外周血单核细胞诱导的CD123髓系树突状细胞的特性研究(精).doc

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1、.....................最新资料整理推荐.....................外周血单核细胞诱导的CD123+髓系树突状细胞的特性研究        [11-01-2814:46:00]    编辑：studa20                    作者：石军,王敏,万云,池田和真【摘要】 　　目的:探讨体外髓系培养体系中外周血单核细胞来源的CD123+髓系树突状细胞（mDC）的生物学特性。方法:分离健康人外周血单核细胞,用重组的粒/单核细胞集落刺激因子（GMCSF）和白细胞介素4（IL

2、4）将其诱导为树突状细胞（DC）。用流式细胞术（FCM）检测DC表面共刺激分子、CD304、CD123和CD11C的表达,并用间接免疫磁珠法将其中CD123+DC加以分离纯化;激光共聚焦显微镜、扫描电镜观察CD123+DC形态;ELISA法检测CD123+DC的IL12分泌量;葡聚糖吞噬试验和3HTdR渗入法分别检测CD123+DC的吞噬功能和对同种异体T细胞的刺激能力。结果:外周血单核细胞经GMCSF和IL4诱导7d后,细胞表面高度表达CD86和CD11C,中等量表达CD1a和CD123,低表达CD83,丧

3、失CD14的表达,其中,CD123和CD11C均匀分布于DC表面。免疫磁珠纯化后的CD123+DC呈现典型的不成熟DC形态,除细胞体积较小外,其表面突起类似于CD123-DC。CD123+DC仅微量分泌IL12,其吞噬能力强于CD123-DC（P<0.05）,但抗原刺激功能低于后者（P<0.05）。结论:GMCSF和IL4培养体系中的CD123+DC可能是DC分化发育过程中更早期的未成熟mDC,具有独特的生物学特性。7.....................最新资料整理推荐..................

4、...【关键词】 髓系培养体系;髓系树突状细胞;CD123　　［Abstract］AIM: ToinvestigatethebiologicalcharacteristicsofCD123+DCderivedfromcordbloodmonocytesinmyeloidculturesystem.METHODS: ThemonocytesisolatedfromperipheralbloodwereculturedwithGMCSFandIL4toinduceDCfor7days, andtherelatedph

5、enotypeofDCwasanalyzedbyflowcytometery.CD123+DCwerepurifiedwithmagneticcellsortingseparationtechnique.ThemorphologicalpropertiesofCD123+DCwasobservedunderconfocallaserscanningmicroscopeandscanelectronmicroscope.TheconcentrationofIL12secretedbyDCwasanalyzedbyE

6、LISA.ThefunctionofendocytosisandantigenpresentationwasevaluatedbyuptakingFITCdextranandallogeneicmixedTlymphocytereaction(MLR).RESULTS: FACSanalysisshowedthehighexpressionofCD86andCD11C, moderateexpressionofCD1aandCD123, lowlevelsofCD83onDCafterinductionbyGMC

7、SFandIL4for7days, whiletheexpressionofCD304wasratherlow.WelldistributedCD123andCD11CweredetectedonDC.PurifiedCD123+DCshowedtypicalmorphologyofimmatureDCwithsimilarshortcytoplasmicprojectionsasCD123-DC.CD123+DCsecretedlowerlevelofIL12, andexhibitedmore7......

8、...............最新资料整理推荐.....................significantendocytosisandlessantigenpresentationfunction thanthatofCD123-DC（P<0.05）.CONCLUSION: CD123+DCinducedwithGMCSFandIL4m