铁离子还原法.docx

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1、精品文档铁离子还原法(FRAP)1实验原理基于氧化还原反应的比色法，在低pH的溶液中，Fe3+-TPTZ(Fe3+-三叱陡三嗪)被抗氧化剂还原成Fe2+-TPTZ,使反应液变成深蓝色，在593nm处有最大光吸收，这样通过测量样品吸光度的变化来测量其抗氧化能力。吸光值愈高表示样品的还原力也就越强。2溶液的配制样品液:用乙醇配制浓度分别为0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml各样品溶液和对照BHT溶液。40mmol/L盐酸溶液:取浓盐酸(12mol/L)0.1ml加水至30ml，置于避光处，备用。0.

2、3mol/L醋酸钠缓冲溶液:称取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml,用水稀释定容至250ml，置于避光处，备用。10mmol/LTPTZ溶液：称取TPTZ样品31.233mg,用40mmol/L的盐酸定容至10ml,置于冰箱中冷藏备用。FRAP工作液：2.5ml10mmol/L的TPTZ溶液，2.5ml20mmol/L的FeCl3-6H2O和25ml0.3mol/L的醋酸缓冲液(pH3.6)混合均匀即得。3实验步骤2欢迎下载。精品文档FeSO标准曲线的绘制：准确称取6.08mg硫酸亚铁，溶于适量的水中，加入18mol/

3、L的硫酸0.25ml,再加水稀释至50ml定容，并置入小铁钉。取上述溶液5ml,加入5ml水，定容至50ml,即为800pmol/LFeSO4标准溶液。用该溶液配制梯度FeSO溶液，包括400pmol/L,200pmol/L,100pmol/L,50"iol/L和25pmol/L,于593nm测定吸光值，绘制标准曲线。取样品0.3ml,力口2.7ml预热至37c的FRAP工作液，摇匀后放置10分钟，于593nm测其吸光度值，以无水乙醇代替样品加入FRAP工作液作为空白，每个浓度做3次，求平均值。根据所得吸光值，在标准

4、曲线上求得相应FeSO4浓度，定义为FRAP®,其值越大，抗氧化活性越强。BHT做为阳性对照。2欢迎下载。精品文档欢迎您的下载,资料仅供套考!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习资料等等打造全网一站式需求3欢迎下载