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《GBT 26347-2010 蚊虫抗药性检测方法 生物测定法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICs11。020CO5中华人民共和国国家标准GB/T2634⒎-201o蚊虫抗药性检测方法生物测定法TestFnethodsofmosquitoresistancetoinsecticides-ˉBioassaymethods⒛11-O⒈14发布⒛11-Os-01实施中华人民共和国卫生部发布中国国家标准化管理委员会GB/T26347-201o刖舀本标准按照GB/T1.1-20o9给出的规则起草。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位:中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所、中国农业大学、北京疾病
2、预防控制中心。本标准主要起草人:赵彤言、汪中明、董言德、曾晓亢、高希武、宋锋林、佟颖、韩玉华。GB/T26347-201o蚊虫抗药性检测方法生物测定法1范围本标准规定了测定蚊虫对有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等杀虫药剂抗药性的诊断剂量法和敏感基线法。本标准适用于淡色库蚊(C祝clzp犭pje,zsp臼JJe,os)、致倦库蚊(C=。歹pj幽s日勿J″g仍ernscj口J勿s)、白纹伊蚊(A纟d召s@J3o歹c勿s)、中华按蚊(A″op切J纟ssj″召″s饣s)等蚊虫抗药性的生物测定。2术语和定义下列术语和定义适用于
3、本文件。2.1敏感基线susceptibⅡebaseⅡinedata所测蚊虫的敏感品系对某种杀虫剂的毒力回归线(L冫p)。2.2诊断剂Ⅰdagnosticdose由敏感品系的敏感基线计算得到的与死亡率99%或99.9%相对应的杀虫药剂剂量值(LC99或LC9⒐9),一般以www.bzfxw.com2倍LC99或LC9⒐9值区别抗性和敏感种群。2.3F1代Flgeneration采集的样本繁殖后的第一代蚊虫。3试虫样本多点采集。幼虫浸渍法采用F1代四龄幼虫。成蚊接触筒法采用野外采集的幼虫或蛹羽化后,3d~5d未吸血雌蚊。4
4、试剂丙酮、乙醚、白油、杀虫剂原药等。5仪器蚊笼、滤纸、接触筒(参见附录A)、吸蚊器。6测试条件温度:25℃±1℃,光周期:⒕L:10D,相对湿度:60%~80%。1GB/T26347-2010∶7敏感基线法7.1原理依据杀虫剂应用剂量和死亡机率值关系建立毒力回归方程,以敏感品系得到的杀虫剂毒力回归线作为敏感基线。以待测昆虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比,来确定待测种群的抗性水平。具体是比较两条毒力回归线的D值变化以及回归线计箅得到的半数致死量的变化。7.2操作步骤7.2。l幼虫浸渍法每只烧杯量入⒕9水。将待测药
5、剂用丙酮等比或一个系列浓度,通过预BO%,然后吸取实验确定药剂的浓度大于1mL已配制好的药(30只)连同50mL%~80%的温室水全部注人烧杯内,内,24h后检查死死亡率,将剂量取对数、将死亡率7.2.2成用白油与乙www.bzfxw.comg2的配比过预实验确定药剂的浓度系列每个浓度的药液均匀涂抹于15。垫于圆筒内壁,做为接触筒,用吸,开始计算接触时间,接触1h后葡萄糖水的棉花团置于隔板上的小与乙醚的混合物作为对照。根据每一位进行回归,求出LC5°值。7.3死亡判断7.3.1幼虫浸渍法轻轻触动幼虫,以不能逃避剌激视7.
6、3.2成蚊接触法试虫完全不动视为死亡。7.4结果表述结果用抗性倍数表述,抗性倍数=待测种群LC50值/敏感种群LC5°值。7.5判别标准敏感品系和所测样本之间95%置信限不重叠,且抗性倍数≥5倍为抗性种群。2GB/T26347-20108诊断剂I法8.l原理依据杀虫剂对敏感品系的毒力回归线,确定一个能够区分敏感个体和抗性个体或抗性杂合子的剂量。一般用2倍敏感品系的LC99值作为诊断剂量。根据待检测蚊虫种群在诊断剂量下的死亡率作为抗性判定标准。8.2操作步骒8.2.1幼虫浸渍法取1mL已配制好有149mL脱氨自来水的棒搅匀
7、。把另一杯中预先挑选好的30条幼虫水,全部注人上述烧杯内,合计zO0使药剂的终浓度达到诊断剂量(常用杀虫药应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡8.2.2成蚊接劝药剂用白稀释至诊断嗍的诊断剂量参见表R2和表RL‘,待溶剂挥发5h后,将滤纸筒内壁,用吸血雌蚊,μ枷触筒内,关闭隔板,开始计算接触r嗨用浸有8%葡萄糖水的棉花团置www.bzfxw.com为对照。8.3结果表结果用死¨¨····⋯·⋯·⋯·¨·(1)式中:M——死亡率Nm——死亡虫数N——试虫总数。对照死亡率小于5%tt公式进行校正;对照死亡率大于⒛%为无效测定。
8、依据Abbott公式校正死亡率,MⅡ=¨⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯¨⋯⋯⋯⋯⋯(2)1-Mc式中:——MⅡ校正死亡率;——⒕处理组死亡率;——贩对照组死亡率。8.4判别标准在诊断剂量下蚊虫的死亡率在98%~100%表明其为敏感种群;死亡率在80%~97%表明其为可能抗性种群;死亡率(80%表明其为抗性种群。GB/T26347-
