实验教学片策划罗明模板

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资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验一、培养基的制备操作教师罗明联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:掌握培养基的制备方法;掌握培养基按物理状态及化学成分的分类方法;掌握培养基各成分的作用。实验内容:培养基制备流程、分装、包扎学习配制牛肉膏蛋白胨培养基,高氏一号培养基,马丁氏一孟加拉红培养基实验器材:电子天平、角勺、1000mL量筒、电磁炉、小铝锅、玻棒、刻度搪瓷缸、小烧杯、三角瓶、试管、棉塞、pH试纸、铁架台、漏斗、纱布、线绳、牛皮纸。实验操作要点及注意事项:培养基的配制流程:原料称量、加热溶解→定容→调节pH值→过滤澄清→分装→塞棉塞和包扎→高压蒸汽灭菌。注意事项:(1)制备或盛置培养基的用具,不宜用铁锅或铜锅。(2)溶解时一直搅拌,防止烧糊或结块。(3)趁热过滤、分装。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):1.原料称量、溶解:根据培养基配方,准确称取各种原料成分,在容器(常见铝锅或不锈钢锅)中加所需水量的一半,然后依次将各种原料加入水中,用玻棒搅拌使之溶解。加热使其充分熔解,在加热过程中应注意不断搅拌。2.定容:立即将培养基倒入刻度搪瓷缸,并补足需要的全部水分。3.调节pH:培养基配好后,一般要调节至所需的pH。常见低浓度盐酸及氢氧化钠溶液进行调节。用玻棒沾一滴培养基,点在精密pH试纸上进行比色,如pH偏酸,则滴加1%氢氧化钠溶液,偏碱则滴加1%盐酸溶液。经重复几次调节后可基本调至所需pH。4.过滤和澄清:用3-4层纱布(医用敷料纱布)或1-2层粗平纹白布兜起来,置于铁三脚架的漏斗上直接倾倒过滤,除去沉渣、颗粒,使之澄清透明。5.分装:使用一个大漏斗(小容量分装),吊在漏斗架上,下口连接一段软橡皮管,橡皮管下面再连一小段末端开口处略细的玻璃管,在橡皮管上夹一个弹簧夹。分装时,将玻璃管插入试管内,不要触及管壁,捏开弹簧夹,注入定量培养基后,先止住液体,再抽出试管。6.塞棉塞和包扎:培养基分装到各种规格的容器(如试管、三角瓶、克氏瓶等)后,应按管口或瓶口的不同大小分别塞以大小适度、松紧适合的棉塞。塞棉塞后,管装培养基可若干支扎成一捆,或排放在铁丝筐内;并用牛皮纸或废报纸将管口、瓶口或试管筐包起来,再用橡皮圈或线绳扎紧。7.灭菌:用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。实验应达到的基本要求:积极参与,亲自动手,掌握实验原理及目的,独立完成实验,并能指出其它同学操作错误,能总结经验、汲取教训。

1资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验二、灭菌法操作教师顾爱星联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.掌握灭菌的概念及原理;2.动手操作并掌握高压蒸汽灭菌法和紫外线灭菌法。实验内容:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、过滤除菌、紫外线灭菌实验器材:手提式高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、75%酒精棉球实验操作要点及注意事项:操作要点:高压蒸汽灭菌法:加水→待灭菌物品装锅→加热排气→升压→保温保压(0.lMpa,121°C,30min)→降压→出锅。注意事项:(1)蒸汽灭菌器内冷空气完全排除;(2)干热灭菌时:玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等耐高温的物品都可用此法灭菌,可是,培养基、橡胶制品、塑料制品等不能使用干热灭菌;(3)紫外线损伤眼角膜及视神经,刺激皮肤,因此应避免在直接紫外灯下工作。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):手提式高压蒸汽灭菌锅使用步骤:⑤加水:使用前在锅内加入适量的水,加水不可过少,以防将灭菌锅烧干,引起炸裂事故。②装锅。将灭菌物品放在灭菌桶中,不要装得过满,旋紧锅盖,关闭排气阀。③调节时间及温度。将时间旋钮调至30min,温度旋钮调至121℃,打开电源开关,灭菌锅开始自动加热。④加热排气。加热一段时间后待锅内沸腾,并有大量蒸汽自排气阀自动排除,维持2~3min以排除冷空气。为保证锅内空气充分排除,需再人工排气一次,即当压力到达0.05Mpa时关闭电源,缓慢打开排气阀,锅内气体排尽后关闭排气阀,再次打开电源,继续加热。⑤保温保压。当压力升至0.1Mpa时,温度达l2l℃,此时锅体自动控制热源,保持压力,维持30min后,自动切断热源。⑥出锅。当压力表降至”0”处,稍停,使温度继续降至100℃以下后,打开排气阀,排尽锅内气体,旋开锅盖,取出灭菌物,盖好锅盖。超净工作台使用步骤:①用75%酒精棉球擦拭超净工作台面,然后将待灭菌物品放置于超净工作台面上。②接通电源,打开紫外灯,打开鼓风开关,盖上遮阳布。③照射30min后,关掉紫外灯,打开日光灯。④操作完毕后,关掉鼓风开关和电源。实验应达到的基本要求:严格按照灭菌规范操作。使用高压蒸汽灭菌锅时,保证不离开实验室,经常观察锅盖指示表。保证灭菌质量。

