最新实验三、血清、红细胞制备ppt课件.ppt

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1、实验三、血清、红细胞制备实验目的1、学习实验动物不同部位的取无菌采血方法；2、学习动物血清、红细胞的制备；3、观察兔、豚鼠的免疫器官。实验原理免疫系统由免疫器官、免疫组织、免疫细胞和免疫分子组成。免疫细胞1.固有免疫的组成细胞：吞噬细胞、淋巴器官、树突状细胞、NK细胞、NKT细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；2.适应性免疫应答细胞：T细胞、B细胞免疫分子1.膜型分子：TCR、BCR、CD分子、粘附分子、MHC分子、细胞因子受体。2.分泌型分子：免疫球蛋白、补体、细胞因子。实验原理家兔采血方法（1）耳缘

2、静脉采血：家兔固定，将耳缘静脉皮肤上的毛拔去或剪去，75%酒精消毒，用左手食指和中指夹住静脉近心端，以使其血管怒张拇指和小指夹住耳缘部分，以左手无名指和小指放在耳下作垫，待静脉充盈后，右手持注射器使针头由静脉末端刺入，顺血管方向向心端刺约1-1.5cm，放松左手拇指和食指对血管的压迫，右手缓慢抽吸注射器，若注射阻力较大，说明针头没有刺入静脉，应调整针头或重新穿刺；也可以刀片在血管上切一小口，让血自然流出，滴入盛器内，采血完毕，用干棉球按压止血。（2）兔心脏穿刺取血：家兔背位固定，在左胸第2～4肋间剪毛

3、一块，用75%酒精和碘伏消毒。然后用5～10ml注射器，在胸骨左缘3-4肋间心尖搏动最明显处作垂直穿刺。注意事项有：⑴动作宜迅速，以缩短在心脏内的留针时间和防止血液凝固；⑵如针头已进入心脏但抽不出血时，应将针头稍微后退一点。⑶在胸腔内针头不应左右摆动以防止伤及心，肺、实验原理豚鼠采血方法（1）背中足静脉取血固定动物，将动物脚背面用酒精消毒，找出背中足静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射针刺入静脉。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复采血时，两后肢交替使用。（2）心脏采血通常在胸骨左缘

4、的正中，选心跳最强的部位作穿刺。针头宜稍细长些，以免发生手术后穿刺孔出血，其操作手法详见兔心脏采血。实验动物的采血量动物种类最大安全采血量（ml）最大致死采血量（ml）小白鼠0.10.3大白鼠12豚鼠510家兔1040狗50300猴1560血清的制备血清的制备：不加抗凝剂无菌静脉采血2ml，37℃自然凝固，待血清开始出现后，放冰箱内12小时或24小时，离心分离血清（3000rpm，5-10min），得到的上清液即为血清，小心将上清吸出（注意切勿吸出细胞成分）。血浆的制备：需加抗凝剂（抗凝剂：血液=1：

5、9）无菌静脉采血2ml（注射器用抗凝剂润洗），将血液加入到有抗凝剂的离心管中颠倒混匀，离心（3000rpm，5-10min）后所得的上清液即为血浆。注意：血清的保存可以在每50ml血清中加1％硫柳汞水溶液1ml防腐。红细胞及悬液制备标准红细胞的制备：取全血1ml，加等渗盐水2～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2～3ml按上述方法洗涤，共三次，离心去上清，余下的为压积红细胞。红细胞悬液的制备：①2％红细胞悬液：压积红细胞2滴+新鲜等渗盐水4ml②5％红细胞悬液：压积红细胞5滴+新鲜

6、等渗盐水4ml③10％红细胞悬液：压积红细胞5滴+新鲜等渗盐水2ml注意：标准红细胞盐水悬液临用前制备，最多存放3天，用柠檬酸葡萄糖溶液（ACD）溶液保存最长可保存1周实验器材实验动物：豚鼠、兔实验试剂：血液抗凝剂（1:500u肝素钠注射液）生理盐水实验器材：5ml注射器、一次性离心管（5、10、15ml规格）、普通吸管、尖吸管、1ml刻度吸管75%酒精棉球水平离心机实验步骤1.用75％酒精棉球消毒采血部位皮肤2.用5ml注射器分别抽取豚鼠或兔静脉血2ml豚鼠采血法：背中足静脉取血心脏采血、兔采血法：

7、耳缘静脉采血心脏采血3.制备血清、红细胞（如上述流程）注意事项：1、采血部位需要进行消毒2、采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；3、注意血清与血浆制备的区别：抗凝剂的使用4、不同规格离心管的使用一次性离心管规格用途15ml血浆、红细胞制备的离心10ml放置不同用途的吸管5ml血清制备、红细胞悬液制备实验作业1、血清、血浆的组分的区别？2、血清、血浆制备方法及操作的区别？第三章泵站进水设计一、本章的基本内容1．引水渠：①引渠的设计要求；②引渠与进水闸的协调运用；③引渠与水泵工况的配合。2．前池：①前池

8、的作用和类型；②正向进水前池的尺寸确定；③侧向进水前池的类型和特点；④前池内的流态改善。3．进水池：①池内流态时对水泵工作的影响；②进水池形状和尺寸确定；③消除进水池中有害漩涡的措施。4．进水流道：①进水流道的作用与设计要求；②肘形进水流道设计方法；③其它进水流道。二、讲解重点1．前池内流态特点及其改善措施。2．进水池中漩涡类型，影响因素及进水池尺寸确定。3．肘形流道的设计方法。第一节引渠一、引渠的作用1、使泵房尽可能接近灌区（或容泄区），以减小输水渠道