,仔细分离肠管,送回腹腔,再按上法摘除睾丸。若发现腹股沟管环过大,则还须缝合腹股管环,最后缝合皮肤,消毒切口。(四)观察结果观察和护理您所阉割的猪。(五)分析讨论总结分析阉猪的要点和注意事项。二、公鸡的阉割法(-)目的掌握公鸡常用的阉割方法。(-)准备1.动物公鸡,体重1kg左右,以能鸣啼者为宜。公鸡过小睾丸也小,不易套取及阉净,阉后也影响发育;公鸡过大,睾丸根部血管粗大,锯断睾丸血.管时,常致大出血,甚至死亡。2.药物70%酒精棉,冷水1杯。
1081.器材阉鸡器,包括阉鸡刀、扩创弓、扩创钳、睾丸勺、镜子、睾丸套等。(三)方法及步骤1.局部解剖切口部位在右侧倒数一、二肋骨之间与競关节水平线相交处上下,从外向内为皮肤、肌肉及腹膜,腹膜紧贴腹部气囊和胸后气囊壁。睾丸位于倒数第二、三肋骨头的下面、肾脏的前方,两睾丸之间有主动脉及后腔静脉分布。睾丸一般呈椭圆形或梭形,多为淡黄色,也有呈黑色、灰色或灰黑色的;其体积的大小,随月龄与品种不同而异。睾丸前端自系膜与胸前气囊壁相联系,外侧有系膜与胸后气囊壁相联系,左右睾丸之间有系膜隔开,故套取睾丸之前,必须首先捣破和断离系膜,才能顺利摘除。2.保定术者坐在小凳上(或蹲着)将公鸡两翅交扣后,两翅踏于术者左脚下,把鸡腿并拢向后拉直,踏于术者右脚下,使公鸡成左侧卧位,背向术者。3.术部从概关节向前引一水平线,与最后二肋之间的相交处,是切口中点。4.术式(1)术部处理先把切口及附近的羽毛全部拔掉,用冷水湿透周围羽毛,充分暴露切口。(2)切开术部用左手拇指按准切口,右手持刀沿左手拇指前缘与肋骨平行作长2〜3cm的切口,下刀至腹膜。(3)扩张切口用扩创器扩开切口,调节扩创器到适当程度。(4)捣破腹膜用睾丸套尖锐的一端朝腹膜向上挑紧,用阉鸡刀划破腹膜,同时分离腹部气囊壁,便切口通向腹腔深部。(5)寻找与游离睾丸左手执睾丸勺,将肠管向下向后拨开,即可看到右侧睾丸,如果睾丸大者不拨开肠管也能看见。右手用镜子把睾丸被膜捏离睾丸实质,用睾丸套尖端撕破被膜,使睾丸完全暴露「被膜之外。继之左手持睾丸勺将右侧睪丸附近的肠管向后拨开,即可见到与左侧睾丸相隔的二层薄膜。右手用綴子避开血管将薄膜捏紧,适当向上拉,左手用睾丸勺的尖端撕破薄膜,放下镜子,将左手的睾丸勺移交给右手,用睾丸勺将左侧睾丸向上翻起。(6)摘除睾丸如果睾丸较大,先取上面(右侧)的;若睾丸过小则先取下面(左侧)的,以免摘除上面的睾丸时,损伤血管出血,以致不易找到下面的睾丸。摘除睾丸的手法是左手持睾丸勺上棕丝的游离端,右手持勺端,自怀中向外转,绕过睾丸游离边的下面,套住睾丸根部;然后左右手交叉,上下均匀拉动棕丝,锯断睾丸。若出血,可用睾丸勺背面沾冷水迅速压住睾丸根部,血止后,继续用同法摘除右侧睾丸,并轻轻取出凝血块。对于小公鸡则适用小竹筒制的套睾器,即用内直径0.1cm的小竹枝,长为5cm,将一条约12cm长的棕丝等分弯折穿过5cm长的小竹筒,在下端弯折处留一套睾的小圆圈,借睾丸勺的帮助,将两侧睾丸套在小圆圈内,然后缓缓将棕丝上提,待棕丝圆圈收缩至睾丸根部时,迅速将棕丝上拉,把睾丸根部切断,然后用勺把睾丸取出。(7)切口处理摘除睾丸后,取出扩创器,切口不须缝合,在术口贴上羽毛,松开交扭的翅膀,解除保定,让其安静休息。5.手术要点及注意事项(1)选准切口部位,是准确暴露和保证顺利摘除睾丸的重要一环。在摘除睾丸之前,充分刺破腹膜,分离睾丸被膜、睾丸系膜与气囊壁的联系,使棕丝紧贴睾丸根部,才能顺利取出睾丸。(2)术中避免损伤血管,若遇出血时,立即用冷水按压止血,待血止后,轻手将凝血块取出,防止内脏粘连;同时避免刺破气囊,引起气肿。(3)摘除睾丸要细心,避免将睾丸弄碎,做到完整摘除,如有残留或睾丸掉入腹腔找不出来,都达不到阉割的目的。(4)对大公鸡的阉割,先喂几勺冷水,使血管收缩后进行阉割,可减少出血死亡。(5)凡是脚高冠小、绿耳朵鸡、白鸡、体格大的品种鸡,其个体特异性不同,比较难阉,故手术更应小心仔细。
