硕士论文-稻飞虱肠道细菌多样性分析

《硕士论文-稻飞虱肠道细菌多样性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号S482.3学号硕　士学位论文稻飞虱肠道细菌多样性分析***指导教师专业名称农药学研究方向杀虫剂毒理与抗药性答辩日期ANALYSISOFGUTBACTERIADIVERSITYFROMRICEPLANTHOPPERSBYXiangxiangLIATHESISSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheMasterDegreeofAgricultureScienceSupervisedbyAssociateProfessorJianyaSuDepart

2、mentofPesticideScience,CollegeofPlantProtectionNanjingAgriculturalUniversityNanjing,P.R.ChinaJune2010原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者（需亲笔）签名：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、

3、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□。(请在以上方框内打“√”) 学位论文作者（需亲笔）签名：年月日导师（需亲笔）签名：年月日目录目录摘要IABSTRACTi第一章文献综述11.昆虫肠道微生物11.1昆虫肠道微生物的研究概况11.2昆虫肠道微生物的多样性21.3昆虫肠道微生物的功能31.3.1昆虫重要营养成分的提供者41.3.2

4、微生物的解毒作用51.3.3参与昆虫的生殖调控61.3.4昆虫肠道微生物与Bt相互关系61.4昆虫肠道微生物的应用72.害虫的共生防治82.1共生防治symbiontcontrol的概念82.2共生防治的应用研究进展93.水稻飞虱103.1水稻飞虱发生与危害概况103.2水稻飞虱的防治技术113.2.1化学防治113.2.2生物防治123.2.3农业防治133.3稻飞虱共生菌或肠道微生物的研究进展134.本研究目的意义14第二章材料与方法171.供试昆虫172.飞虱肠道解剖173.肠道细菌的分离与培养173.1平板的制备173.2匀浆与涂板184.16SrRNA文库构建184

5、.1肠道细菌DNA提取184.216SrRNA基因片段的分析195.基因克隆205.1连接205.2转化与涂板205.3PCR检测阳性克隆206.RFLP分析217.非培养细菌的感染率的PCR分析227.1检测引物设计227.2制备样品227.3PCR扩增与电泳228.细菌分离物的生化指标分析238.1革兰氏反应238.2过氧化氢酶反应23i目录8.3V-P试验（测定细菌发酵葡萄糖的变化）238.4淀粉水解248.5硝酸还原特性248.6吲哚产生特性258.7明胶液化特性、H2S产生特性259.BLAST分析与系统发育分析2510.杀虫剂降解菌的驯化2610.1培养基制备26

6、10.2细菌驯化培养26第三章结果与分析271.飞虱肠道非培养菌的种类271.1非培养菌的16SrRNA鉴定271.2非培养菌的系统发育分析331.3非培养菌在飞虱种群中的发生率392.飞虱可培养菌的种类与鉴定423.杀虫剂降解菌的驯化及分析46第四章讨论491.飞虱肠道细菌的多样性492.飞虱肠道优势共生菌的功能513.杀虫剂降解菌524.对稻飞虱进行共生防治的可行性分析53第五章主要结论55参考文献57致谢67攻读学位期间发表的论文69i目录i摘要稻飞虱肠道细菌多样性分析摘要本研究主要采用传统培养与16SrRNA基因序列分析研究的方法对白背飞虱［Sogatellafurc

7、ifera（Horváth）］和褐飞虱［Nilaparvatalugens（Stål）］肠道中的细菌菌落进行了初步分离与鉴定研究，对其生理生化特性进行了分析。①采用16SrRNA基因序列分析的方法从白背飞虱和褐飞虱的肠道中鉴定出属于11个属的细菌，它们是Wolbachia、短波单胞菌属（Brevundimonassp.）、定氮螺旋菌属（Azospirillumsp.）、苍白杆菌属（Ochrobactrumsp.）、草螺菌属（Herbaspirillumsp.）、丛毛单胞菌属（Comamonassp.）、