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1、HPLC和CE衍生试剂探素液相色谱和毛细管电泳中的衍生试剂为什么衍生检测方法与检测信号化学衍生主要是用于改善检测灵敏度不好线性检测或较窄线性范围检测和高检出限的分析物，通过衍生得到改善不能与其它基体物质分辨的分析物，通过衍生可以扩大差别荧光生成（fluorogenic）试剂和荧光标记（fluorescentlabel）试剂.柱中衍生这一衍生方法基本是把衍生试剂溶入流动相，注射样品后，在柱上分析物与流动相中的衍生试剂反应方法适于不太稳定的衍生物，反应要快所需衍生试剂量较大，昂贵的衍生试剂不应采用此法.衍生试剂的构成与要求衍生
2、试剂必须含有可检测的基团，即显色团（chromophore）、荧光团（fluorophore）和电基团（electrophore）含有反应基团如FITC衍生试剂稳定要纯，不含杂质，形成一种衍生物，尽可能没有副产物形成尽可能高衍生物产率；需衍生试剂尽少，避免试剂峰的干扰.对于柱后衍生试剂，同样须具有的共同条件外，应：（1）试剂与被分析物反应迅速；（2）衍生试剂转化率高，过量少，以免干扰衍生物的检测.进展文献邓樱花，王红，张华山，高效液相色谱和毛细管电泳分离荧光检测小分子氨基生物物质的进展，分析科学学报，2010，26（1）：
3、103衍生试剂种类与应用胺的衍生试剂巯基的衍生试剂羟基的衍生试剂羰基化合物的衍生试剂羧酸的衍生试剂分离对映体的手性衍生试剂被衍生的氨基化合物氨基酸神经递质氨基酸谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)、β-丙氨酸(β-Ala)、牛磺酸(Tau)等神经递质多巴胺、肾上腺素、去甲基肾上腺素小肽和肽段二甘肽，三甘肽，谷胱甘肽，脑啡肽等磷酸化氨基酸磷酸化丝氨酸(P-Ser)、磷酸化苏氨酸(P-Thr)和磷酸化酪氨酸脂肪胺生物胺腐胺、尸胺、精胺、亚精胺蛋白质胺的衍生试剂芳香邻二醛类异硫氰酸酯类
4、酰氯类羰酰氯类磺酰氯活性卤类N-羟基琥珀酰亚胺活性酯类其它芳香邻二醛类OPA、2，3-萘二醛（NDA）、3-（2-呋喃甲酰基）-喹啉-2-羰醛（FQCA）、3-（4-羧基苯甲酰基）-喹啉-2-羰醛（CBQCA）.Fig.1-2.Typicalelectropherogramofa500nLaliquotofderivatizedmicrodialysatefromtheratstriatum.Theseparationbufferwas75mMboratebuffer(pH9.2)containing70mMSDSand1
5、0mMHP-β-CD.ISwascysteicacid.He-Cd激光器Electrophoresis2003,24,3187–31962,3-萘二醛(NDA)衍生CE-LIF分离检测活体中的GABA、Glu、L-Asp检测限:0.6-3nM.异硫氰酸酯类苯异硫氰酸酯（PITC）PITCPTC-氨基酸PTH－氨基酸Edman试剂紫外检测254nm衍生物稳定，分析时间也较短副产物、溶剂等多种干扰因素可通过高效蒸发除去,较烦琐30min内分离20余种氨基酸4-N，N-对二甲胺基偶氮苯-4ˊ-异硫氰酸酯（DABITC）4-（5，
6、6-二甲氧基苯并噻唑）苯异硫氰酸酯荧光素异硫氰酸酯（FITC）J.Chromatogr.B,2001,758,277-282Fig.1-1.Electropherogramofstandardaminoacids(eachaminoacidsconcentration:2.5×10-8M).(1)Arg,(2)Lys,(3)Gln(4)GABA,(5)Ala,(6)Gly,(7)Glu,(8)Asp,(a)FITC,(b)decompositionproductsofFITC.下丘脑的神经递质氨基酸在运动中枢神经中起着重要
7、作用荧光素异硫氰酸酯(FITC)衍生CE-LIF分离测定大鼠下丘脑中的八种氨基酸衍生条件：pH10硼砂缓冲溶液,室温,避光17hFig.1-3.TypicalchromatogramofSIFAderivativeswithamines.Mobilephase:methanol–water(46/54,v/v)solutioncontaining10mmol/LpH5.40citricacid–Na2HPO4buffer;amineconcentration:0.1mmol/L;fluorescencedetectionw
8、avelengths:λex/λem=488/516nm.(1)Methylamine(2)ethylamine(3)ethylenediamine(4)FOAA(hydrolyzedproductofSIFA)(5)isopropylamine(6)isobutylamine(7)n-butylami