109(四)观察结果术后须观察手术效果,注意公鸡阉后的精神、动态、食欲、鸡冠色泽、粪便等情况,尤其应注意有无后出血,以便及时止血补救。(五)分析讨论1.公鸡阉割术的手术要点有哪些?2.本次实习中,术部确定如何?手术操作如何?有哪些优缺点?第七章病证防治ー、外感热病诊治(一)目的外感热病主要包括六经病证和卫气营血病证。通过实验要求掌握外感病的辨证施治步骤、方法,确定治则及选方用药原则。(-)准备1、动物兽医院门诊、住院或生产厂(场)外感热病患者。2、药物治外感热病的常用中药。3、器材常用的动物保定和诊疗器械,如保定绳,中药粉碎、调制和投药器具,中兽医病志等。(三)方法和步骤1、诊断按照四诊的方法,对病畜进行全面、系统的检查,将检查所获得的资料填入病志。诊断过程中要注意掌握正确的方法,望、闻、问、切要“四诊合参”。2、辨病温热病大多属于传染病,但温热病与传染病的含义并不完全相同。温热病既包括急性热性传染病,如流感、仔猪水肿病、禽霍乱、犬传染性肝炎、犬瘟热等,也包括非传染性发热性疾病,如中暑、热射病等。传染病也有不发热者或不发热的阶段,温热病也有不传染者,临床需鉴别。3、辨证按照四诊所收集到的症状、体征等临床资料,根据它们内在的有机联系,加以综合、分析、归纳,从而得出诊断。辩证时既要应用ハ纲辩证、脏腑辩证的基本知识作为指导,但更甫要的是必须掌握六经辩证和卫气营血辩证的具体方法。六经辩证主要用丁一“伤寒”;卫气营血辩证主要用于“温病”。临床辨证时,如果病畜属于“伤寒”,首先分清是属于三阳病,还是三阴病。三阳病多热多实,治疗重在祛邪:三阴病多寒多虚,治疗重在扶正。其次,按其各经病证的特有的证候群,深入分析,进行归经辩证,最后得出诊断,即属于那经病证。如果属于“温病”,那就依据四诊所获得的资料,首先分清热在“气”还是热在“血”。热在“气”之轻浅者叫卫分,故卫分主表、主肺及皮毛。在“气”之重者叫气分。气分指温热之邪深入于里,入于脏腑,但尚未入血。在“血”之轻浅者叫营分。营分是指邪热入于心营,入于心和心包络而言。由于心主周身之血,故营热又以血热为主证。在“血”的深重者叫血分。血分是指邪热深入到肝血,重在耗血和动血。在以上辩证的基础上,然后按其卫、气、营、血各证的特有的证候群,进ー步深入分析,进行辩证,得出最后诊断。4,论治首先确定治则和治法,其次根据病情选方用药。(四)观察结果将治疗过程中及治疗后病畜精神、ロ色、食欲等变化及其转归情况,详细填入病志。(五)分析讨论根据临诊的具体病例,分析外感热病的辨证程序,讨论六经辩证、卫气营血辩证与八纲辩证和脏腑辩证的关系。
110二、幼畜腹泻的诊治(-)目的根据幼畜的生理和病理特点,对常见的幼畜病用中兽医的方法进行诊治,熟悉诊疗技术,积累诊疗经验。(-)准备1、动物根据实际情况,选择仔猪白痢,羔羊下痢,新驹奶泻,犊牛腹泻病例。2、药物治疗幼畜腹泻的常用中药及成方制剂,如白术、乌梅、茯苓、人参、杨树花、苦参、参苓白术散、白龙散、地胡霜、乌梅散等。3、器材一般保定和诊疗器械,如保定绳,体温表,听诊器,中药调制和投药器具,针灸针,激光针灸治疗器,中兽医药志等。(三)方法和步骤1、诊断用望、闻、问、切四诊,并结合西兽医学临床常用的诊断方法,搜集病畜的症状和有关情况。