纯净水检验操作规程[1]2

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1、纯净水检验操作规程取纯净水样品300ml盛入三角瓶，置于(20±0.5)℃恒温箱中恒温30min取出备用。电导率的测定仪器：1电导率仪。　　　2、100mL烧杯。试剂：试剂0．01mol/L氯化钾标准溶液:取０.7456g氯化钾,溶于1000mL新煮沸放冷的重蒸馏水中，加塞备用。分析步骤1、按电导率仪使用说明，选好电极和测量条件(20±0.5)℃，并调校好电导率仪。2、在2只烧杯中各盛入100mL样品待测。3、将电极用待测溶液洗涤3次。4、插入待测溶液。选择适当量程，读出表上读数记录。（取未知电极常数的电极，用氯化钾标准溶液

2、(A2.2)洗涤5次后，插人盛放氯化钾标准溶液(A2.2)的烧杯中，测量一定温度下的电导率，即可计算出电极的电极常数。）菌落总数测定设备和材料1、恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃。2、天平。3、无菌吸管：1mL、10mL吸管。4、无菌锥形瓶：容量250mL、500mL。5、无菌培养皿：直径90mm。6、无菌试管。7、培养基琼脂培养基，１５g琼脂溶于1000mL蒸馏水中，摇匀。无菌生理盐水：8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，摇匀。8、检验程序菌落总数的检验程序见下图。检样25ml样品+225ml稀释液，均质10倍系

3、列稀释选择2个～3个适宜样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内每皿中加入15mL～20mL平板计数琼脂培养基，混匀计算菌落总数报告36℃±1℃48h±2h培养计算各平板菌落数操作步骤１无菌生理盐水：8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，摇匀。２样品的稀释（加生理盐水）：A,原液１０ｍｌ，Ｂ１０倍１０ｍｌ，,Ｃ１００倍１０ｍｌ。注入试管，加塞。３培养基稀释。１５g琼脂溶于1000mL蒸馏水中，摇匀。４高温灭菌。１２１℃高压灭菌１５ｍｉｎ。５接种。１ｍｌ样品加１５ｍｌ培养基于平皿中摇匀。6培养。琼脂凝固后，将平板翻转，４6℃

4、±1℃培养48h±2h。７、如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(4mL)，凝固后翻转平板，按6.4.2.1条件进行培养。6.4.3菌落计数可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)表示。6.4.3.1选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个

5、平板的平均数。6.4.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。6.4.3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。6.5结果的表述6.5.1菌落总数的计算方法6.5.1.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克(或毫升)中菌落总数结果。6.5.1.2若有两个连

6、续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按下式计算：N＝∑C/(n1＋0.1n2)d式中：N——样品中菌落数；∑C——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和；n1——第一个适宜稀释度平板上的菌落数；n2——第二个适宜稀释度平板上的菌落数；d——稀释因子(第一稀释度)。6.5.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。6.5.1.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。6.5.1.5若

7、所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。6.5.1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30～300之间，其中一部分小于30或大于300时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算。6.5.2菌落总数的报告6.5.2.1菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。6.5.2.2大于或等于100时，第三位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前两位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。6.5.2.3若所有

8、平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。6.5.2.4若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。6.5.2.5称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。大肠菌群计数7.3检验程序大肠菌群MPN计数的检验程序见下图。检样25ml样品+225ml稀释液，均质10倍