颅脑损伤动物实验方案

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1、XX药物大鼠脑损伤的实验研究方案1目的：考察XX药物对大鼠脑损伤后运动及感觉功能恢复。2方法：2.1动物分组将60只wistar大鼠按体重编号随机分为6组,每组10只。①假手术组:仅施行开颅手术,不给予损伤。②单纯损伤组:损伤后，每日静脉给予生理盐水（与高剂量组等体积）。③阳性对照组：损伤后，每日静脉给予神经节苷酯10mg/kg。④低剂量观察组：XX药物？mg/kg(转换因子法，相当于60kg体重的人？/天)⑤中剂量观察组：XX药物？mg/kg(转换因子法，相当于60kg体重的人？/天)⑥高剂量观察组：XX药物？mg/kg(转换因子法，相当于60kg体重的人

2、？天)2.2造模运动区机械性脑损伤模型的建立:wistar大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.4ml/100g)麻醉,固定于立体定位仪上,参考大鼠鼠脑图谱,大鼠脑右侧运动感觉区皮质大体定位区域为:以前卤右旁2.5mm,后1mm为原点,前后各2.5mm,左右各1mm的一狭长区域。制作大鼠脑损伤模型时,在消毒后于头部正中线作一纵形头皮切口,钻孔并暴露上述区域,于创伤点用1ml注射针头破坏上述运动感觉区皮质,针头刺入皮质约2mm深,取出针头。无菌骨蜡填充骨窗缺损处。缝合切口,雌雄分笼,置于笼内自然苏醒、自由饮食。2.3给药方法给药途径采取静脉推注给药的方法，于损伤后1

3、2小时开始第一次推注给药，以后每日静脉推注给药一次，连续给药20天。2.4神经运动行为学评分及行为学检测:术毕24h采用运动及感觉神经功能评分法：(l)运动试验:提尾试验,每项计1分:前肢屈曲,1分;后肢屈曲,1分;头与垂直轴成角大于10度并持续30s,1分。(2)行走试验,最高3分:正常行走,0分;向前直行时不稳,1分;向瘫痪侧转圈者,2分;身体向偏瘫侧倾倒,3分。(3)感觉试验,每项记1分:放置试验(视觉和触觉试验)，l分;本体感觉(深感觉,将鼠爪压向桌面刺激肢体肌肉反应),l分,最高分8分。损伤后10d和20d再次对各组进行评分。2.1血清TNF-α、

4、IL-1、IL-6、IL-8含量变化用试剂盒检测大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8的含量变化，检测时间点包括：手术前、手术后8h(第一次给药前)、手术后24h(给药前取血，以下同)、手术后72h、手术后10d。2.2实验结果的展示与数据分析表1：神经运动及感觉功能评分(±S)组别术前术毕24h术毕10d术毕20d假手术组单纯损伤组阳性对照组（XX药物）低剂量观察组（XX药物）中剂量观察组（XX药物）高剂量观察组表2：血清TNF-α含量变化(±S)组别术前术毕8h术毕24h术毕72h术毕10d假手术组单纯损伤组阳性对照组（XX药物）低剂量观察组

5、（XX药物）中剂量观察组（XX药物）高剂量观察组表3：血清IL-1含量变化(±S)组别术前术毕8h术毕24h术毕72h术毕10d假手术组单纯损伤组阳性对照组（XX药物）低剂量观察组（XX药物）中剂量观察组（XX药物）高剂量观察组表4：血清IL-6含量变化(±S)组别术前术毕8h术毕24h术毕72h术毕10d假手术组单纯损伤组阳性对照组（XX药物）低剂量观察组（XX药物）中剂量观察组（XX药物）高剂量观察组表5：血清IL-8含量变化(±S)组别术前术毕8h术毕24h术毕72h术毕10d假手术组单纯损伤组阳性对照组（XX药物）低剂量观察组（XX药物）中剂量观察组

6、（XX药物）高剂量观察组运动及感觉功能的评分表用平均值±标准差(±S)来表示，血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8的含量变化用平均值±标准差(±S)来表示。统计学方法采用SPSS10.0统计学软件进行处理,组间比较采用方差分析,对组间方差不齐的采用非参数Kruskal-Wallis秩和检验,同一指标不同时间的数据比较采用重复测量的方差分析,进一步的多重比较采用LSD法。