尤其要注意发病情况(如发病年龄、发病季节、发病头数、死・情况等),腹泻次数,粪便的形态、颜色和气味,患畜的精神、体质以及脱水情况等。2、辩证根据诊断所搜集的资料,进行综合分析,按中兽医理论进行辩证:同时尽可能按西兽医的方法对病性进行确诊。一般说来,幼畜腹泻大体可分为虚寒证和湿热证两大类。身热,舌红或兼有黄染,脉数,粪便粘腻腥臭,或脓血相间者,多属于湿热;腹泻日久,体瘦毛焦,口鼻四肢不温,舌淡脉迟,粪便清稀者,多属虚寒证。3、论治根据辩证结果确定治疗原则,选择适当的方药进行治疗。仔猪白痢属于湿热证者,宜清热止痢,方可参考白龙散或乌梅散;属于虚寒证者,宜温中涩肠,方可选用地胡霜等。犊牛腹泻属于湿热者,宜清热止泻,方可用乌梅散或葛根茶连汤加减;属于寒湿者,宜温中利水,方用胃苓汤加减;属于伤乳者,宜消食导滞,以三仙等为主药组方。羔羊下痢属于湿热者,宜清热止痢,方可参考白龙散或乌梅散:属于虚寒者,宜温中止痢,方可用桃花汤或地胡霜加减。除中药外,针灸可选用后海、脾俞、后三里等穴,毫针、火针、艾灸、激光针等均有疗效。在论治时,还需考虑到幼畜的特点(稚阴稚阳之体,易虚易实,病情变化迅速等),恰当用药。(四)观察结果经治疗处理后,观察幼畜的精神、食欲和粪便情况,记录疾病的转归。(五)分析讨论根据诊治的具体病例,分析讨论辩证论治中的收获体会和经验教训。教师应着重提示幼畜腹泻的辩证论治的基本特点和一般原则。三、犬细小病毒病的诊治(-)目的学习掌握犬细小病毒病的常见类型、病因病理、临床症状及其常用的中兽医诊治方法。并由此举一反三,了解犬、猫等宠物的其他传染病的一般辨证论治的原则和方法。(二)准备1、动物宠物医院门诊或住院的犬细小病毒病病例。2、方药白头翁汤、四黄郁金散、加味葛根苓连汤等。3、器材常用的犬保定和诊疗器械,如保定绳、保定架,中药粉碎、调制和投药器具,中兽医病志等。(三)方法和步骤1、诊断用望、闻、问、切四诊,并结合西兽医学临床常用的诊断方法,搜集病畜的症
111状和有关情况,如发病年龄、发病季节、粪便的形态、颜色和气味,小便多少、颜色和气味,患犬的精神、体质、体温、口腔干湿情况和气味、舌色、舌苔、皮肤弹性、眼窝情况等。2、辩证根据诊断所搜集的资料,进行综合分析,按中兽医理论进行辩证;同时尽可能按西啓医的方法对病性进行确诊。犬细小病毒病是由犬细小病毒引起的ー种急性传染病,其特征是呈现出血性肠炎(血痢)和非化脓性心肌炎症状。多发于3〜6月龄幼犬,常常同窝爆发。仔犬断奶前后正气不足,脾胃虚弱,若与病犬直接接触或食入被污染的饲料,病毒便可乘虚而入,伤及脾胃,特别是小肠下段郁而化热,侵淫营血,迫血妄行,呈现出血性肠炎症状;伤及心肺,肺失宣发肃降,心肌受损,扰乱心神,呈现心肌炎症状。出血性肠炎型:各种年龄的犬均可发生,但以3〜4月龄的断乳犬更为多发。患犬常突然发病,发热,体温升高至40〜4lC,也有体温始终不变者。神倦喜卧,频频呕吐,不食。不久发生腹泻,里急后重,粪便先呈黄色或灰黄色,被覆有多量黏液及伪膜,而后粪便呈番茄汁样,带有血液,甚至频频血便腥臭难闻。小便短黄,眼窝凹陷,皮肤弹性明显下降。口干,发出臭味,舌色鲜红或绛,舌苔黄膩,脉数或细数。心肌炎型:多见于4〜6周龄的幼犬,多因表现临床症状时已来不及救治而导致死亡。3、论治根据辩证结果确定治疗原则,选择适当的方药进行治疗。出血性肠炎型宜清热解毒、凉血止痢。西医治疗可酌情输液强心补碱,以维护正气。中医治疗可试用下列方齐リ。方ー,白头翁汤:白头翁、秦皮各20g,黄连、黄柏各10g。煎汤去渣,浓缩至100ml,候温灌服。里急后重者,加木香、槟榔:夹滞者,加枳实、山植。方二,四黄郁金散:黄连、黄苓、黄柏、大黄、梔子、郁金、白头翁、地榆、猪苓、泽泻、白芍各30g,诃子20g。