感受态细胞的制备步骤.docx

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1、.....................最新资料整理推荐.....................1、一活：从-80℃取菌株，20mLLB+20uL氯霉素+20uL菌种，置于恒温振荡器中（37℃，200rpm）培养过夜（约12小时）。2、二活：20mLLB+20uL氯霉素+1mL菌种，于恒温振荡器上（37℃，200rpm）培养2小时。3、取6个1.5毫升EP管，无菌条件下将上述1毫升菌液倒入EP中（应带盖并高压灭菌过），每管倒两次活菌，8000rpm离心45s,弃上清。4、带菌液的置于冰上，冷却菌液，向其中一管加入1mLCaCl2平衡好，吹打均匀，三管并成一管，

2、8000rpm离心45s,弃上清。5、向其中一管加入400uLCaCl2，2管并成一管，放置4℃至少30min以上可用（一周内使用）。1