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时间:2018-01-17
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1、RI显微操作系统操作方法一、空中定位(设置针)用两个4X物镜1、拿一个空的皿,轻轻在上面交叉线。2、放置这个盘在显微镜载物台下,并移到中心。3、选4X物镜(无座,或低4X物镜),聚焦交叉线在表面(在这“10个步骤”中不需再调显微镜聚焦钮!!)。4、选4X物镜带座(或4X)。5、全部升有黄/黑颜色杆,将针嵌入到左边HOLDER,再将它放入PAR21(左边)。6、对中心,将控杆(红色)B、C放在中间位置。B在下面为X、Y、Z方向微调,C在上面为X、Y粗调;同时Z轴方向,即上、下方向的微调放在中间。7、将针调进显微镜视野,可调HOLDER前进驱动钮“E”,和PAR21顶上粗
2、调(升、降低钮)“F”。如必调“C”,调“B”。检查针是否一条线,可旋转HOLDER持针器上的“G”。8、选择4X物镜(不带座),这时交叉线仍在被聚焦面。9、全部降低(黄/黑)杆,将针进入视野,并稍微盘的表面,如果发针重复太,或太低可调整“H”。时保证针稍盘的表面,仅需调B(“B”——为X、Y、Z微调)。10、重复上面步骤,调injecting针。二、微针气路衡(仅对injecting针进行,千万不对Holding针进行)选一个干净、单独皿,不能有油覆盖在上面。方法一:1、放入一大滴PVP在盘的中心(不用油)。2、旋转rotator顺时针,直到全部降下。3、压下“E-
3、button”钮。4、用显微操纵仪降低针进入media/PVP介质滴里。5、旋转SAS反时针(向上)大约75%(75mm)。6、保持衡大约5分钟,PVP上升进入针的不可拉处。7、压下“E-button”不放松,旋转SAS顺时针(向下)大约25mm。8、举针换皿。方法二:(本方法前四步同方法一,仅从第五步开始区别)5、旋转SAS反时针(向上)大约4~5个圈。6、保持衡对PVP三分钟,对培养液4分钟。如使用PVP,建议PVP浓度不太浓,最好≦7%或直接在培养液中进行衡。7、压下“E-button”,并松手,等两分钟。8、旋转SAS顺时针(向下)大约3~4圈,等三~四分钟,
4、一般液自会到针的前端。9、必时可顺时针或反时针调整,直到针前端为您需的液长度。10、举针换皿。注意:1、用手动控roatator当injecting针内液开始移动时,手的动作这时慢。2、重新装针,应先放气(注意安全,装针的方向不对着人)。3、应用新针进行练习,直接从气路衡、动精子、吸、吹精子等操作连贯进行,这样容易找到感觉,上手快。这样看似浪费但比先用旧针动,再用新针或旧针进行气路衡、吸、吹精子效果好。4、我们不建议用旧针练习,但如果用旧针练习,请一定注意不将针内油、液吸入气路管子内。三、维护1、概述(1)不使用时,如果定期使用防尘盖保仪器就没有必再进行维。(2)必须
5、迅速去除液或灰尘,也就是说保持仪器清洁。2、电动仪器(1)洒出的液:禁止弄湿电动仪器。如果水不小心洒在上面,在菜单上把电源闭,然后迅速擦干仪器。(2)保险丝:必须用新的合适率的保险丝来替换损坏的保险丝。3、显微操纵器在仪器的安全轴承上面大量地使用润滑剂,此,没有必进行定期的维。由使用了轴承环,在每根控杆底部的球形轴承都不需润滑剂。然而,我们建议每六个月调紧固螺丝一次。如果溶液被洒落在仪器上面,或者原始的润滑剂受到污染或者已经被清除掉,线性滑珠就需用优质的二硫化钼油脂(例如Rocol或类似的物质)来润滑。四、故障处理1、注射器内油达到了微吸液管的顶端了吗?(仅用充油系统
6、系统)更换微吸液管——油不能从顶部抽出——当往工具柄嵌入微吸液管的时候不允许油到达顶部。2、系统里有污油?(仅用充油系统系统)更换聚乙烯管道和矿物油。3、你已经使你的注射微吸液管衡了吗?(仅用充气系统)衡注射吸液管——使用SAS11/2-E空气注射器(注意:仅对INJECTING针进行,不对HOLDING针进行。选一个干净,单独皿,不能有油覆盖在上面;总行约100mm)。(1)在有盖培养皿中间滴入一滴相当大的PVP。(2)顺时针方向旋转SAS控器(也就是向下)。(3)按旋转器上部的衡。(4)使用显微操纵控装置把微吸液管放到PVP液滴里。(5)逆时针旋转SAS(向上)大
7、约75%的位移(6)放置5分钟左右使其衡,PVP应该把微吸液管提升到几乎达到微吸液管的不可拉柄处。(7)顺时针旋转SAS时继续按动衡;在注射过中保留约25%的位移用调整。4、故障:不能吸气/注射解决:是微吸液管顶端堵塞了吗?(1)如果你的装置带有SoSSonicSword,将微吸液管从样本取走,通过注射器的正压,从SoS施加脉冲,那么就可以把堵塞吸液管的污垢去掉。(2)用新的微吸液管替换。5、样品变干了吗?温和加热可以蒸发干未受保或者保不足的样品。在样品表面有3mm厚的矿物油层可以防止样品变干。6、吸液管仍然堵塞?你所使用的化学药品/媒质还在保存期内
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