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时间:2022-09-08
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血清尿酸测定1.实验原理使用TBHBA(2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)的酶比色测定法。尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。在过氧化物酶存在下,过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA(2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸),产生红色醌亚胺(Trinder反应产物)。尿酸酶尿酸+H2O+O2尿囊素+CO2+H2O2过氧化物酶TBHBA+4-氨基安替比林+2H2O2醌亚胺+3H2O2.标本:2.1病人准备:12小时禁食。2.2类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。3.标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃
1保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1+10稀释后检测,结果乘11后报告。4.标本运输:常温条件下保存运输。5.标本拒收标准:细菌污染的标本。6.实验材料6.1试剂威特曼尿酸测定试剂盒。试剂1试剂26.1.1试剂准备:试剂为即用式。6.1.2试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时,试剂可正常使用。6.1.3变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6.1.4注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2校准品:使用DiaSys公司提供的TruCalU
2校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7.仪器:奥林巴斯AU2700生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法:以TruCalU复合校准品尿酸校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠检测结果,以mmol/L报告。
312.参考值范围:(mmol/L)血清/血浆女性男性成人137~363214~488儿童0~5天113~470113~4701~4岁101~303131~4705~11岁178~381178~38112~14岁190~363190~44015~17岁190~381268~482尿液≤4.76mmol/d(正常饮食)≤3.57mmol/d(低嘌呤饮食)参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13.临床意义:
4尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。痛风是高尿酸血症最常见的并发症,血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸升高的原因还有:排泄功能下降的肾脏疾病,饥饿,滥用药物,过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见,其与罕见的遗传代谢紊乱有关。14.操作性能14.1线性范围:17.8~1190mmol/L。14.2精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU2700批内精密度小于3%,总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批间精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)样品1163.62.51.55样品1159.42.41.52样品2318.24.00.74样品2311.15.11.63样品3600.74.60.77样品3593.66.31.0614.3方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对70个样品进行UA检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.02x-26.2mmol/L;
5r=0.997。14.4灵敏度:本试剂的检测限为17.8mmol/L。14.5病人结果可报告范围:17.8~1190mmol/L。15.超出范围结果处理:本法对尿酸的检测范围为17.8~1190mmol/L。当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀释,重新测定,结果乘以2。16.病危报警值的处理:当尿酸测定值>720mmol/L时,在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17.方法局限性17.1本法对尿酸的检测范围为17.8~1190mmol/L。当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀释,重新测定,结果乘以2。17.2干扰物质:当样品中胆红素浓度£171mmol/L,血红蛋白浓度£1.00g/L,甘油三酯浓度£22.6mmol/L时没有观察到干扰。抗坏血酸会干扰检测结果。如需克服抗坏血酸的干扰,推荐使用DiaSys公司提供的尿酸液体试剂(TOOS法)。
618.补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。19.参考文献1.ThomasL,editor.Clinicallaboratorydiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.208-14.2.NewmanDJ,PriceCP.Renalfunctionandnitrogenmetabolites.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1204-7020.其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。
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