最新实验一细菌形态学检查教学讲义ppt课件.ppt

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1、实验一细菌形态学检查【实验目的】1． 掌握临床微生物实验室规则，生物安全及其它注意事项。2． 掌握显微镜油镜的使用和保护。3． 熟悉显微镜的结构和各部分的功能。4． 不染色和各种染色标本的显微镜观察。5． 细菌特殊结构的染色与观察。【实验内容】光学显微镜的使用不染色标本的检查革兰氏染色和细菌基本形态观察细菌特殊结构染色和观察不染色标本检查法1压片法（压滴法）1.用接种环分别取细菌2~3环，置于洁净载玻片中央2.轻轻覆上盖玻片3.油镜下观察不染色标本检查法2悬滴法染色标本检查法染色基本步骤：涂片：干燥：室温自然干燥固定：杀死细菌;使菌体与玻片粘附;菌体蛋白变性易着色染色：革兰染色镜

2、检革兰染色-基本步骤a)初染：结晶紫1min；b)媒染：碘液1min；c)脱色：95%乙醇至无紫色脱落为止；d)复染：石碳酸复红30s，自然干燥后镜检革兰染色-结果与注意事项结果判断：紫色为革兰阳性菌、红色为革兰阴性菌注意事项：涂片不宜过厚固定不宜过热脱色是关键：脱色不够：革兰阴性菌革兰阳性菌脱色过度：革兰阳性菌革兰阴性菌18~24h菌龄最佳已知金葡与大肠作为阳性和阴性对照特殊染色（示教）鞭毛染色芽胞染色荚膜染色鞭毛染色-套组内容及规格鞭毛染色-工作液配制根据使用量将A液、B液、C液等比例混合，并置于工作液过滤瓶内，混合均匀静置2h后方可使用工作液2~8℃约可保存2~3天鞭毛染色

3、-玻片的处理鞭毛染色成功与否，与玻片的洁净度有非常密切的关系取新的载玻片，先用洗洁精清洗干净后，再浸泡在3%盐酸酒精2天以上，使用时从酸性酒精中取出，并用纯水冲洗干净，再以干净纱布擦干或自然干燥后使用鞭毛染色-涂片的制备将菌种接种在肉汤管中，经24h37℃孵育后离心，倒掉上清液，用接种环沾取沉淀物一环置于玻片的一端，并将玻片倾斜，使菌液自然流动至玻片的另一端，室温下自然干燥鞭毛染色-操作方法滴加工作液于玻片上，染色10~15min将玻片微倾斜，用蒸馏水一滴滴冲洗干净将玻片直立使水分流尽，自然晾干，镜检结果：菌体及鞭毛均为红色芽胞染色-染液规格石碳酸复红液20ml碱性品红脱色液20

4、ml乙醇碱性美蓝液20ml亚甲蓝芽胞染色-染色步骤与方法将有芽胞细菌制成涂片，自然干燥后加热固定滴加石碳酸复红液于涂片上，并弱火加热，使染液冒蒸气约5min，冷后水洗，并用脱色液脱色2min，水洗碱性美蓝复染30s，水洗，干后用油镜镜检结果：芽胞呈红色，菌体呈蓝色实验操作每组一套菌种：葡萄球菌：革兰阳性球菌大肠埃希菌：革兰阴性杆菌真菌：孢子变形杆菌：鞭毛染色（示教）枯草杆菌：芽胞染色（示教）革兰染色短语的结构类型主讲：王水法21要点：■14类常见短语的特点■不同短语类型间的区别与联系22（一）联合短语定义：由语法地位平等的两个或几个部分组成，构成并列、承接、选择或者递进等关系的短

5、语。如：a学校和工厂（并列关系）b讨论并通过（承接关系）c升学或就业（选择关系）d积极而且热情（递进关系）■特点：a一般是同词性词语相连b意合法或关联法构成23（二）主谓短语定义：由主语和谓语两个部分构成，主语在前，谓语在后，其间为陈述关系的短语。类型：a动词性谓语：思想解放b形容词性谓语：行为端正c名词性谓语：今天星期四24（三）同位短语（复指短语）定义：多由两个部分组成，前后各部分的词语不同但所指相同，语法地位一样，共作一个成分的短语。如：首都北京/祖孙三代/1999年那年另外，还有一种松散的同位短语，其中可以有语音停顿和标点。如“一只野兔，这个可怜的家伙，窜上了公路。”的主

6、语。25思考：“明天星期三”和“船长老王”都是“名+名”的形式，为什么一个是主谓短语，一个是同位短语？26★主谓短语与同位短语区别A、主谓短语两个词语间是陈述与被陈述关系，中间可加判断动词“是”；同位短语两个词语则是对等关系，不能加“是”，加了就是主谓短语了。B、一般而言，同位短语的几个词语间可颠倒，主谓短语则不可。如：明天星期三（主谓短语）→明天是星期三船长老王（同位短语）→老王船长27（四）中补短语（述补短语、后补短语）定义：由两个部分组成，补语附加在中心语之后，后一部分补充说明前一部分，有时有“得”表示的短语。如：a干得好b听不明白c去一趟d高兴得跳起来■类型：a动补：看了

7、一眼b形补：美丽极了28定义：由修饰语和中心语两个部分组成，修饰语在前，描写或限制中心语，其间是修饰关系的短语。类型：A.定中短语由定语和名词中心语组成，前后有修饰关系，有时用“的”表示。如：a英雄气概b群众的智慧B.状中短语由状语和谓词性中心语组成，前后有修饰关系，有时用“地”表示。如：a十分热烈b紧张地劳动（五）偏正短语29（六）动宾短语定义：由动语（A）和宾语（B）两个部分组成，动语在前，宾语在后，之间为支配、关涉关系。AB间用语序表示而不是用虚词表示的短语。类型：a想他（