精液稀释作业指导书

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1、广东华农温氏畜牧股份有限公司作业指导书版本/状态：A/0编号：HNWS/QW-7.5.1-12页码：第2页共2页精液稀释作业指导书1、目的制定严格的程序以保证精液得到正确稀释，减少次品精液的发生率。2、范围适用于公猪站实验室精液稀释过程。3、职责实验室操作人员负责配制稀释液和精液的稀释工作。4、工作程序4.1精液稀释液的配制常用稀释剂配方：保存天数335类型BTSKIVE20rPVa葡萄糖(g)3.7006.0001.150柠檬酸钠(g)0.600.371.165碳酸氢钠(g)0.1250.120.175EDTA钠0.1250.370.235氯化钾(g)10.075青

2、霉素(IU/ml)5005000.69链霉素(mg/ml)0.50.51.09蒸馏水加至(ml)100100100配制稀释剂要用精密电子天平，不得更改稀释液的配方或将不同的稀释液随意混合。配制好后可以先贮存，液态稀释液在4℃冰箱中保存不超过24小时，超过贮存期的稀释液应废弃。抗生素的添加，应在稀释精液前加入到稀释液里，太早易失去效果。稀释液的配制的具体操作步骤为：4.1.1所用药品要求选用分析纯，对含有结晶水的试剂按摩尔浓度进行换算。4.1.2按稀释液配方，用称量纸和电子天平按1000ml和2000ml剂量准确称取所需药品，称好后装于密闭袋中。4.1.3使用1小时前将

3、称好的稀释剂溶于定量的双蒸水中，用磁力搅拌器加速其溶解。4.1.4如有杂质需要用滤纸过滤。4.1.5稀释液配好后及时贴上标签，标明品名、配制时间和经手人等。4.1.6放在水浴锅内进行预热，以备使用4.1.7认真检查配好的稀释液，发现问题及时纠正。4.2精液的稀释处理处理精液必须在恒温环境中进行，品质检查后的精液和稀释液都要在37℃恒温下预热，处理时，严禁太阳光直射精液，阳光对精子有极强的杀伤力。稀释液应在采精前准备好，并进行预热。精液采集后要尽快稀释，未经品质检查或活力在0.7以下的精液不用于稀释。具体的稀释程序为：4.2.1精液稀释头份的确定：计算方法：人工授精的正

4、常剂量一般为30～40亿个精子/头份，体积为80～100ml，假如有公猪的原精液，密度为2亿/ml，采精量为150ml，稀释后密度要求为40亿／100ml头份。则此公猪精液可稀释150×2/40＝7.5头份，需加稀释液量为（100×7.50－150）ml＝600ml。同一种稀释液，若精子密度越大，精子所消耗能量越多，保存时间也就越短。广东华农温氏畜牧股份有限公司作业指导书版本/状态：A/0编号：HNWS/QW-7.5.1-12页码：第2页共2页4.1.1测量精液和稀释液的温度，调节稀释液的温度与精液一致（两者相差1℃以内）。注意：必须以精液的温度为标准来调节稀释液的温

5、度，不可逆操作。4.1.2将精液移至2000ml大塑料杯中，稀释液沿杯壁缓缓加入精液中，轻轻搅匀或摇匀。4.1.3如需高倍稀释，先进行1：1低倍稀释，1分钟后再将余下的稀释液缓慢加入。因精子需要一个适应过程，不能将稀释液直接倒入精液。4.1.4精液稀释的每一步操作均要检查活力，稀释后要求静置片刻再作活力检查。活力下降必须查明原因并加以改进。4.1.5用具的洗涤：精液稀释的成败，与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计，都要及时用蒸馏水洗涤，并进行高温消毒，以保证稀释后的精液能适期保存和利用。4.1.6精液的分装：稀释好的精液，检查其活力，前后一

6、致便可以进行分装，执行《精液分装、保存、运输作业指导书》。稀释后的精液也可以采用大包装集中贮存。但要在包装上贴好标签，注明公猪的品种、耳号以及采精的日期和时间。4.1.7记录：精液稀释记录见附表。1、相关文件《精液分装、保存、运输作业指导书》2、质量记录《精液稀释记录》