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时间:2019-10-16
《【精品】实验教学片策划(罗明》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实验名称实验一、培养基的制备操作教师罗明联系方式13669995610预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:掌握培养基的制备方法;掌握培养基按物理状态及化学成分的分类方法;掌握培养基各成分的作用。实验内容:培养基制备流程、分装、包扎学习配制牛肉膏蛋白腺培养基,高氏一号培养基,马丁氏一孟加拉红培养基实验器材:电子天平、角勺、lOOOmL量筒、电磁炉、小铝锅、玻棒、刻度擔瓷缸、小烧杯、三角瓶、试管、棉寒、pH试纸、铁架台、漏斗、纱布、线绳、牛皮纸。实验操作要点及注意事项:培养基的配制流程:原料称量、加
2、热溶解一定容一调节PH值一过滤澄清一分装一塞棉塞和包扎->高压蒸汽灭菌。注意事项:(1)制备或盛置培养基的用具,不宜用铁锅或铜锅。(2)溶解时一直搅拌,防止烧糊或结块。(3)趁热过滤、分装。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):1.原料称量、溶解:根据培养基配方,准确称取各种原料成分,在容器(常用铝锅或不锈钢锅)中加所需水量的一半,然后依次将各种原料加入水中,川玻棒搅拌使之溶解。加热使其充分熔解,在加热过程中应注意不断搅拌。2.定容:立即将培养基倒入刻度撕瓷缸,并补足需要的全部水分。3.调节pH:
3、培养基配好后,一般要调节至所需的pH。常用低浓度盐酸及氢氧化钠溶液进行调节。用玻棒沾一滴培养基,点在精密pH试纸上进行比色,如pH偏酸,则滴加1%氢氧化钠溶液,偏碱则滴加1%盐酸溶液。经反复几次调节后可基木调至所需pH。4.过滤和澄清:用3・4层纱布(医用敷料纱们或层粗平纹白布兜起来,置于铁三脚架的漏斗上直接倾倒过滤,除去沉渣、颗粒,使之澄清透明。5.分装:使用一个大漏斗(小容量分装),吊在漏斗架上,下口连接一段软橡皮管,橡皮笛下面再连一小段末端开口处略细的玻璃管,在橡皮管上夹一个弹簧夹。分装时,将
4、玻璃管插入试管内,不要触及管壁,捏开弹簧夹,注入定量培养基后,先止住液体,再抽出试管。6.塞棉塞和包扎:培养基分装到各种规格的容器(如试管、三角瓶、克氏瓶等)后,应按管口或瓶口的不同大小分别塞以大小适度、松紧适合的棉塞。塞棉塞后,管装培养基可若干支扎成一捆,或排放在铁丝篦内;并用牛皮纸或废报纸将管口、瓶口或试管筐包起来,再用橡皮圈或线绳扎紧。7.灭菌:用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。实验应达到的基本要求:积极参与,亲B动于,学握实验原理及目的,独立完成实验,并能指岀其他同学操作错误,能总结经验、汲取教训。
5、实验名称实验二、灭菌法操作教师顾爱星联系方式13669995610预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.掌握灭菌的概念及原理;2.动手操作并掌握高压蒸汽灭菌法和紫外线灭菌法。实验内容:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、过滤除菌、紫外线灭菌实验器材:手提式高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、75%酒精棉球实验操作要点及注意事项:操作要点:高压蒸汽灭菌法:加水-待灭菌物品装锅―加热排气一>升压一保温保压(O.IMpa,121°C,30min)—降压-出锅。注意事项:(1)蒸汽灭菌器内冷空气完全排除;(2)干热灭菌时
6、:玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等耐高温的物品都可用此法灭菌,但是,培养基、橡胶制品、塑料制品等不能使用干热灭菌;(3)紫外线损伤眼角膜及视神经,刺激皮肤,所以应避免在直接紫外灯下工作。实验步骤(要具体,第一步,第二步……):手提式高压蒸汽灭菌锅使用步骤:⑤加水:使用前在锅内加入适量的水,加水不可过少,以防将火菌锅烧干,引起炸裂事故。②装锅。将灭菌物品放在灭菌桶中,不要装得过满,旋紧锅盖,关闭排气阀。③调节时间及温度。将时间旋钮调至30min,温度旋钮调至121°C,打开电源开关,灭菌锅开始
7、自动加热。④加热排气。加热一段时间后待锅内沸腾,并有人量蒸汽口排气阀口动排除,维持2〜3min以排除冷空气。为保证锅内空气充分排除,需再人工排气一次,即当压力到达().05Mpa时关闭电源,缓慢打开排气阀,锅内气体排尽后关闭排气阀,再次打开电源,继续加热。⑤保温保压。当压力升至0.1Mpa时,温度达121°C,此时锅体口动控制热源,保持压力,维持30min后,自动切断热源。⑥出锅。当压力表降至''0''处,稍停,使温度继续降至100°C以下后,打开排气阀,排尽锅内气体,旋开锅盖,取出灭菌物,盖好锅盖
8、。超净工作台使用步骤:①用75%酒粘棉球擦拭超净工作台而,然后将待灭菌物品放置丁超净工作台面上。②接通电源,打开紫外灯,打开鼓风开关,盖上遮阳布。③照射30min后,关掉紫外灯,打开日光灯。④操作完毕后,关掉鼓风开关和电源。实验应达到的基本要求:严格按照灭菌规范操作。使用高压蒸汽灭菌锅时,保证不离开实验室,经常观察锅盖指示表。保证灭菌质量。实验名称实验三、无菌操作及接种技术操作教师韩剑联系方式13669995610预计拍摄时间12月13日开始,实验目的:1.掌握培养基
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