幽门螺杆菌几种方法比较

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1、幽门螺杆菌几种培养方法比较文章发布者：来源：寻医问药网收藏本文    南方医院全军消化病研究所广州同和南方医院消化病研究所广东省广州市510515    项目负责人施理南方医院全军消化病研究所广州同和南方医院消化病研究所广东省广州市510515    收稿日期1998-01-20接收日期1998-03-01    Subjectheadingsgastricmucosa/microbiology;helicobacterinfection/diagnosis;helicobacterpylori/isolation&purif

2、ication    主题词胃粘膜/微生物；螺杆菌感染/诊断；螺杆菌，幽门/分离和提纯    1材料和方法    1.1材料称取空肠弯曲菌选择性培养基(购自上海卫生防疫站)4.2g，溶于100ml蒸馏水中，121℃，15磅高压灭菌20min，待冷却至60℃时，加入冻融绵羊血8ml，浇培养皿.厌氧培养箱(浙江义乌冷冻机厂)，烛缸(在干燥缸螺口处涂上凡士林).    1.2方法选择近期未服用过De-Nol,H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂、抗生素等药物，接受内镜检查的患者，内镜下距幽门3cm～5cm沿胃大小弯各钳取3块

3、粘膜；1块用于Hp尿素酶快速诊断；若为阳性，另1块送病理检查；若病理证实为Hp，则诊断为Hp感染；大、小弯各1块接种于上述培养基上，置厌氧培养箱内用抽气-换气方法使内含8%H2，5%O2，7%CO2，80%N2；另二块胃粘膜接种于上述培养基，放入烛缸内，点上蜡烛，密封.培养4d后观察Hp生长情况，Hp菌落不明显者，再延长培养3d.培养出来的菌落，经肉眼观察、涂片Grame染色、鞭毛染色、生化鉴定，鉴定是否是Hp.    2结果    2.146例Hp阳性胃粘膜活检标本，用厌氧箱抽气-换气及烛缸方法，培养4d，Hp检出情况：

4、用厌氧箱抽气-换气方法培养4d，Hp检出率为80.55%(37/46)，高于烛缸法的58.70%(27/46)，但没有统计学差异(χ2=0.8444，P>0.05).    2.246例Hp阳性胃粘膜活检标本，用厌氧箱抽气-换气及烛缸法，培养7d，Hp检出情况：用厌氧箱抽气-换气方法培养7d，Hp检出率为91.35%(42/46)，高于烛缸法的78.30%(36/46)，但没有统计学差异(χ2=0.21980，P>0.05).    3讨论    我们的研究证实，不论是培养4d，还是培养7d，用厌氧箱抽气

5、-换气方法培养Hp，Hp阳性率均高于用烛缸法培养Hp的阳性率.表明厌氧箱抽气-换气方法优于烛缸法，与国外研究相符[1].厌氧箱抽气-换气方法是用人工的方法，使培养箱内的气体成分达到：O25%，CO27%，H28%，N280%，表明这种气体成分是Hp的最适生长条件，这种方法是国内外公认的Hp培养方法，但需要一定的设备不易在广大医院推广普及.烛缸法是一种古老的制备厌氧或微需氧的方法；通过蜡烛燃烧，消耗氧气，产生二氧化碳来达到厌氧或微需氧的气体环境，产生的气体成分不如厌氧箱抽气-换气方法那么准确，Hp培养阳性率低于用厌氧箱抽气-换气方法Hp培养阳

6、性率.但烛缸法设备要求低，易于普及推广；而且培养4d，7d，Hp检出率仍可达到58.70%，78.30%；在缺乏厌氧箱抽气-换气装置的单位，有一定的使用价值.同时也表明Hp是一种兼性微需氧菌，我们其他的实验也证实，在有氧环境下Hp生长不良，但完全厌氧也并不适合Hp生长.即使在条件较好的单位，在将临床接种的平皿从病房送到实验室过程中，也使用烛缸法.我们的研究还发现，不论是厌氧箱抽气-换气方法，还是烛缸法，Hp培养7d的检出率均高于培养4d的检出率；表明适当延长培养时间，可以提高Hp检出率.我们认为从胃粘膜原代分离培养Hp，至少

7、需3d～4d，若为阴性，延长培养3d；国外研究也显示，Hp一个重要的生物学特性，是其生长很缓慢[3]，临床分离培养Hp，一般需要3d～4d；只有在培养7d阴性，才能判定Hp培养阴性[4].总之，有条件的单位或用于研究目的，最好使用厌氧箱抽气-换气方法培养Hp；而条件较差的单位，采取一些诸如延长培养时间的改进措施，使用烛缸法，也不失为一个好方法.