复方一枝蒿片体内外抗菌作用探究

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1、复方一枝蒿片体内外抗菌作用探究　　【摘要】目的：研究复方一枝蒿片的体内外抗菌作用。方法：采用体内和体外抗菌实脸，研究复方一枝蒿片的抗菌作用。结果：复方一枝蒿片在体外能够明显地抑制和杀灭金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌，同时对乙型溶血性链球菌有抑制和杀灭作用，对大肠杆菌（Escherichiacoli）无抑制和杀灭作用；在体内能够显著降低变形杆菌感染小鼠的死亡率，但对大肠杆菌感染小鼠的死亡率没有显著作用。结论：复方一枝蒿片在体内、外均具有良好的抗菌作用。【关键词】复方一枝蒿片；抗菌作用；体内、外实验复方一枝蒿片为江苏黄河药业股份有限公司研制

2、、生产的新型中草药成品，其主要成分为一枝蒿、板蓝根和大青叶，按照维医理论，其具有清除“乃孜来”，解毒利咽，用于“乃孜来”所致的感冒、发烧、咽喉肿痛的功效；在中医学中其具有解表祛风、凉血解毒的疗效。常用于邪毒所致的感冒发烧、咽喉肿痛、病毒性感冒见上述证候者。相对于复方一枝蒿颗粒，该产品能够克服颗粒剂用辅料用量大、服用需用开水冲服、口味不佳等缺点。为了进一步开发复方一枝蒿片，笔者对其在抗菌方面的药效作用进行了研究，以期为复方一枝蒿片的临床应用进一步提供理论依据。51材料与方法1.1材料1.1.1仪器紫外分光光度计（UV-2201）：日本

3、岛津公司；台式高速冷冻离心机（5417R）：艾本德中国有限公司（EppendorfChinaLimited）；电子分析天平（AG-204）：瑞士MettlerToledo公司；电热恒温培养箱（DNP-9082）：上海精宏实验设备有限公司；洁净工作台（SW-CJ）：上海屹明净化设备有限公司。1.1.2试药地塞米松（湖北潜江制药股份有限公司）；MH肉汤培养基和MH琼脂培养基（上海微晶生物技术有限公司）；双黄连口服液（河南福森药业有限公司）；复方一枝蒿片（江苏黄河药业股份有限公司，实验前用灭菌蒸馏水溶解配成所需浓度）；MH血清肉汤培养基和

4、MH血琼脂平板培养基（分别为肉汤加灭活小牛血清，琼脂培养基加脱纤维羊血）由本室制备。1.1.3动物及菌种Balb/c小鼠300只，雌雄兼半，6～7周龄，购自上海斯莱克动物公司；金黄色葡萄球菌ATCC25923；大肠杆菌ATCC58922由江苏省药品检验所提供；肺炎链球菌ATCC49619；乙型溶血性链球菌ATCC6305。1.2方法1.2.1体外抗菌实验5采用试管法测最低抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）研究复方一枝蒿片的体外抗菌研究[1-3]。1.2.1.1试验菌准备取复苏的金黄色葡萄球菌（Staphylococcusau

5、reus）和大肠杆菌（Escherichiacoli）MH肉汤24h培养物分别接种至MH肉汤，37℃孵育6h；取复苏的肺炎链球菌（Pseudomonasaureginosa）和乙型溶血性链球菌（Streptococcushemolytic-β）MH血清肉汤24h培养物分别接种至MH血清肉汤，37℃，6h；分别取上述4种菌6h培养液，用麦氏比浊法调至109/mL，再作100倍稀释至107/mL，将107/mL定为工作浓度。通过倾注平板作菌落计数，最终确定每1mL液体培养基中加入0.1mL菌液。1.2.1.2复方一枝蒿水溶液制备取复方一

6、枝蒿片5g加15mL灭菌蒸馏水中，通过超声处理，使复方一枝蒿片充分溶解，用1%NaOH调至pH7.0，用0.5μm滤器滤过除菌，呈棕黄色透明液体。1.2.1.3抗菌实验复方一枝蒿水溶液1mL，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌用MH肉汤，乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌用MH血清肉汤分别作倍比稀释至第10管，第11管为菌液对照，第12管为MH肉汤无菌对照。1～10管药液稀释度分别为1：2，1：4～1：1024，共4排。每排1～11管分别加入4种试验菌液0.1mL，第12管不加菌液，为MH肉汤无菌对照，37℃，24h，观察结果。2结果5MH肉汤结果

7、显示金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和乙型溶血性链球菌感染的肉汤都有一定程度的变澄清，复方一枝蒿片对、肺炎链球菌和乙型溶血性链球菌有抑制和杀灭作用，见表1。MH平板结果见表2。3讨论上述研究显示，复方一枝蒿片剂能够明显抑制和杀灭金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌，对乙型溶血性链球菌有一定的抑制和杀灭作用，而对大肠杆菌无作用。同为上呼吸道感染常见病原菌的金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和乙型溶血性链球菌都可以被复方一枝蒿片所抑制和杀灭，这可以解释临床上常用复方一枝蒿片治疗咽炎、喉炎和气管炎等上呼吸道感染的原因。上述三种病原菌均为革兰阳性球菌，而大肠杆菌属

8、于革兰阴性菌，而革兰阳性球菌和革兰阴性菌具有不同的细胞壁结构[6]，复方一枝蒿片对前述各菌抑制和杀灭作用的确切作用机制是否与其阻止细胞壁合成有关[7]，还有待于进一步研究。复方一枝蒿片对大肠杆菌感染小鼠死亡的保护作用不显著，但是高剂量