热处理在脑缺血再灌注损伤中作用和其机制

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1、热处理在脑缺血再灌注损伤中作用和其机制　　【摘要】目的：明确热处理对脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法：将实验大鼠随机分为热处理组与对照组，对比观察两组动物脑缺血10min再灌注后12h时脑组织内HSP70的表达及超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）的活力。结果：热处理组的SOD活性及HSP70蛋白的表达于缺血再灌注后明显高于对照组，而MDA的活性明显低于对照组。结论：热处理诱导产生的HSP70可能对脑缺血再灌注损伤有保护作用。热处理可能是通过HSP70清除脑组织自由基和修复脑组织损伤蛋白质，进而

2、实现对脑缺血再灌注损伤的保护作用。【关键词】热休克蛋白70；脑；缺血再灌注损伤4热休克蛋白（HSP）是最保守的一类蛋白质家族，也是大多数生物体内存在的最丰富的一类蛋白质家族。几乎所有的细胞受到应激后都会产生该类蛋白质，其最主要的作用是发挥分子伴侣作用而起到保护和修复受损蛋白的作用，其中尤以HSP70的研究最为深入[1-2]。目前研究发现，有很多应激原可以促进HSP的产生来对细胞施加保护作用，与此同时又可以通过增加的HSP去保护细胞免受其他应激原的损害，此现象称为交叉耐受性[3]。既往研究发现，热应激预处理

3、可以增加机体对其后的肝缺血再灌注损伤的耐受性[4]。本实验的目的主要是探讨热处理诱导产生的HSP70，对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。1材料与方法1.1实验材料Wistar健康雄性大鼠体重200～250g；抗大鼠HSP70抗体购自武汉博士德生物工程有限公司；SOD和MDA试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.2模型制备方法1.2.1实验组模型制备大鼠实验前禁食12h，自由饮水，10%乌拉坦腹腔注射麻醉，麻醉后，将数字温度计的温度传感探头插入大鼠直肠内约6cm，其后将大鼠置于电热恒温培养箱中加热，

4、监测其直肠温度在（42±0.5）℃，维持15min后停止加热。动物恢复12h后，再次用10%乌拉坦腹腔注射麻醉，手术刀切开颈正中皮肤，分离并用无损伤血管夹夹闭左侧颈总动脉10min，再灌注12h后迅速断头取脑。1.2.2对照组模型制备动物饲育条件及处理过程同前，但不进行加热。其后进行脑缺血再灌注模型制备（过程同前）。1.3观察指标1.3.1脑组织HSP70表达的测定采用链酶亲和素-生物素-酶复合物（SABC）法。阴性对照采用PBS代替一抗。1.3.2脑组织SOD活性、MDA含量的测定4采用黄嘌呤氧化酶法测

5、定脑组织SOD活力；硫代巴比妥酸法测定脑MDA含量。具体操作按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒内操作指南进行。1.4统计学处理使用SPSS11.0软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，P　　[3]YellonDM，LatchmanDS，MarberMS.Stressproteins--anendogenousroutetomyocardialprotection：factorfiction？[J].CardiovascRes，1993，27（2）：158-161.[4]孙永建，王前，裴国

6、献，等.热应激预处理对大鼠肢体缺血后血清丙二醛、超氧化物歧化酶的影响[J].第一军医大学学报，2002，22（6）：506-508.[5]夏强，钱令波.心脑缺血再灌注损伤的机制及防治策略研究进展[J].浙江大学学报（医学版），2010，45（6）：551-558.[6]乜全民，张世明.大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后自噬的初步研究[J].中国临床神经科学，2010，18（1）：14-18.[7]赵雅宁，吴晓光，李建民，等.中药补阳还五汤对沙鼠脑缺血再灌注损伤及微循环障碍的治疗作用[J].四川大学学报（医学版）

7、，2010，41（1）：53-56.[8]WangJL，KeDS，LinMT.Heatshockpretreatmentmayprotectagainstheatstroke-induced4circulatoryshockandcerebralischemiabyreducingoxidativestressandenergydepletion[J].Shock，2005，23（2）：161-167.[9]ZeeuwS，LamerisTW，DunckerDJ，etal.Cardioprotectioni

8、npigsbyexogenousnorepinephrinebutnotbycerebralischemia-in-ducedreleaseofendogenousnorepinephrine[J].Stroke，2001，32（3）：767-774.[10]WynnRM，DavieJR，CoxRP，etal.Molecularchaperones：heat-shockproteins，foldases，andmatchmak