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1、摘要谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内重要的氧化酶类之一。大黄鱼是我国重要的海水经济鱼类,也是宁德市的特色产业之一。本实验通过在大黄鱼饲料中添加不同比例的中草药复方(太子参､巴戟､当归､枸杞､茯苓､白术),饲喂30天后，以脾脏组织为实验材料，采用实时荧光定量PCR技术分析饲喂中草药后GSH-Px基因的相对表达变化。结果显示：与对照组相比，各实验组中该基因的表达均出现了不同程度的下降(E5组除外)，E3组的表达量下降最多(43%)，其次是E1组(31%)，E5组的表达量比对照组升高19%，但是各组间均无显著性差异(P大于0.05)。本研究结果
2、为中草药作为饵料添加剂在大黄鱼饲料中的应用提供了基础数据，也为中草药作为鱼类免疫增强剂提供了前期研究基础。关键词：大黄鱼；基因表达；GSH-PxAbstractGlutathioneperoxidase(GSH-Px)isoneofthemostimportantperoxidaseenzymesinthebody,whichhasanimportanteffectontheinnateimmunityoffish.LarimichthyscroceaisoneofthemostimportanteconomicfishinChinaandseaw
3、aterisalsooneofthecharacteristicindustryinNingde.Inthisstudy,addingdifferentproportionofChineseherbalmedicinecompoundwereaddedinthefeedofL.crocea(radixpseudostellariae,baji,angelica,medlar,poriacocos,atractylodesandsoon).Afterfeedingafter30days,thespleenwasisolatedandextracted
4、forRNA.Thereal-timefluorescentquantitativePCRwasusedtoanalyzetherelativeexpressionofGSHindifferentgroups.Theresultsshowedthatcomparedwiththecontrolgroup,thegeneexpressionineachexperimentgroupweredecreased(withtheexceptionofE5group),andtheexpressionofE3groupdecreasedmost(43%),f
5、ollowedbyE1group(31%),theexpressionofE5groupamounthigherthanthecontrolgroupwas19%,buttherewasnosignificantdifferencebetweengroups(Pisgreaterthan0.05).TheresultsofthisstudywastoChineseherbalmedicineasbaitadditivesprovidebasicdatafortheapplicationintheLarimichthyscroceafeed,also
6、providestheChineseherbalmedicineasafishimmuneenhancerprophaseresearchfoundation.Keywords:Larimichthyscrocea;Geneexpression;GSH-Px目录1引言11.1大黄鱼11.2中草药及太子参主要简介11.3GSH-Px基因22材料和方法32.1材料､药品及仪器32.1.1原料鱼处理32.1.2试剂42.2方法42.2.1总RNA提取42.2.2RNA凝胶电泳42.2.3RNA定量分析52.2.4RNA反转录52.2.5SYBRGreen
7、实时荧光定量PCR53实验结果及分析63.1RNA的质量检测63.2熔解曲线分析73.3基因表达分析74讨论84.1中草药添加相关应用与前景84.2中草药添加对GSH-Px基因表达的影响84.3总结9参考文献10致谢12中草药添加对大黄鱼GSH-Px基因表达的影响1引言1.1大黄鱼大黄鱼（Larimichthyscrocea）辐鳍亚纲,鲈亚目,石首科,黄鱼属｡又称黄花鱼､黄瓜鱼､黄鱼等｡因体色金黄､肉质细嫩､营养丰富,受到了广大消费者的喜爱,是我国近海洋经济鱼类之一[1]｡大黄鱼作为我国海洋鱼类的重要组成部分，有着最大规模的海水养殖基地。以宁德为代
8、表，它是我国大型黄鱼产业的发源地，也是大黄鱼最大养殖基地。大黄鱼的养殖不仅促进了宁德当地的水产养殖业，还成为了闽东的支柱产
