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时间:2018-01-13
《资深elisa kit研发专家技术交流》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、资深ELISAKit研发专家——BJEIA和简简单单2006与您在线交流ELISA实验技术我现在正在做间接竞争ELISA的标准曲线,我已经做了好多次了,但是线性总是不好.具体过程如下:抗原包被:0.2μg/ml;一抗稀释度:1:3200(方阵滴定求得)竞争抗原稀释:10、5、2、1、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001、0μg/ml结果:竞争抗原在10-0.2μg/ml之间线性还行,到0.1μg/ml时OD值应该上升的,但是却下降了。好几次的结果都是如此。竞争抗原浓度:10 5 2 1 0.5 0.2 0.1 0.01 0
2、.001 0μg/mlOD值:0.369 0.437 0.602 0.69 0.744 0.802 0.788 0.815 0.791 0.86请多指教,谢谢!不胜感激!如此热心的战友,我鼓掌欢迎!!请教BJEIA战友:半对数曲线应该是什么样的?感谢BJEIA战友支持,很好的学习机会,请大家踊跃提问。请教:ELISA试剂盒如何挑选?BJEIA战友起了个好头,我也来顶一下!!为什么没有人回答问题呢?急切期盼各位战友回复我是第一个提问题的,如上(ghbu)多谢您的答复!ghbu的问题:0.1ug/ml处己经到达竞争法的灵敏度极限,0.
3、1-0.001ug/ml处的OD值变化是随机误差。酶标板的包被量CV在4%左右。加上实验的加样等的变异,一般夹心法的CV在5-10%,竞争法的CV在7-15%。所以在竞争法进行定量检测时,一般以0ug/ml的OD值的80%为线性上限。所以你的模型线性系列首点应设在0.5ug/ml或1ug/ml。=======================抗原包被:0.2μg/ml;一抗稀释度:1:3200(方阵滴定求得)竞争抗原稀释:10、5、2、1、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001、0μg/ml结果:竞争抗原在10-0.2μg/m
4、l之间线性还行,到0.1μg/ml时OD值应该上升的,但是却下降了。好几次的结果都是如此。竞争抗原浓度:105210.50.20.10.010.0010μg/mlOD值:0.3690.4370.6020.690.7440.8020.7880.8150.7910.86dingyanning:在进行定量曲线拟合时,可以有多种方式。半对数曲线是指对浓度取对数,吸光度则不进行处理。方程为:OD=资深ELISAKit研发专家——BJEIA和简简单单2006与您在线交流ELISA实验技术我现在正在做间接竞争ELISA的标准曲线,我已经做了好多
5、次了,但是线性总是不好.具体过程如下:抗原包被:0.2μg/ml;一抗稀释度:1:3200(方阵滴定求得)竞争抗原稀释:10、5、2、1、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001、0μg/ml结果:竞争抗原在10-0.2μg/ml之间线性还行,到0.1μg/ml时OD值应该上升的,但是却下降了。好几次的结果都是如此。竞争抗原浓度:10 5 2 1 0.5 0.2 0.1 0.01 0.001 0μg/mlOD值:0.369 0.437 0.602 0.69 0.744 0.802 0.788 0.815 0.791 0.86请
6、多指教,谢谢!不胜感激!如此热心的战友,我鼓掌欢迎!!请教BJEIA战友:半对数曲线应该是什么样的?感谢BJEIA战友支持,很好的学习机会,请大家踊跃提问。请教:ELISA试剂盒如何挑选?BJEIA战友起了个好头,我也来顶一下!!为什么没有人回答问题呢?急切期盼各位战友回复我是第一个提问题的,如上(ghbu)多谢您的答复!ghbu的问题:0.1ug/ml处己经到达竞争法的灵敏度极限,0.1-0.001ug/ml处的OD值变化是随机误差。酶标板的包被量CV在4%左右。加上实验的加样等的变异,一般夹心法的CV在5-10%,竞争法的CV
7、在7-15%。所以在竞争法进行定量检测时,一般以0ug/ml的OD值的80%为线性上限。所以你的模型线性系列首点应设在0.5ug/ml或1ug/ml。=======================抗原包被:0.2μg/ml;一抗稀释度:1:3200(方阵滴定求得)竞争抗原稀释:10、5、2、1、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001、0μg/ml结果:竞争抗原在10-0.2μg/ml之间线性还行,到0.1μg/ml时OD值应该上升的,但是却下降了。好几次的结果都是如此。竞争抗原浓度:105210.50.20.10.010.0
8、010μg/mlOD值:0.3690.4370.6020.690.7440.8020.7880.8150.7910.86dingyanning:在进行定量曲线拟合时,可以有多种方式。半对数曲线是指对浓度取对数,吸光度则不进行处理。方程为:OD=资深
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