水煎,分2次灌服。呕吐者加半夏、生姜;里热炽盛者加金银花、连翘:热盛伤阴者加玄参、生地、石斛:下痢脓血较重者重用地榆、白头翁;气血双亏者减黄苔、黄柏、梔子、大黄,加党参、黄黄、白术等。方三,加味葛根苓连汤:葛根40g,黄苓、白头翁各20g,山药、甘草各10g,地榆、黄连各15g。水煎服,每天1齐リ,分3〜4次,每次5〇〜100ml。幼犬药量酌减。便血重者加侧柏炭15g;津伤重者加生地、麦冬各20g;里急后重者加木香10g;呕吐剧烈者加竹茹15go(四)观察结果经治疗处理后,观察犬的精神、食欲,大、小便情况等,记录疾病的转归。(五)分析讨论根据诊治,分析讨论辩证论治中的收获体会和经验教训。教师应着里提示辩证论治的基本特点、中西结合护理与预防方法和原则,及犬、猫等宠物的其他传染病的一般辨证论治的原则和方法。四、牛宿草不转的诊治(一)目的通过实习,掌握牛宿草不转的辨证论治方法,并由此举ー反三,了解复胃动物前胃疾病的一般辨证论治的原则和方法。(二)准备1、动物兽医院门诊、住院或生产厂(场)的牛宿草不转病例。2、药物枳壳、草果仁、木香、槟榔等治疗宿草不转的常用药物。3、器材常用牛的保定和诊疗器械,如鼻钳子、保定绳,中药粉碎、调制和投药器具,针灸器具,中啓医病志等。(三)方法和步骤1、诊查运用中兽医的四诊对患牛进行全面系统的检查,尤其要注意与前胃有关的病情和体征。如问诊,要注意采食、饮水和反刍情况,发病情况和治疗经过等;望诊要注意精
112神、体质、肚腹情况,晟镜和口色,排便情况等;闻诊,主要听气息的强弱,用听诊器检查瘤胃蠕动情况等;切诊,除切脉外,还应摸角温和触按肚族的虚实。并作详细病志记录。2、辨证根据诊查历获得的有关资料进行分析,对疾病的标本虚实作出判断。一般说来,宿草不转,胃中停食,多为实证。但胃实和脾虚往往互为因果,互相继发或并发。故本病除实证外,有时也可表现为本虚标实证。从西曽医学的观点来看,急性瘤胃积食多为实证;慢性瘤胃积食或兼有前胃弛缓者,多为本虚标实证。3、论治根据辨证结果确立治疗原则,选择适当的方剂进行治疗。属于实证者,治宜消食导滞,方用和胃消食汤或猪膏散加减;属于本虚标实证者,于攻逐消导之中适当辅以补益,或采用攻补兼施之法。针灸治疗常选用顺气、知甘等穴。如肚胀严重,还可于欣俞穴放气。(四)观察结果经治疗处理后,观察患牛的反刍、饮食欲以及瘤胃蠕动等情况,以判断疾病的转归。(五)分析讨论根据所诊治的具体病例,分析讨论辨证论治中的收获体会和经验教训。教师应借此举ー反三,扼要提示复胃动物前胃疾病辨证论治的一般原则和方法。五、咳嗽的诊治(一)目的通过实习,掌握家畜(禽)常见咳嗽的辨证论治方法。(二)准备1、动物兽医院门诊、住院或生产厂(场)的咳嗽病例。2、药物杏仁、贝母、百部、桔梗、瓜萎等治疗咳嗽的常用中药。3、器材常用的动物保定和诊疗器械,如鼻捻子、保定绳,中药粉碎、调制和投药器具、针灸器具,中兽医病志等。(三)方法和步骤1、诊查运用四诊对患畜(禽)进行全面系统的检査,尤其要注意与咳嗽有关的病情和体征。如问诊,要注意发病时间,咳嗽与昼夜气温变化的关系等;望诊,除一般精神状态外,要特别注意观察咳嗽的状态、呼吸和鼻漏情况等;闻诊,应注意咳嗽声音的强弱和高低,呼吸声音(并可借助听诊器听气管、支气管和肺部的声音),有鼻涕时还应注意其气味是否异常;切诊,除切脉外,还应注意槽口是否肿胀、喉头是否敏感等情况。2、辨证将诊查所获资料进行综合分析,对疾病的寒热虚实表里和所在脏腑作出判断。外感咳嗽初起,兼有表证者,称为风寒咳嗽或风热咳嗽;进ー步发展,表证消失,呈现里热者,称为肺热咳嗽。