苯丙氨酸脱氨酶试验标准操作规程

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苯丙氨酸脱氨酶试验标准操作规程1．目的规范苯丙氨酸脱氨酶试验标准操作规程。2．原理某些细菌能产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙酮酸，与三氯化铁作用形成绿色化合物。。3．试剂3.1苯丙氨酸琼脂成分DL-苯丙氨酸2g氯化钠5g酵母浸膏3g磷酸氢二钠1g琼脂12g蒸馏水1000mlPH7.33.2制备除琼脂外其他的成分加热溶解，调PH至7.3，再加入琼脂溶解后分装，每管约4ml,置120℃灭菌15分钟，置成斜面，凝固后冰箱保存，备用。4．质控大肠埃希菌ACTT25922为黄色，阴性；普通变形杆菌CMCC49001为绿色，阳性。5.操作步骤

1将待检菌接种至苯丙氨酸琼脂斜面，35℃孵育18～24小时，在生长的菌苔上滴加三氯化铁试剂，即刻观察结果。6.结果判断斜面呈绿色者为阳性。7.注意事项7.1注意接种菌量要多，否则出现假阴性反应。7.2苯丙氨酸脱氨酶试验需在加入三氯化铁试剂后，立即观察，因为绿色易很快褪去，不管阳性或阴性结果，都必须在5分钟内作出判断。8.临床意义本试验特异性较高，主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌、普罗威登斯菌和摩根摩根菌均为阳性，肠杆菌科其他细菌则为阴性。