nanophotometer操作指南

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1、NanophotometerPearl操作指南lStep1插上电源，按键开机。lStep2开机后，见如下页面：按字母数字键选择所需功能。微量级测量(常用方法测RNA,DNA和蛋白质)常规比色皿测量(核酸，蛋白质，细胞浓度)其他功能(全波长扫描，动力学测定等)用户自建方法相关设置(时间，打印机等)lStep3选择数字键1进入微量级测量，如下页面：核酸分析(dsDNA,ssDNA等)------NucleicAcid蛋白分析----------------------ProteinStep4按数字键1进入核酸分析界

2、面Step5按数字键1进入dsDNA---双链DNA分析Step5---第1步选择不同的LidFactor---光程盖，有5倍、10倍、50倍、100倍、250倍可选，机器标配一般是10倍和50倍，先选50倍，如果提示浓度太低再换10倍的Step5---第2步选择右边的Units浓度单位，一般选ng/ulStep5---第3步按绿色Sample键进入分析界面，先用水或缓冲液点样，按Blank键做空白校正，然后用搽镜纸把点样台和光程盖搽干净，把样品点到点样台中间的小镜子上，盖上光程盖，按绿色Sample键3.5秒

3、内显示测量结果Step5---第4步1、查看测量结果，左上角显示230nm、260nm、280nm的吸光度，如果吸光度在0.01—1.5之间，结果是可以信赖的，在0.3是最准确的，在0.01—1.5范围之外的结果不可信赖2、左下角给出的比值如果在1.8—2.0之间说明客户提的核酸比较纯，小于1.8说明有蛋白质干扰，大于2.0说明有RNA干扰；注：DNA：260/280=1.8---2.0，小于1.8说明有蛋白质干扰，大于2.0说明有RNA干扰；RNA：260/280=2.0---2.5,小于2.0说明有蛋白质干

4、扰，大于2.5说明有寡聚RNA；蛋白质中所含核酸很少，对蛋白质的影响忽略不计。lStep4②选择数字键2进入蛋白测量，如下页面：①ProteinUV普通蛋白分析②ProteinDye染色蛋白分析Step5按数字键1进入普通蛋白分析，如下页面：选择或输入相关参数Step5---第1步选择不同的LidFactor---光程盖，有5倍、10倍、50倍、100倍、250倍可选，机器标配一般是10倍和50倍，先选50倍，如果提示浓度太低再换10倍的Step5---第2步选择右边的Protein，有五种可选，一种自建CUS

5、TOM，一般选BSA选择Units浓度单位，一般选ng/ulStep5---第3步按绿色Sample键进入分析界面，先用水或缓冲液点样，按Blank键做空白校正，然后用搽镜纸把点样台和光程盖搽干净，把样品点到点样台中间的小镜子上，盖上光程盖，按绿色Sample键3.5秒内显示测量结果Step5---第4步1、查看测量结果，左上角显示230nm、260nm、280nm的吸光度，如果吸光度在0.01—1.5之间，结果是可以信赖的，在0.3是最准确的，在0.01—1.5范围之外的结果不可信赖lStep3选择数字键2进

6、入常规比色皿测量，步骤和方法同Step3。lStep3选择数字3进入其他功能界面，如下界面：lStep4选择相应功能进行实验。单波长扫描(Abs,T%)浓度测量(Lambert-Beer-定律)全波长扫描(200—900nm)动力学计算标准曲线制作多波长扫描吸光度比率lStep3选择数字键4进入用户自定义方法界面，如下界面：lStep4选择数字键1进行方法建立。(能够储存9种方法)lStep3选择数字键5进入其他设置。页面如下所示：lStep4选择相应数字进入相关设置。时间设定数据格式设定打印/输出设定基线等设

7、定屏幕亮度设定①dsDNA双链DNA②ssDNA单链DNA③RNARNA④Oligo寡核苷酸⑤dsDNADye染色双链DNA⑥ssDNADye染色单链DNA⑦RNADye染色RNA⑧OligoDye染色寡核苷酸