rna甲醛变性电泳套装使用说明书

《rna甲醛变性电泳套装使用说明书》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、一站式RNA甲醛变性胶电泳试剂产品及特点本产品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装，专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。1.即开即用，用户不需要自己进行RNase灭活、高压灭菌、pH调节等操作。2.与Northern杂交等后续反应兼容。规格及成分成份10次包装琼脂糖5g电泳级去离子水250mL去离子甲醛60mLRNAload（含EB）0.5mLRNA电泳缓冲液，10×100mL使用手册1份运输及保存常温运输，4℃保存，有效期一年。自备试剂EB(10mg/mL)、DEPC水。使用方法注意：所有器皿（三角

2、瓶，电泳槽，枪头等）均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的外源RNA酶清除剂。。一、配制琼脂糖甲醛变性胶（1.2%,100mL）1.在三角瓶中加入下列成份:琼脂糖1.2-1.5g无菌水87mL2.将琼脂糖加热融化后，加入10mL10×RNArun（注意：10×RNArun瓶子一旦打开，就很容易产生污染细菌，细菌大量繁殖后会释放大量RNase，所以剩下的10×RNArun最好-20℃放置）。3.待胶冷却至60°C左右，再加下列成份:去离子甲醛3.0mL自备EB(10mg/mL)2-4mL注意：由于本试剂盒提供的RNAloadingbuffer中含E

3、B，所以也可以不加EB，但效果较差。如果使用自备的其他染料，如SYBRGreenI，则不能同时使用其他染料，包括含EB的RNA电泳缓冲液，用户需要另购不含EB的RNA电泳缓冲液）。1.混匀后倒胶,凝固半小时后即可以使用。二、配制电泳液2.将RNArun用去离子水稀释十倍后即成电泳液，所需要的体积根据使用的电泳槽决定。三、变性RNA样品3.在一干净的离心管中将5-10uLRNA和15uLRNAon混合，85℃保温10分钟后冰浴5-10分钟，直接上样。注意：每一泳道至多可分析30mgRNA，通常用10-20mg总RNA进行Northern杂交，可以检测高丰度mR

4、NA（占mRNA总量的0.1%以上）；如待测RNA含量极微，每个泳道需加0.5-3.0mgpoly(A)+RNA。四、电泳4.电泳时，将凝胶预电泳5min（电压为5V/cm）。随后加样品和分子量对照(如果有的话)，以3－4V/cm的电压电泳，直至染料迁移至胶下游的3/4处。5.电泳结束后，在300nm紫外灯下拍照。五、后续处理6.按标准方法进行Northern杂交等后续处理。使用效果图注: 用本产品电泳兔全血总RNA效果图。10uL总RNA与15uLRNAON混合后在甲醛琼脂糖变性胶上电泳0.5小时，直接在紫外灯下观察并照相。