2资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验三、无菌操作及接种技术操作教师韩剑联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.掌握培养基熔化技术。2.掌握倒平板和倒斜面技术。3.掌握平板接种技术。实验内容:倒平板、斜面及平板接种实验器材:琼脂培养基、微波炉、酒精灯、无菌培养皿、无菌试管、试管无菌水、无菌吸管、无菌玻璃刮铲、恒温培养箱、试管架、漏斗。实验操作要点及注意事项:操作要点:熔化琼脂培养基→冷至55℃左右→拔下瓶塞,瓶口经过火焰2~3次→启开皿盖→注入培养基→合上皿盖→静置冷凝注意事项:熔化琼脂培养基至完全熔化,澄清透明,手持瓶口摇晃,观察培养基均匀无结块。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):倒平板实验步骤:1.熔化:用微波炉彻底熔化琼脂培养基。2.冷却:冷却至45℃左右(此时握住瓶底感觉温暖而不烫手)。3.倒平板:左手握瓶,在靠近火焰处用右手小拇指与无名指间拔下瓶塞,瓶塞经过火焰2~3次,左手握瓶将三角瓶置于右手手掌上,右手托住瓶底将瓶口经过火焰2~3次后稍微离开火焰,但保持在火焰上方的无菌区域内。然后左手迅速取平皿,用左手无名指和小指托住皿底,大拇指和中指夹住皿盖,在火焰上方无菌区内启开皿盖,迅速注入培养基15ml左右,立即合上皿盖并使皿底均匀铺满培养基。平皿静置于桌上,冷凝即成平板。室温下放置,使平板表面干燥无水膜。倒斜面实验步骤:1.熔化:用微波炉彻底熔化琼脂培养基。2.分装:使用一个大漏斗(小容量分装)分装试管。3.摆放斜面:趁热及时摆成斜面。斜面可在特制的斜面架上摆放。斜面的斜度要适当,使斜面的长度不超过试管长的1/2。摆放时注意不可使培养基玷污棉塞。平板接种实验步骤:1.熔化:用微波炉彻底熔化琼脂培养基。2.冷却:冷却至45℃左右。3.制备平板:平板标记10-4、10-5、10-6各3皿,倒平板。4.用无菌吸管吸取混合菌液1ml,注入9ml无菌水中,充分混匀,成10-1稀释液,继续稀释至10-6。5.涂布:吸取10-4、10-5、10-6稀释菌液,分别滴0.lml于相应标记的平板中央,用无菌玻璃刮铲在平板表面涂布均匀。6.培养:培养室温放置1~2h,待接种菌液被培养基吸收后,倒置于37℃恒温箱培养2~3d,再室温培养3d或2d,使菌落性状表现较充分。实验应达到的基本要求:彻底熔化琼脂培养基。严格规范无菌操作。

