最新十四免疫学实验技术抗原-抗体反应-药学医学精品资料.ppt

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1、最新十四免疫学实验技术抗原-抗体反应-药学医学精品资料第一节抗原-抗体反应抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生特异性结合,呈现某种反应现象因抗体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术由于抗体纯化技术及单克隆抗体技术的发明与应用,抗体不一定来自血清,因此,血清学反应已不能完全代表抗原-抗体反应。2、抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合(可逆性)结合力的大小取决于两分子间由氢键、疏水键、静电引力和范德华力组成的引力与电子云产生的排斥力相互作用后的合力两分子之间有较强的结合力,但在一定条件下,可发生解离,解离后的抗原和

2、抗体性质不变.抗原与抗体的结合是分子表面的结合,这一过程受物理化学的、热力学的法则所制约,结合的温度应在0-40℃内,pH在4-9范围内。如超过60℃或pH降到3以下时,则抗原抗体复合物又可重新离解。利用抗原抗体既能特异性结合,又能在一定条件下重新分离,可进行亲和层析,以制备免疫纯的抗原或抗体。3、抗原-抗体反应可分为两个阶段(反应的阶段性)第一阶段为特异性结合阶段,此阶段需时短,无可见反应出现第二阶段为可见反应阶段,需时较长,出现可见现象,表现为沉淀、凝集和细胞溶解等。4、抗原与抗体结合是否呈现明显可见的反应现象,与两者的分子比例密切相关(最适

3、比例性)只有在抗原与抗体呈适当比例时,结合反应才出现凝集,沉淀等可见反应结果,在最适比例时,反应最明显。因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反应的现象,称为带现象。凝集反应时,因抗原为大的颗粒性抗原,容易因抗体过多而出现前带现象,因而需将抗体作递度稀释,而固定抗原浓度。沉淀反应的抗原为小分子的可溶性抗原,通常稀释抗原,以避免抗原过剩而出现后带现象。抗原抗体反应主要影响因素1、电解质在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电荷,适当浓度的电解质会使它们失去一部分负电荷而相互结合,出现明显的沉淀或凝集现象。通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液,以供给适当浓度

4、的电解质。2、温度一般常使反应在37℃水浴中进行。3、酸碱度抗原-抗体反应适宜的pH为6-8抗原-抗体反应种类根据抗原的物理性状及参加反应的成分不同,分为:沉淀反应可溶性抗原与相应抗体结合所发生的反应凝集反应颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的反应补体结合反应抗原抗体结合后激活补体所致的反应中和反应细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应本章思考题简述抗原抗体反应的特点及影响因素我国某出口货物的CIF净价为100美元/件,佣金率5%,试计算该货物的CIFC5%价。(计算结果保留两位小数)解:CIFC5%价=净价÷(1-佣金率)=100÷(1-5%

5、)=105.26(美元/件)答:该货物的CIFC5%价105.26美元/件。某商品FOBC3%上海,每箱1000英镑,现中间商要求佣金增加至5%,若不减少外汇收入,应改报FOBC5%为多少?(计算结果保留小数点后两位)某商品价格为CIF新加坡,每公吨2000美元,现中间商要求获得5%的佣金,为不使净收入减少,则报价CIFC5%新加坡多少?(计算结果保留小数点后两位)净价=含佣价×(1-佣金率)含佣价=净价÷(1-佣金率)=2000÷(1-5%)=2105.26美元我国某出口货物的CFR净价为100.00美元/件,佣金率2%,试计算该货物的CFRC

6、2%价。(计算结果保留两位小数)解:CFRC2%价=净价/(1-佣金率)=100/(1-2%)=102.04(美元/件)答:该货物的CFRC2%价为102.04美元/件。我国某出口货物的CFR净价为100.00美元/件,佣金率2%,试计算该货物的CFRC2%价。(计算结果保留两位小数)解:CFRC2%价=净价/(1-佣金率)=100/(1-2%)=102.04(美元/件)答:该货物的CFRC2%价为102.04美元/件。我国某公司与泰国一家公司洽商一批商品,我方原报价为每公吨1000美元CFR曼谷,后外商来电要求改报CFRC5%曼谷。为保持我方的

7、净收入不变,试计算对外改报的CFRC5%曼谷价应是多少?(计算结果保留两位小数)解:CFRC5%曼谷=净价/(1-佣金率)=1000/(1-5%)=1052.63美元答:对外应报的含佣价为1052.63美元。我国某公司就某商品对外商报价为100美元/公斤,CIF新加坡,该外商回电要求我方改报CIFC2%新加坡价格,在保证我方外汇收入不减少的条件下,试计算该新报价应为多少?(计算结果保留到小数点后两位)答案:CIFC2%=CIF/(1-2%)=100/(1-2%)=102.04美元/公斤我国某公司对某种商品的对外报价为每公吨CIF纽约1500美元,

8、外商要求改报含佣价,佣金率为5%,为保证我方外汇收入不变,试计算CIF5%纽约的报价应该为多少。(计算结果保留到小数点后两位)解:CIF

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