细菌生长繁殖与培养

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第2节细菌的生长繁殖与人工培养 学习目的1.掌握细菌生长繁殖的条件；2.掌握细菌与医学相关的合成代谢产物及其意义；3.了解细菌的遗传与变异； （一） 2.12 细菌的生长曲线活菌数的对数培养时间迟缓期对数期稳定期衰退期 （二）细菌的人工培养1．人工培养的意义（1）传染病的诊断与治疗（2）生物制品的制备（3）细菌的鉴定与研究2．培养基是由适合于细菌生存的各种营养物质配制而成的营养基质。按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基等。按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固体培养基。 3．细菌在培养基中的生长现象（1）细菌在液体培养基中的生长现象不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象，均表明已被细菌污染，禁止使用。 （2）细菌在半固体培养基中的生长现象经常用于做动力试验：即将细菌穿刺接种于半固体培养基中，经培养后，无鞭毛的细菌沿穿刺线生长，穿刺线清晰；有鞭毛的细菌则沿穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊不清，用于检查细菌的动力 （3）细菌在固体培养基中的生长现象菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经37℃，18～24小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同，即菌落特征，有利于鉴别细菌种类 细菌在各种培养基上的生长现象 人工培养基在医学领域中的应用1感染性疾病的病原学诊断和治疗2细菌学研究3生物制品的制备4基因工程 第3节细菌新陈代谢1.细菌的分解代谢产物及其临床意义（1） （2） 热原质细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原质耐高温，不被高压蒸气灭菌（121℃30min）所破坏，常通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。毒素毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒素和外毒素两种。侵袭性酶某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。2.细菌的合成代谢产物及其意义（1）与致病有关的合成代谢产物 （2）与治疗疾病有关的合成代谢产物抗生素由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物的物质称为抗生素。广泛应用于感染性疾病的治疗。维生素某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和维生素K，供人体吸收利用。 （3）与鉴别细菌有关的代谢产物色素是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细菌鉴别上有一定的意义。细菌素某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物，成为细菌素。 第4节细菌的遗传与变异（1）形态结构变异：指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。（2）菌落变异：S->R（3）毒力变异：指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。如卡介苗(BCG)（4）耐药性变异：指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。1.细菌的常见变异现象 基因变异在医学实践上的意义1用来诊断疾病2疾病治疗3疾病预防4基因工程方面 目标检测一、名词解释菌落耐药性变异二、选择题1．多数细菌生长繁殖的最适pH是（）A．pH7.2~7.6B．pH6.5~6.8C．pH8.0~8.8　　D．pH4.4~4.6E．pH5~62．细菌生长繁殖的条件不包括（）A．丰富的营养物质　　B．必要的气体环境C．合适的温度　　　D．合适的酸碱度E．充足的光线3.注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？()A．沉淀B.絮状物C.混浊D.菌膜E.以上都是三、简答题细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪些？ 第3节细菌与外界环境学习目标1、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。2、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。3、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。4、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、用途及影响因素。5、了解医院感染的概念。 细菌的分布细菌在自然界的分布土壤中的细菌水中的细菌空气中的细菌细菌在正常人体的分布正常菌群的概念及意义 正常菌群正常人体的体表及与外界相通的腔道中，存在着不同种类、数量和比例的微生物。这些微生物在正常情况下对人体无害称正常微生物群又称正常菌群。 正常菌群的生理作用1.生物拮抗作用2.营养作用3.免疫作用4.其他作用：抗衰老，抑制肿瘤 条件致病菌在特定条件下，正常菌群与人体之间以及正常菌群之间的平衡可被破坏而引起疾病，这些细菌称为条件致病菌。1寄居部位发生改变2机体免疫力下降3菌群失调与菌群失调症：又称二重感染，常见于长期应用大量抗生素的病人。 条件致病菌引起疾病的条件细菌方面机体方面正常菌群/非致病菌条件致病菌？寄居部位改变菌群失调免疫功能下降 消毒灭菌的基本概念1清洁将被微生物污染了的无生命表面还原为安全水平的处理过程。2消毒指用物理或化学方法杀死物体或环境中病原微生物的方法3灭菌杀灭物体上所有病原性与非病原性微生物以及细菌芽孢的方法4防腐指防止或抑制微生物生长繁殖的方法5无菌和无菌操作无菌是指无活的微生物防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作或者无菌技术。 二，清洁法将物品用清水冲洗，再用洗涤剂刷洗，除去物品上的所有污秽，最后用清水洗净。常用于墙壁，地面，桌椅，病床等的清洁以及物品消毒灭菌前的准备。 三，消毒与灭菌法 物理消毒灭菌法热力消毒灭菌法焚烧烧灼干烤（160℃~170℃2h）干热消毒灭菌法湿热消毒灭菌法巴氏消毒法62℃30min72℃30s煮沸法流通蒸汽消毒法间歇蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法121℃103kPa20~30min 2电磁波辐射杀菌法日光暴晒法：最简单，最经济 辐射杀菌法紫外线265~266nm杀菌原理用途与缺陷电离辐射X射线、γ射线、高速电子微波消毒法生物净化法除菌：经常用于手术室和病房滤过除菌法0.22µm不耐热血清、超净工作台等 化学消毒灭菌法1化学消毒剂的作用机制：有的可以使菌体蛋白质凝固变性或使酶蛋白失去活性，而致细菌代谢障碍，有的则破坏菌体细胞壁或细胞膜的结构，改变其通透性，使菌体破裂，溶解，导致细菌死亡。2化学消毒剂的使用原则：根据消毒剂的性能和病原体的特性，选择合适的消毒剂。严格掌握消毒剂的有效浓度，消毒时间和使用方法消毒前须将物品清洗擦干。浸泡消毒后的物品于使用前要用生理盐水冲洗注意温度和酸碱度对消毒剂作用效果的影响 化学消毒剂的使用方法浸泡法：用于耐湿不耐热的物品的消毒喷雾法：用于空气和物品表面如墙壁的消毒擦拭法：用于桌椅、地面、墙壁的消毒熏蒸法：用于室内物品，空气以及不耐湿，不耐高温的物品 消毒剂的分类高效消毒剂：杀灭细菌的芽孢和真菌的孢子在内的各种微生物中效消毒剂：能杀灭芽孢以外的各种微生物低效消毒剂：能杀灭大多数细菌的繁殖体及亲脂性病毒 化学消毒法类型作用机制常用种类酚类蛋白质变性，细胞膜损伤石炭酸醇类蛋白质变性与凝固乙醇氧化剂氧化作用、蛋白质凝固高锰酸钾、碘酒过氧乙酸、重金属盐氧化作用、蛋白质变性与凝固红汞、硫柳汞表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭染料抑制繁殖龙胆紫酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰烷化剂蛋白质及核酸烷基化环氧乙烷 影响消毒剂作用的因素消毒剂的浓度，作用时间和性质温度和酸碱度细菌的性质环境中有机物与拮抗物质的影响