内伤咳嗽多由劳役过度或热病耗伤肺阴所致,主要包括肺气虚和肺阴虚两种。虚咳日久,还可伤及肾。一般说来,外感咳嗽多实,内伤咳嗽多虚;实证者,发病急,病程短,咳嗽声大而有力;虚证者,发病缓慢,病程长,咳嗽声低而无カ。3、论治根据辩证结果确立治疗原则,选择适当方剂进行治疗。风寒咳嗽者,宜宣肺散寒,化痰止咳,方用三拗汤、荆防败毒散等;风热咳嗽者,宜辛凉解表,止咳化痰,方用银翘散加减;肺热咳嗽者,宜清热润肺,止咳化痰,方用麻杏甘石汤、清肺散等;肺气虚咳嗽者,宜补益肺气,敛肺止咳,方用理肺散等;肺阴虚者,宜滋阴润肺,方用沙参麦门冬汤、百合固金汤等。病久伤肾者,还应酌情应用固肾培本方面的药物。针灸治疗可选用大椎、肺俞、苏气等穴;属于实热者,也可选用颈脉、尾尖、耳尖等穴。(四)观察结果经治疗处理后,观察患畜(禽)的咳嗽及全身情况,判断疾病的转归。(五)分析讨论
113对所诊治的病例进行讨论,分析辨证论治的原则和方法,总结经验和教训。教师应提示辩证论治的基本特点及中西结合护理与防治方法和原则。六、猫绦虫病的诊治(一)目的通过学习,了解猫绦虫的常见类型,危害性及常用中兽医诊治方法。并由此举ー反三,了解猫、犬等宠物的其他虫证的一般诊治的原则和方法。(二)准备1、动物宠物医院门诊或住院的猫绦虫病病例。2、方药槟榔粉剂、刺桐树皮、槟榔等。3、器材常用的猫保定和诊疗器械,中药粉碎、调制和投药器,中兽医病志等。(三)方法和步骤1,诊断本病常呈慢性经过,轻度感染时不表现症状。严惩感染时,出现呕吐,慢性肠卡他,贪食、异嗜,渐进性消瘦,营养不良,精神不振,有的发生痉挛或四肢麻痹。病猫肛门口及粪便中常有片节或粪便如见绦虫卵可确诊。猫绦虫种类很多,主要有:①犬腹孔绦虫,寄生于犬、猫的小肠内。体节外观呈黄瓜粉状,又称瓜实绦虫。②泡状带绦虫,又称边缘绦虫,寄生于犬猫的小肠内。虫体头节呈梨形或肾形,节片宽而短。泡状带绦虫以猪、牛、羊、鹿为中间宿主,其幼虫为细颈囊尾蜘。③曼氏达宫绦虫,寄生于猫犬小肠中内。虫头节呈指形,节片宽大于长度。第一中间宿主为淡水楼虫,第二中间宿主为蛙类和蛇类(鱼类、鸟类甚至人可作转运宿主),猫、犬为终末宿主。④阔节裂头绦虫,寄生于猫、犬的小肠中。其形态与曼氏达宫绦虫大致相同,但虫体较大,长约10mm,由数千个节片组成。第一中间宿主为剑水蚤,第二中间宿主为鱼。2、论治根据诊断结果确定治疗原则,选择适当的方药进行治疗,一般驱虫和扶正兼顾。可试用下列方剂。槟榔粉剂:将槟榔捣碎研末,筛后去渣,以水调匀使其浓度为0.lg/ml,按每只20〜25ml给服。槟榔煎汁:取槟榔50g,捣碎加水1000ml煎煮,浓缩至200ml,过滤,取滤液,按每只20〜30ml,直肠给药,可迅速发挥药效而驱虫,安全可靠,简便易行。但要注意每只用量不能超过40ml,否则引起中毒,如中毒可用硫酸阿托品解救。槟榔3g,石榴皮1g,加水250ml,煎至20ml,分2次服。刺桐树皮5g,槟榔1g,加水300ml,煎至20ml,内服。(四)观察结果经治疗处理后,观察猫的精神、食欲,粪便中肛门口及粪便中常有片节或粪便如见绦虫卵情况等,记录疾病的转归。(五)分析讨论根据诊治,分析讨论诊断治疗中的收获体会和经验教训。教师应着重提示中西结合防治方法和原则及猫、犬等宠物的其他虫证的一般诊治的原则和方法。七、疮黄疔毒的诊治(一)目的辨认疮黄疔毒的不同症状,掌握疮黄疔毒的不同疗法。(二)准备1、动物在兽医院门诊、住院或生产厂(场)选择4种不同病畜。
