最新植物生化制药 第五章 核酸类药物【PPT】教学讲义PPT课件.ppt

《最新植物生化制药 第五章 核酸类药物【PPT】教学讲义PPT课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、植物生化制药第五章核酸类药物【PPT】98%分布于细胞核，其余分布于核外如线粒体，叶绿体。主要分布于细胞质（90%），剩余10%位于细胞核。(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脱氧核糖核酸核糖核酸携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型(genotype)。参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。核酸碱基戊糖核苷磷酸核苷酸核酸类药物是具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷以及碱基的统称。除了天然存在的碱基、核苷、核苷酸外，它们的类似物、衍生物或这些类似物、衍生物的聚合物也属于核酸药物。2.纯化（1）密度梯度离心

2、法（2）柱色谱法（3）凝胶电泳法（三）含量测定定磷法（1）核酸样品用硫酸消化，将有机磷转化成无机磷；（2）制定定磷标准曲线；（3）测定回收率和样品总磷量。(NH4)MoO4+H2SO4H2MoO4+(NH4)2SO4H3PO4+12H2MoO4H3P(Mo3O10)4+12H2OH3P(Mo3O10)4Mo2O3•MoO3（钼蓝）定糖法Vit•CRNA中的戊核糖可在盐酸的水解作用下游离出来，进一步形成糠醛，然后与地衣酚反应，反应物程鲜绿色，在670nm有最大吸收峰。二、DNA的制备材料的选择与处理2.提取与纯化3.含量测定（1）定磷法同RNA（2）定糖法又称二苯胺法，在酸性溶液中，将DN

3、A与二苯胺共热，形成蓝色化合物，该化合物在595nm有最大吸收。当DNA浓度在20-200ug/mL时，光吸收度与DNA浓度呈正比。三、核苷酸、核苷及碱基的制备（一）制备方法1.直接提取法2.水解法（1）酶水解法（2）碱水解法（3）酸水解法3.化学合成法4.酶合成法5.微生物发酵法光合磷酸化法制备ATP的工艺流程5′-AMP[溶解，混合]Na2HPO4，Tris，PMS肌激酶，ATP（引子）混合液反应液ATP粗制品上清液滤液ATP成品ATP沉淀洗脱液（含ATP）吸附物流出液[光合]叶绿体pH3,1-1.5h[沉淀]三氯乙酸10℃以下[提取]乙醇10℃4-5h[干燥]乙醇，乙醚减压[去阳离

4、子]732树脂pH6→1→2[除热源、沉淀]硅藻土、乙醇[去杂质]蒸馏水、硅藻土[洗脱]NaCl溶液pH3.8[吸附]NaOH，717树脂pH6.5-7ATP的药理作用与临床应用在生物体内，ATP广泛参与各种生化过程，除参与核酸形成外，主要起着供应能量和磷酸基团的作用。ATP除了作为危重病人抢救的辅助药物外，还可对慢性肝炎、肝硬化、肾炎、心肌炎、冠状动脉硬化、进行性肌肉萎缩、再生障碍性贫血、脑血管意外后遗症、中心性血管痉挛性视网膜脉络膜炎、风湿性关节炎、耳聋、耳鸣等有一定疗效。第五章酶类药物第一节概述一、酶类药物发展简史酶类药物是直接用各种剂型的酶以改变体内酶活力，或改变体内某性质生物活

5、性物质和代谢产物的数量等，从而达到治疗某些疾病的目的。1926年，Sumner将尿素酶结晶是药用酶工业化的起点。1952年，Innerfield首次将结晶的胰蛋白酶用于治疗血栓性静脉炎，真正揭开了酶在医疗应用的序幕。20世纪60年代后期，逐渐发展到从微生物发酵液中获得大量的酶。70年代后，开始利用人的某些组织细胞培养技术和基因工程手段来获取有关的酶，使酶类药物的应用得到了迅速发展。对酶类药物的要求1.药用酶应在生理环境（pH中性）下具有最高活力和稳定性。2.对其作用的底物具有较高的亲和力。3.在血清中半衰期较长。4.要求纯度高，特别是对注射用的酶类药物纯度要求更高。5.酶应免疫源性较低或

6、无免疫源性。二、酶的分子组成及分类1.酶分子的组成①单体酶②寡聚酶③多酶复合体酶有机物分子金属有机物金属辅酶或辅基（非蛋白部分）酶蛋白复合蛋白质单纯蛋白质（单体酶）2.酶的分类分类名称催化反应的类型实例1氧化还原酶电子转移醇脱氢酶2转移酶转移功能基团己糖激酶3水解酶水解反应胰蛋白酶4裂合酶键的断裂丙酮脱羧酶5异构酶分子内基团的转移顺丁烯二酸异构酶6连接酶或合成酶键形成与水解偶联丙酮羧化酶表6-1酶的国际分类三、酶类药物的临床应用1.消化酶类2.抗炎、黏痰溶解酶3.与纤维蛋白溶解作用有关的酶类4.抗肿瘤的酶类5.其它生理活性酶6.复合酶表6-2酶类药物一览表第二节酶类药物的一般制备方法酶制

7、备过程的特点：一是某种酶在生物体内含量甚少，且有分布部位特异性。二是酶可以通过测定其活力加以跟踪。酶制备一般包括四个步骤：酶的原材料的选择与处理；酶的提取；酶的纯化；酶活力的测定和纯度检测。一、酶的原材料选择与预处理（一）原材料的选择（1）了解目的酶在生物材料中的分布特点，选择适宜的生物材料。（2）考虑生物在不同发育阶段及营养状况时，酶含量的差别及杂质干扰的情况。（3）原料来源是否丰富，原料易得，原料产地较近。（4）提取步骤是否简便