3资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验四、微生物的纯种分离技术操作教师顾爱星联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.掌握倍比稀释法、倒平板方法;2.掌握分区划线分离法、平板划线分离法。实验内容:稀释平板法、划线分离法实验器材:琼脂培养基、微波炉、酒精灯、无菌培养皿、无菌试管、试管无菌水、无菌吸管、试管架、接种环、恒温培养箱。实验操作要点及注意事项:操作要点:稀释菌液→熔化琼脂培养基→冷至55℃左右→接种菌液→倒平板→培养倒平板→接种环灭菌→划线注意事项:保持培养基温度至55℃左右;划线时轻轻从培养基表面划过,不要划破培养基。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):稀释平板法实验步骤:1.稀释菌液:用无菌吸管取混合菌液1ml,注入9ml无菌水中,充分混匀,成10-1稀释液,继续稀释至10-602.熔化:用微波炉彻底熔化琼脂培养基。3.冷却:冷至55℃左右(能够置于恒温水浴锅)。.4.接种菌液:平板标记10-4、10-5、10-6各三皿,分别吸取10-4、10-5、10-6稀释菌液,分别滴0.lml于相应标记的平板中央。5.倒平板:右手握瓶,在靠近火焰处用左手拔下瓶塞,瓶口经过火焰2~3次后稍微离开火焰,但保持在火焰上方的无菌区域内。左手将瓶塞夹在右手小指与无名指间(塞进瓶口的一端朝外)。然后左手取平皿,无名指和小指托住皿底,大拇指和中指夹住皿盖,在火焰上方无菌区内启开皿盖,迅速注入培养基15ml左右,立即合上皿盖并放于桌上轻轻旋转,使培养基和菌液皿底均匀混合并铺满皿底。平皿静置于桌上,冷凝即成平板。6.培养:倒置于37℃恒温箱培养2~3d,再室温培养3d或2d,使菌落性状表现较充分。划线分离法实验步骤:1.接种环灭菌:接种环或针头稍弯的接种针火焰灭菌并冷却。2.分区划线法:取混合菌液,在靠近平皿边缘处的平板上,用接种环前缘或针尖的弯曲部位接触平板,接种棒与平板成30º~40º角,画3~4条平行线。然后转动平皿约50º角,灼烧接种环(针),冷却后,经过前一区划2~3条平行线,并继续画2~3条不经过前一区的平行线。再转动平皿……,如此画4~5区。3.连续划线法:接种环(或针)取样品后,在平板上连续画一条连续的折线。实验应达到的基本要求:规范打开培养皿的方法。严格规范无菌操作。

4资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验五、显微镜油镜使用操作教师韩剑联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.学习普通光学显微镜的构造、原理,掌握显微镜的使用技术;2.学会使用油镜观察细菌的基本形态。实验内容:操作过程演示、显微镜维护实验器材:普通光学显微镜、玻片标本、香柏油。实验操作要点及注意事项:操作要点:用低倍镜调节光源→正确选择油镜镜头→玻片标本镜检部位加一小滴香柏油,放在载物台镜筒正下方→缓缓升高载物台,使镜头浸在油中→下降载物台,寻找物像→油镜观察→清洁油镜。注意事项:按照低倍镜调节光源→高倍镜找到观察部位→油镜观察的顺序;使油镜浸入到香柏油中;注意镜头不能压在标本上,不能用力过大,否则容易压碎玻片,损坏镜头。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):1.准备:取出显微镜、检查,用擦镜纸擦拭光学部件,将载物台下降到最低处,打开电源。2.低倍镜观察:将观察的玻片标本置载物台上,用标本夹夹住,移动推进器,使观察对象处在接物镜正下方,转动粗调螺旋,使载物台升至距标本约0.5cm处,从目镜观察。此时可适当调节光圈、聚光器,使视野亮度合适,同时一边观察,一边用粗调螺旋慢慢下降载物台,直到物像出现,之后再用细调节器调节物像清晰为止。找到典型的目标物,并将其移至视野中央,准备用高倍镜观察。3.高倍镜观察:低倍镜对准焦点后,转换高倍镜,稍微转动微调即可。找到适宜观察的部位区域,将此部位移至视野中心,准备用油镜观察。4.油镜观察:(1)用粗调螺旋将载物台下降2crn,将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。(2)从侧面观察,用粗调螺旋将载物台小心地升起,使油镜浸入到香柏油中,其镜头几乎与标本相接。(3)光圈开到最大,聚光镜上升到最高处,调节光源,使视野明亮均匀。(4)从目镜观察,同时用粗调螺旋使载物台缓缓下降,直至视野出现物像为止,然后用细调节器校正焦距,获得清晰物像。如果油镜已经离开油面而仍未见物像,必须再重复(3)、(4)操作至物像看清为止。5.油镜清洁:油镜使用完毕后,将载物台下降,取下标本片,先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油,再用擦镜纸蘸少许乙醇乙醚擦镜液擦去镜头上残留油迹,最后用擦镜纸擦去残留的擦镜液。实验应达到的基本要求:熟练使用显微镜(油镜),迅速找到目标物像,操作规范,视野、光线清晰。

5资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验六、细菌的染色技术操作教师韩剑联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.学习微生物制片、染色的基本技术;2.掌握细菌简单染色、革兰氏染色及无菌操作技术;3.进一步观察细菌的基本形态。实验内容:1.简单染色、革兰氏染色操作演示;2.革兰氏染色法鉴定所分离菌株的革兰氏染色结果。实验器材:载玻片、酒精灯、接种环、蒸馏水、石碳酸复红、结晶紫、卢戈氏碘液、95%酒精、番红、吸水纸、洗瓶、染液缸、普通光学显微镜、香柏油。实验操作要点及注意事项:操作要点:简单染色法:涂片→干燥→固定→染色〈石炭酸复红,lmin)→水洗→干燥→镜检。革兰氏染色法z涂片→干燥→固定→初染(结晶紫,lmin)→水洗→媒染(碘液媒染,lmin)→95%酒精脱色(28-30s)→水洗→复染(番红,1min)水洗→干燥→镜检。注意事项:1.脱色时间。2.染色过程中勿使染色液干涸,用水冲洗后应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释影响染色效果。3.选用培养18-24h菌龄的细菌为宜。