1142、药物准备清热解毒,活血消肿、排脓生肌类药物,外用消毒药液。3、器材镒子,探针,外科刀,酒精棉,纱布等。(三)方法和步骤1、诊断了解发病原因,历病时间,有无传染,观察肿胀或破溃的形状,是漫肿平塌还是肿起高大,有无分泌物,分泌物的性状。继之触诊肿胀的温度、硬度、疼痛性,有无波动性,必要时可进行穿刺,借以观察内容物的性状。对已破溃的痈肿疗毒须检测其深度及广度,脓汁的性状。2、辩证根据四诊所得资料进行分析、归纳。一般肿、热、痛属阳,肿而无热无痛属阴,肿而高大属阳,漫肿平塌属阴。肿毒脓成易溃,溃后易收口者属阳,肿毒不易化脓,脓成不易溃,溃后不易收口者属阴。对黄证要分辨是否为恶黄,后者肿胀迅速,呈弥漫性,疼痛明显,-一般预后多属不良。3,论治(1)内治疮之初起多为痈肿,治宜清热解毒、活血去瘀,方用真大活命饮,疮疡久不成脓或脓成不溃者,宜补气养血、托毒排脓,方用透脓散。后期可补气养血,方用八珍汤。黄肿宜消黄解毒活血散瘀,方用消黄散加减。疔可参照疮的治法。阳毒宜清热解毒,软坚散结,方用昆海汤,阴毒宜解毒消肿,软坚散结,方用土茯苓散或阳和汤加减。(2)外治痈肿及黄肿初起可外敷金黄散、雄黄散或梔子大黄散。痈肿已成脓宜及时切开排脓冲洗创腔,填入外用药。痈肿已溃,局部坚硬肿胀、肉色暗红者,宜用五五丹。疮疡溃烂、创ロ不敛者,宜用防腐生肌散。疮疡久溃,创口不收者,宜用九一丹。(四)观察结果认清疮黄疔毒的不同症状,根据辨证论治结果观察对疮黄疔毒的实际治疗效果。(五)分析讨论1、区分痈疽、疮疡、黄肿、疔毒。2、对疮黄、疔毒如何辨证论治。ハ、禽霍乱的诊治(-)目的学习掌握禽霍乱的病因病理、临床症状及其常用的中兽医诊治方法。并由此举一反三,了解禽类的其他传染病的一般辨证论治的原则和方法。(二)准备1、动物病院门诊上或生产厂(场)患霍乱病例。2、药物清热解毒类中药。3、器材中药粉碎、调制和投药器具,中兽医病志等。(三)方法和步骤1、诊析禽霍乱是由多杀性巴氏杆菌引起的急性传染病,又名出血性败血病,简称出败。急性流行时,病鸡突然死亡,发病率和死亡率很高。12周龄以上的禽最易感染。本病主要通过消化道、呼吸道和皮肤创伤感染。感染后病原菌通过黏膜或皮肤创伤侵入组织器官中进行繁殖,然后进入血液,引起败血死亡。慢性病例病原菌侵入血液不引起败1価症而局限于肉冠、肉髯、耳周和眼睑等部位的组织内,使组织坏死。最急性型发病急聚,晚间能进食,翌晨死亡,无临床症状,剖检无明显病理变化。急性型口流黏液,呼吸急促、发热ロ渴,腹泻剧烈,排绿色、灰白色以至红色稀粪,肉髯青紫肿胀,翅尾下垂,两肢瘫痪;剖检心包积液,心外膜有出血点,肝肿大,表面有灰白色小坏死点。慢性型呈持续腹泻,贫血消瘦,关节肿大,行走痛拐,冠、髯苍白,水种变硬,有的呼吸困难,流鼻液,鼻窦肿大,喉部积蓄有分泌物,剖检关节肿大化脓。2、治疗宜清热解毒。
115方ー,白头翁60份,连翘20份,黄连、黄柏、金银花各40份,野菊花、板蓝根、白帆、蒲公英各80份,雄黄4份。共为细末(雄黄先研极细末),充分混匀,日粮中添加4%,或每天按2g/kg体重拌料喂给。方二,生地150g,茵陈、半枝莲、大青叶各100g,白花蛇舌草200g,董香、当归、车前子、赤芍、甘草各50g„此方为100只鸡3天用量,水煎取汁,分3~6次饮服或拌入饲料,病重不食者灌入少量药汁(方见《鸡病中药防治》)。(四)观察结果将治疗经过及结果记录于病志中。(五)分析讨论根据所诊治的具体病例,分析讨论诊治中的收获体会和经验教训。教师应借此一反三,扼要提示禽类其他传染病的一般辨证论治的原则及中西结合防治方法。九、掏结术(一)目的通过本实习初步掌握掏结术的基本要领和方法。(二)准备1、动物健康马属动物和结症病畜。2、器材长绳1条,短绳2条,脸盆1个,灌肠器,肥皂等。