小鼠经口染毒急性毒性评价.doc

《小鼠经口染毒急性毒性评价.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、亚硝酸盐的急性毒性评价摘要：此次试验主要是研究亚硝酸钠的急性毒性评价，通过对健康小鼠的选择，有毒性资料可查得亚硝酸钠的急性经口染毒LD50值，依据霍恩氏法LD50计算的设计原则按照随机数分组的方法将动物分成4个染毒组，每组4只小白鼠。一次灌胃给予受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，分析中毒死亡的原因，必要时进行解剖，观察受试物毒性反应与剂量的关系，采用霍恩氏法求出亚硝酸钠的半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将亚硝酸钠进行急性毒性分级，从而外推到人，推测亚硝酸钠的毒性对人的影响。关键词：小鼠、亚硝

2、酸钠、急性毒性、LD50、霍恩氏法1．前言亚硝酸钠（NaNO2），是亚硝酸根离子与钠离子化和生成的无机盐。亚硝酸钠易潮解，易溶于水和液氨，其水溶液呈碱性，其pH约为9，微溶于乙醇、甲醇、乙醚等有机溶剂。亚硝酸钠有咸味，又是被用来制造假食盐。亚硝酸钠暴露于空气中会与氧气反应生成硝酸钠。若加热到320℃以上则分解，生成氧气、氧化氮和氧化纳。接触有机物易燃烧爆炸。由于其具有咸味且价钱便宜，常在非法食品制作时用作食盐的不合理替代品，因为亚硝酸钠有毒，含有工业盐的食品对人体危害很大，有致癌性。亚硝酸钠是国家规定允许添加的食品添加

3、剂。肉类制品加工中用作发色剂，可用于肉类罐头、肉类制品。在肉制品中对抑制微生物的增殖有一定作用(对肉毒梭状芽孢杆菌有特殊抑制作用)，能提高腌肉的风味，而且亚硝酸钠还可作杀菌剂，抑制肉制品中微生物的生长。亚硝酸钠虽然应用于多方面的工业用途途中，但在食品方面，中国食品添加剂使用卫生标准规定:食品级亚硝酸钠用作食品添加剂时，最大使用量为0.15g/kg，残留量：肉类罐头≤0.05g/kg，肉制品≤0.03g/kg,因为如果人体摄入过多的亚硝酸钠就会导致机体致癌和后代畸变，过多的使用对人体的危害非常巨大。因此，对亚硝酸钠的急性

4、毒性评价的研究就非常有必要。2．材料与方法2.1材料实验动物：选取健康成年小鼠（30g左右），试验前要对动物饲养观察2~3天，以适应饲养环境，并淘汰不健康或体重不符合要求的动物。2.2仪器与试剂2.2.1器材：注射器，灌胃针，普通天平，电子天平，吸管，吸球，容量瓶，玻璃棒，烧杯，试剂瓶；2.2.2试剂：亚硝酸钠，蒸馏水。2.3实验方法2.3.1实验动物与分组：选健康成年小鼠(30g左右)，同性别实验动物个体间体重相差不得超过平均体重的10%，且此次试验所用的小鼠均为雄性小鼠，所得出的结论只能代表单一性别的实验情况。试验

5、前动物要在试验环境中至少适应2~3d时间，以适应饲养环境，并淘汰不健康或体重不符合要求的动物本次试验取体重28.0~34.0的小鼠，试验时，将小鼠称体重、编号、按随机分组原则，按随机分组表将实验动物分成4组，每组4只。16只小鼠的完全随机分配表如下动物编号12345678910111213141516随机数字09472796544917460962905284772708余数121211122021所属组别ACBDBACDACDBDBAC小鼠体重g28.828.729.928.430.830.029.629.732.2

6、31.031.032.035.432.834.433.42.3.2剂量选择：经过预试或查资料得到LD50的大致范围，经查资料得口服-小鼠LD50为:200mg/kg；各剂量组的间距可根据LD50计算方法要求按等比级数或等差级数安排。本实验用霍恩氏发法计算LD50，各组间计量递增公比为10^(2)，，由于温度越低亚硝酸钠的毒性越大，且实验室的温度较低，因此将LD50为:200mg/kg设为第三剂量组，则染毒剂量组剂量分别为46.4mg/kg、100mg/kg、215mg/kg、464mg/kg。2.3.3受试化学物配制与

7、稀释1、亚硝酸钠溶液以蒸馏水为溶剂配制成溶液2、受试物的配制（等容量稀释）：根据计算结果精确量取需要的受试物的量，稀释成需要的浓度。配制步骤：组号ABCD染毒剂量46.4mg/kg100mg/kg215mg/kg464mg/kg每只小鼠染毒毫克数（以每组小鼠平均体重计算）1.5455mg3.0826mg6.7134mg14.442mg浓度0.7273g/100ml1.5413g/100ml3.3567g/100ml7.2210g/100ml又每组实验动物都为四只，且计算其灌胃量由平均体重计算出来的，即每只小鼠所灌胃的体

8、积是一样的，都为0.2ml，所以均用100ml容量瓶配置的四个不同浓度的亚硝酸钠溶液，根据上面表格数据得每组称取亚硝酸钠的克数为0.7273、1.5413、3.3567、7.2210，分别溶于100ml水中即可（若因溶解度限制可更据实验情况调整溶剂体积，但浓度不变）。2.3.4灌胃：1、灌胃实验试验前实验动物应禁食（一般6~8小时