6资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):细菌简单染色实验步骤:1.取一张载玻片,并用纱布擦拭干净。2.涂片:在洁净的载玻片中央滴加一小滴无菌蒸馏水(黄豆粒大小),用酒精灯外焰对接中环进行灼烧灭菌,垂直烧两次、平行烧两次,在酒精灯火焰旁用火焰灭菌的接种环挑取少量菌体,挑取时先用试管内壁对接种环进行摩擦冷却,挑取菌体与水滴充分混合,涂成薄膜,涂布面积约1-1.5cm。3.干燥:制成的涂片可放在空气中自然干燥,为节省时间,也可将玻片置于火焰上方略加温加速干燥(温度不宜过高)4.固定:手执涂片一端(涂菌面朝上),在酒精灯外焰上经过三次,涂片微烫,冷却。5.染色:将涂片置于水平位置,滴加适量石炭酸复红染色液于菌膜部位(以盖满菌膜为度),染色1min。6.水洗:倾去染色液,斜置载玻片,用洗瓶的自来水自玻片一端轻轻冲洗,不要直接冲洗涂菌面,至流下的水中无染色液的颜色为止。7.干燥:自然干燥或用吸水纸轻轻盖在涂片部位以吸去水分(注意勿擦去菌体)。8.镜检:用油镜观察并绘出细菌形态图(依次从低倍镜→高倍镜→油镜)。细菌的革兰氏染色实验步骤:1.取一张载玻片,并用纱布擦拭干净,并用记号笔在在载玻片一端做好标记。2．涂片:分别滴加一小滴蒸馏水在洁净的载玻片上左、右方,用酒精灯外焰对接中环进行灼烧灭菌,垂直烧两次、平行烧两次,用火焰灭菌的接种环在酒精灯火焰旁取少量大肠杆菌涂于左方水滴中,将接种环再次火焰灭菌,同样取少量枯草杆菌涂于右方水滴中,混匀后涂成薄薄的菌膜。3.干燥:制成的涂片可放在空气中自然干燥,为节省时间,也可将玻片置于火焰上方略加温加速干燥(温度不宜过高)4.固定:手执涂片一端(涂菌面朝上),在酒精灯外焰上经过三次,涂片微烫,冷却。5.初染:涂片置于玻架上,滴加适量结晶紫染色液于菌膜部位(以盖满菌膜为度),染色1min。用洗瓶的自来水小心冲洗并沥干。6.媒染:滴加适量碘液盖满涂菌面,染色1min。用洗瓶的自来水小心冲洗并沥干。7.脱色:滴加95%乙醇,冲洗脱色20~30s,流下的冲洗液无色为宜,立即水洗终止脱色。8.复染:滴加番红染色液盖满涂菌面,染色1min,水洗。晾干或用吸水纸吸干。9.镜检:先低倍镜后高倍镜,油镜观察,判断大肠杆菌和枯草杆菌的革兰氏染色反应结果。实验应达到的基本要求:染色步骤顺序准确,时间精确,操作熟练,结果正确。

7资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。实验名称实验七、微生物菌落特征识别操作教师顾爱星联系方式预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:掌握细菌、放线菌、真菌菌落特征;学习识别、判断菌落类群的方法。实验内容:细菌、放线菌、真菌菌落特征要点及识别实验器材:接种环、直尺。实验操作要点及注意事项:操作要点:肉眼观察菌落形状、表面、隆起、透明度、边缘、颜色→用直尺测量菌落大小→用接种环测量菌落结合强度注意事项:掌握描述菌落形状、大小、表面、隆起、透明度、边缘、颜色、结合强度的词以后,再测量记录实验步骤(要具体,第一步,第二步……):1.说明:对照菌落特征的描述图文,说明描述词的意义。2.观察:肉眼观察并记录菌落形状、表面、隆起、透明度、边缘、颜色。3.测量直径:用直尺测量菌落大小(直径)。4.测量结合强度:用接种环轻轻挑菌落与培养基表面结合处,测量记录菌落结合强度。5.比较细菌、放线菌、真菌菌落特征。实验应达到的基本要求:掌握细菌、放线菌、真菌菌落特征;能初步判断菌落类群。