3、药物石蜡油,1〇〜25%硫酸镁1000ml。(三)方法步骤1、病畜保定根据结粪的位置不同患畜保定的方法、姿势也不ー样。站立保定同直肠检查时的保定方法。卧倒保定时,应先将患畜用倒畜法放倒,再用绳把四肢系部攒绑在一起,其姿势应依据掏结术的要求,有些侧卧,有些仰卧,但以仰卧保定为主。因为仰卧可以使脏腑集中,手触摸的范围相对的较广。2、检查前的准备术者应剪短指甲并磨光。手臂涂以润滑剂如肥皂或石蜡油使手臂滑润便于入手。掏结时,术者应根据病畜保定的姿势调整自己的体位使其便于掏结。3、破结的方法按压法:主要用于中结。将结粪牵引至左腹壁或骨盆腔前口,抵于耻骨前缘,或牵引至骨盆腔内,抵于骨盆腔的某部,拇指屈于掌内,其余四指并拢,用食指及中指或四指的指腹由粪块的中央向两端逐点按压,以点连线,压成纵沟,待前部气体或液体通过,再进ー步压扁或压碎。握压法:主要用于前结与中结。术者拇指弯向掌心,其余四指并拢握住结粪,以拇指为支点,另外四指反复作握捏动作,把结粪分段握扁,并使之破碎。切压法:主要用于板肠结。术者拇指屈于掌心,其余四指并拢,用手掌下缘顺序把结粪切压成沟,叫做纵切法,或将四指并拢,弯曲成90度,用掌的下缘将结粪切断,叫横切法。顶压法:术者拇指屈于掌心,其余四指并拢,在结粪的后方用指腹进行顶压,使结粪疏松或顶压一条纵沟使气体通过即可。宜取法:仅用于后结。若属直肠壶腹部便秘,可先用手指将积粪同粘膜剥开,再以拇指、食指及中指捏住结粪,ー块ー块地取出;若属直肠狭窄部便秘,可先用食指由结粪的中央挖开,然后再将紧贴肠壁的炎块向中央拨动,并一点一点地衔出,称为“燕子衔泥法”。在直取结粪过程中,如发现直肠狭窄部水肿,可用10〜25%硫酸镁溶液反复灌肠。捶结法:这是掏结术的进ー步发展。它适用于中结。其方法是,将结粪固定到邻近的软腹壁处,固定方法依结粪的形状、大小而异;结粪呈球状、坚硬、拳大至小儿头大的,可将拇指屈于掌内,四指固定其边缘,拇指屈曲顶住结粪中央固定之:结粪大而太硬的,可用四指伸直的掌面抵住结粪一端固定之,固定之后,另一手在体外用拳头对准结粪捶击。若术者不方便时,可由助手按术
116者指示点用拳或木槌捶之。一般一至三下即可将结粪捶碎。捶结时应先轻后繭,稳准猛打。术者手抵住结粪时必须妥善固定,以防结粪滑脱,造成肠道破损。结粪被打碎后,即可感到气体通过,患畜腹痛很快停止。4、掏结时注意事项(1)患畜宜肠干燥者,应先灌肠后掏结。(2)当手伸到直肠壶腹部时要谨慎通过狭窄部。若病畜努责时,术者应根据努退、缓进的原则慢慢前进,防止穿破肠壁。(3)若病畜躁动不安时,可先给镇静药而后掏结,在掏结过程中注意术者的安全。(四)观察结果将治疗经过及结果记录于病志中。(五)分析讨论根据所诊治的具体病例,分析讨论诊治中的收获体会和经验教训。十、阴道脱及子宫脱的诊治(-)目的认识阴道脱及子宫脱的症状,掌握其治疗方法,为以后独立进行诊疗工作打下基础。(二)准备1、动物病院门诊上患有阴道脱及子宫脱的病畜。2、药物炙黄黄、党参、当归、升麻、柴胡等治疗阴道脱和子宫脱的常用中药及3%明帆液,0.1%高钛酸钾溶液,碘酊,磺胺软膏等。3、器材大块白布,纱布,火炉,三棱针,丝线,新砖,排球胆等。(三)方法和步骤1、诊断望诊包括病畜精神,脱出子宫或阴道的大小、形状、颜色,是否有水肿、创伤、出血及坏死,ロ色,舌苔等。闻诊主要闻阴道排出物的气味等。问诊应注意分娩的时间及经过(如是否难产,产后努责的强弱,胎衣排出与否等),发病时间,发病前后母畜的全身情况及饲养管理情况,有无本病的即往史,发病后是否经过治疗及治疗方法如何等。切诊为切病畜脉象。2、治疗(1)手术整复阴道脱:先将患畜保定于前低后高的柱栏内。不能站立的患畜,应将后躯垫高。对羊,可将其后肢提起。对猪,则可使其卧于斜置的木板上,使成前低后高姿势。用防风汤(防风、荆芥、艾叶、川椒、蛇床子、白帆、五倍子各9g)煎汤温洗脱出的阴道,或用3%明研温开水冲洗。如已水肿,即用三棱针点刺水肿部,后用防风汤温水冲洗,如有腐烂,即用手术剪剪掉。清洗净后,趁患畜不努责时,把脱出的部分慢慢顺序送入阴户。当患畜努责,术者勿强行推送,待努责过后再推送,直至把脱出的部分完全送入,用手把阴道展平,使其完全复位为止。继用新砖ー块烧热垫布慰之。如患畜不断努责,为防止阴道再次脱出时,可用排球胆(洗净,再用〇」%高镒酸钾溶液消毒)一个,置于阴道内,吹气适量,把口扎紧,同时用纱布制成的兜布(厚约6〜8层,大小适当,四角系绳)兜在阴道外部并固定起来,过1〜2天患畜不再努责时即可取出排球胆,同时取下兜布。子宫脱:保定及清洗同阴道脱,如胎衣尚未脱落应将其剥离。由二助手用消毒好的大块白布将子宫托起至外阴水平,术者从脱出的子宫末端或近阴门处开始整复。如从脱出的子宫末端开始整复,先用拳头顶住子宫末端凹陷部,趁母畜不努责时前推,推回一个子宫角后,再推另ー个子宫角。在推送过程中,助手应从两侧加以压迫帮助,并将已推入阴口的部分压住,以防再度脱出。当整个子宫被推回骨盆腔后,术者可将手臂尽可能深地伸入子宫内,将ニ子宫角推至原来的位置。继用新砖热熨或将排球胆嵌塞阴道(见阴道脱),亦可用纱布棒嵌塞(用纱布2m折度卷成约40〜50cm长的棒,两端用棉质扎好,0.1%高镒酸钾溶液浸湿
117消毒,外涂ー层磺胺软膏),将棒的一端徐徐经阴道塞入子宫内,另一端系ー长丝线,绑在病畜的尾根,过1〜2天患畜不再努责时即可取下。(2)内服中药补中益气汤加减。(四)观察结果将治疗经过及结果详细记录于病志中。(五)分析讨论本实验中所采用的整复术有何优缺点,应如何改进。十ー、鱼烂鲤病的诊治(-)目的通过本实习初步掌握鱼烂鳏病诊治的基本要领和方法。并由此举ー反三,了解水产动物的其他传染病的一般辨证论治的原则和方法。(二)准备1、动物生产厂(场)的鱼烂鲤病病例。2、药物五倍子、大黄等中药。3、器材中药粉碎、调制和投药器具,中兽医病志等。(三)方法和步骤1、诊断鱼烂鱷病主要危害草鱼,造成大批死亡。水温在20セ以上开始流行,25〜35.C是流行盛期,流行季节为5〜9月。常与出血病、赤皮病并发。病原为柱状屈挠杆菌。带菌鱼是最主要传染源。木病的流行与被污染的水及塘泥、水温、水质有关,可直接接触感染,鲤受损作后更易感染。水温越高,越易暴发流行;水中病原越多,鱼的密度越大,水质越差,也越易暴发流行。病鱼头发黑,俗称“乌头瘟”。游动缓慢,呼吸困难,食欲减退或不食,消瘦,病重者离群独游水面,对外界刺激失去反应,捕捉起来可见鱷盖内发炎充血,部分常糜烂成透明小窗,俗称“开天窗”,鲤上黏液增多,鲤丝肿胀,有出血点,严重时鲤小片坏死脱落,鲤丝软骨外露,鳍的边缘色泽变淡,呈“镶边”状。2、治疗方一,漂白粉,1m」水用药1g,全池泼洒。方二,五倍子,lm3水用药3g,煎汁,全池泼洒。方三,大黄,Inf水用药2.5〜3g,全池泼洒;或1m3水用大黄1kg,0.3/氨水20kg,在缸内浸泡12h,药液呈红棕色,连同药渣、药液ー起,全池泼洒。(四)观察结果将治疗过程中及治疗后鱼群的变化及其转归情况,详细填入病志。(五)分析讨论根据临诊的具体病例,分析诊疗程序与方法。教师应着重提示中西结合预防方法和原则及其他水产动物传染病的一般辨证论治的原则和方法。
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